Intern ati o n a l   Jo urn a l  o f  P u b lic Hea l th Science (IJ P HS)  V o l.4 ,  No .3 , Sep t em b e r  20 15, pp . 159 ~163  I S SN : 225 2-8 8 0 6           1 59     Jo urn a l  h o me pa ge : h ttp ://iaesjo u r na l.com/ o n lin e/ind e x.ph p / IJPHS  Black Cumin Seed Oilas Hepatopr otector in Decreasing SGPT  and SGOT Activity and Increasi ng p53 Gene Expression in  Sprague Dawley  Rats Induced by Alloxan       Akr o m 1,2 , Endang  Darmaw a n 1 , Liesma   Yuhelv ia 1   1 Faculty   of Phar macy , Univ ersitas Ahmad Dahlan, Yog y ak arta, I ndonesia  2 Drug Information and Cr isis Center, Univer sitas  Ahmad Dahlan, Yo g y akart a ,  Ind ones i a       Article Info    A B STRAC Article histo r y:  Received  J u n 27, 2015  Rev i sed  Au 20 , 20 15  Accepted Aug 29, 2015      The obj ect ive o f  this  res e arch  was  to det e rm ine the  effe ct of  BCS O on   SGPT/SGOT levels and  p53 expression in  r a ts induced  b y  alloxan. This   stud y  app lied a  post test only   control  group design. A total of  42 SD rats  were divid e d in to 6 groups. Group I was normal rats . Group II (negative  control) w a s giv e n alloxan .  Gro up III  and  IV (tr eatment groups) were g i ven   BCSO with equ i valent doses of  6.8 mg/kg  and  68 mg/kg th ymoquinone,  respectively   (B CSO 6.8 and B C SO68 gr oups). Group V (positive  control)   was given vitamin C. Group VI  (cont rol media)  were giv e n DMSO. BCSO  and Vitamin C are given for 1  week. Allox a n was given on 7 th  d a y ,  i . p .  O n   the 8 th  day  did b l ood sampling for measurem ent of SGPT and SGOT levels Liver r e tr ieval was perfo rmed on the 9 th  day continu e d   immunohistochemistr y  staining . The  aver age levels of SGPT/SGOT were  then an aly z ed  with ANOVA  test. p53  ex pression was analy z ed b y   Kolm ogorov Se m i rnov and Lev e ne th en follow e d b y  Kruskal  Wallis and   Mann-W h itne y .  Statist i ca l t e sts perform ed on  95% confid ence lev e l. Th results showed that the indu ction  of  alloxan incr eased levels of SGPT/SGOT.  BCSO68 reduced SGPT /SGOT  levels in   allox a n-induced rats  (p < 0.05) Both BCSO 6.8  and BCSO68 in creased  th e expr ession of p53  in  liver tissue  of alloxan – ind u ced rats . Average percen tag e  of p53 expression in group I to  group VI were 11.12 ± 0.37; 19 .24 ± 4. 47; 30.31  ± 1.59; 40.43 ±  1.74; 29.67   ± 0.47; 12.02 ± 1.01, respec ti vel y . The  r e sult  of statisti cal ana l y s is  showed  the value of p  < 0.05 in  all grou ps except  in gro up III. It  can b e  conclud e d   that BCSO may have hepatopro t ective ef f ect  an d incr eas the  e xpres s i on of  p53 in  the liv er  of alloxan-indu ced rats. Keyword:  Al l oxa n   Black cum i n s eed  oil   Hepat o p r ot ect or   Im m unohi st oc hem i st ry  Nig e lla  sa tiva   Ox i d ativ e stress   Copyright ©  201 5 Institut e  o f   Ad vanced  Engin eer ing and S c i e nce.  All rights re se rve d Co rresp ond i ng  Autho r Ak rom ,   Depa rt m e nt  of   Pha r m acol ogy  and Clinical Pharm acist,   Faculty of Pha r m acy, Univ er si t a s Ahm a d D a hl an    Dr ug  I n f o rm ation  an d C r i s i s   C e nt er,  U n i v e r si t a s Ahm a d D a hl an,     Pho n e : +62 813 28 123 818 Em a il :ak r o m @ph a rm .u ad.ac.id       1.   INTRODUCTION   Oxi d at i v e st res s  can affect   va ri o u s o r ga ns.  I n st ead  of  panc reas, o n of  or gan  whi c h i s  v u l n e r abl e  t o   dam a ge due  t o   oxi dat i v e st re s s  i s  l i v er.  Li ve r  i s  t h e l a r g est   o r ga n i n  t h b o d y  whi c has a  vari et y  o f  f u nc t i ons   t o  sust ai n t h e s u r v i v al   of m o st  or ga ns i n  t h bo dy Hepat i c   dy sf unct i o de m onst r at ed by   t h e i n creas ed a c t i v i t y   o f  th SGPT an d SG O T  en zyme [ 1 ], [2 ].  The pre v e n t i o n of   de ge nera t i v di seases  due   t o  o x i d at i v st ress   can   be d one   by   co ns um i ng  ant i oxi dant [ 3 ] , [ 4 ] .  B l ack  cum i n seed oi l  (B C S O)  has  t h e m a i n  co m poun d o f   t h y m oqui n one  al l e gedl y   havi ng  he pat o pr ot ect i v e act i v i t y  t h ro u gh  ant i oxi dat i v m echani s m  [5] , [6] .  P r evi ous  researc h  re p o rt e d   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                        I S SN 2 252 -88 06  I J PH S Vo l. 4 ,  N o . 3 ,  Sep t emb e 201  1 59   16 16 0 thym oqui none  has a n  a n tioxidant, a n ti- infe ctive, and a n tihistam i ne effe cts [7]-[9]. But th e m echanism  of  B C S O p r ot ect s t h e l i v er  f unct i on a n d p 5 3  ex pressi o n  i n   rat  was  un k n o w n.  Thi s  st u d y  wa s  aim e d t o  det e r m i n e   t h e ef fect   of B C SO  on  l e vel s   of  SG OT/ S GP T an p 5 3  ex pr essi on  i n  l i v e r   rat s  i n duce d   by  al l oxa n.       2.   R E SEARC H M ETHOD      2. 1.   Ma terials   B l ack cum i seeds we re o b t ai ned fr om  t h e di st ri but or  o f  her b al  i n g r e d i e nt s i n  Sem a ran g . T h e   authe n ticity of black c u m i seeds carried  out at th e La boratory of  Pharm aceu tical  Biology, Fac u lty of  Pha r m acy, Gadja h  Mada  University, Yogy akar ta.  Oth e materials are wh ite m a le rat s  ( Ra ttus no rveg icu s Sp ragu Dawl ey strain   o b t ai n e d fro m  BPOM Jak a rta,  d i stilled  water, allo x a n ,  d e h ydrat io n  so l u tio n (alco h o l   70 %,  90 %,  9 5 % , an d a b s o l u t e ), cl eari n s o l u t i o (xy l ol ) ,  PB S,  n o rm al  ser u m ,  H2O 2 , m e t h anol , a n t i - p5 m onocl onal  an t i body para ffi n, 0 . 9%  NaC l  phy si ol o g i cal , xy l e ne, pe r oxi dase bl o c ki ng  sol u t i o n, c h r o m ogen  DAB  ( D i a m i nobe nzi n i d i n e )  and   hem a t oxy l i n   eo si n.     2. 2.   Met h o d s   2. 2. 1.   Prepar ati o n o f   B C SO   B C S O was  o b t ai ned by   pres si ng  bl ack c u m i n seeds. B l a c k cum i n seed s 40 0 g  p r esse d  wi t h  en gi ne   po we of  6 0 0  t ons . T h oi l  w a s col l ect ed i n   a pet r i   di sh  set e ri l  t o   be st ore d  at   ro om  t e m p erat ure .     2. 2. 2.   The hep a topr otec tive  ac tivi ty te s t   of BCS O  induce d  b y   alloxan   Forty two rats  were  divide d i n to  six  groups , each consisting of 7  a n im a l s. Group I  (normal), Group  II  (ill), Group   III, IV  were t r eated  b y  BCSO at do se  6 . 8   m g /k g  and  68   m g /k g  B W Gro u p   V as th po sitiv cont rol  gr o up were gi ve n vi t a m i ne  C .   Gr o u p   V I  was  c o nt r o l   sol v ent  g i ven DM S O . B C S an d Vi t a m i were  gi ven  d u r i ng  o n week , t h en  al l oxa wa s gi ven  o n   day   7.     2. 2. 3.   Measurement  of SGPT  and  SGPT level   B l oo d sam p l e s was i n se rt ed i n t o  e p en dr o ff  cont ai ni ng  he p a ri n. T h bl o o d  cent r i f u g e d  a t  a speed  of  4 000  rp m .  On ce cen trifug ed, th e sam p les were sep a rate d  by  usi n pi pet .   S G PT/ S GO T l e vel s  o f  sam p l e s was   d e term in ed  usin g 200  m L  sam p le wh ich   was add e d  in 100 μ lm onorea g en.  Each inc u bated at a tem p erature   of  2 5 0 C  f o 60  seco n d s a n d t h en  rea d  at  a  wavel e ngt of   34 nm  (A 1) Wai t  6 0  sec o n d s a n d t h e n   re - r ead  t h abs o rbance  (A2), wait  60 se conds ,  and  rea d  a g ain  (A 3).  Abs o rba n ce  us ed to m easure levels of  SGPT and  SG OT  usi n g t h e eq uat i on:     L e v e ls   o f  SG OT  or  SG PT  (U   / I )  =  Δ A / m i n  x   Form ula:  Δ A / m i n = (( A1 -A 2 )  +  (A 2 - A3 ))/ 2   F = Facto r  (9 71   2. 2. 4.   p5 3 e x pressi o n  ex ami n ati o n   Li ver ret r i e val  i s  perf orm e d on  9t day  by   m eans of cer vi cal  di sl ocasi o . Li ve r was  cut  usi n g a   m i crot om e.  In  t h e dehy drat i o n pr ocess  of   t i ssue  s ect i ons  w a ad de t o  a sol u t i o n of t h al coh o l  conce n t r at i on  of m u lti-storey. The tissue wa s then pu t in a solution of pure xylol alcohol  duri n g 2x2 hour. The ne xt process   is th e im p r egnatio n .  Th is pro cess is in clud ed in th e li qu id   p a raffin tissu fo r 2x2   h our. Th e last step  is  em beddi ng In   t h i s  p r oce ss t h e t i ssue em bed d ed  i n   pa raf f i n  sol i d  ha vi n g  a  m e l t i ng p o i n t   of  5 6 0 C - 58 0C   unt i l   t h e pa raf f i n  s o l i d i f i e s [ 1 0] .  The  he pat i c  sam p l e  was fi ni she d   pre p ara t i ons m a de I m m unohi st och e m i st ry   st ai ni ng . p 5 3  e x p r essi on  (b r o wn ) wa s o b se r v ed i n  cel l s  us i ng a l i g ht  m i crosc o pe wi t h  a   m a gni fi cat i o n  of  4 0   ti m e s.     2. 2. 5.   Da ta  A n al ysi s   Perce n t a ge o f  p5 3 ex p r essi o n  was cal cul a t e d by  (n um b e r o f  cells th at ex p r essed  / to tal cell n u m b e r)  100% . Anal ysis applied the Kolm ogorov-Sm irnov and  Le ve ne statistical tests followed by  Krus kal  W a llis  an d Mann -W h i tn ey test on   95% confi d ence  l e vel.               Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I J PH S I S SN 225 2-8 8 0 6       Black Cumin Seed  Oilas  He patopr otector in Decre a sing SGPT and SG O T   Activity  and  ....   ( A krom)   16 1 3.   R E SU LTS AN D ANA LY SIS      3. 1.   Acti vity  SG O T   The res u l t  of  SG OT are  pre s ent e d i n  Ta bl e 1. Th e res u l t s  sho w e d  t h at  adm i ni st rat i on at  equi val e nt   dos es B C S O 6 . 8 an 68 m g  /  kg t h y m oqui n one  fo r 7  day s  di d n o t  af fect  t h e act i v i t y  of SG OT. S G O T  bef o r e   i n d u ced  by  al l oxa n i n   rat s  gi ven B C S O a n d  vi t a m i n C  are not   di ffe re nt  fr om  t h e norm a l   gr o u p .  The t r e a tm ent   g i v e n  to  th e test an i m als d i d  no t affect th e lev e ls of  SGOT  an d   do es no t ch ang e  th n o rmal co n d itio ns. SGOT  lev e ls are normal in  th is st ud y is  d i fferen t   fro m  th at  ex pressed  b y  G i kn i s   and   Cliff o rd  ( 200 8)  [ 1 1 ]   in w h ich   th e av erag e lev e o f   SGOT no rm al SD  rats  was  23 .3 5 ± 1.1 1  U / l. So l v en t DM SO grou p h a d h i g h e lev e ls  com p ared to t h e norm a l group  (p<0.05).  Him a wan (2008) [12] states that th e factors a ffecting the le vels of  SGOT, am ong others, th e psychological condition of  ra ts, liver disease, or i m m une from  each of the test   an im a l s. Mo reo v e r, accord i n g  to  W a lter  (20 08) [13 ]  th at   DMSO can ca use si de effect s that dam a ge  the liver  and ki dneys  that can ca use i n creased SGOT.      Tabl 1. T h e  S GOT  l e vel   of  r a t s  pre -  a n po st - i n duce d   by   al l oxan  wi t h  t r eatm e nt  of B C SO  or  vi t a m i n C   Groups   SGOT level   Pre(m e an  ± S D U/I  Post (m ean  ± SD U/I  Norm al  23. 35± 1. 10 7   23. 71 ± 0. 542 a   Negative contr o l (alloxan)   23. 35± 1. 10 7   33. 62± 0. 46 9*   BCSO 6. 23. 44± 0. 46 4   34. 88 ± 0. 600 *& **  BCSO 68  23. 58 ± 0. 619   30. 24 ± 0. 539 * a   Vitam i n C   22. 42± 0. 72 0   27. 86 ± 0. 552 * a   DM SO  25. 38 ± 0. 461 *     Ext : *  =  p  <  0. 0 5   (si g ni fi cant   d i ffere nce t o   no rm al  grou p ) ;  * * p >  0. 0 5   (n ot  si g n i f i c a n t     di ffe re nce t o  al l oxa gr o u p ) ;  a = p<0 . 0 5   (si g ni fi cant   di ffe re nc e t o  al l o xa gr ou p )       Al l oxa n i n d u ct i on  on  day   7 s h o w n t o  i n crea se t h e act i v i t y  of  SG OT.  Ne g a t i v e gr o u p ,  ha ve a  hi g h er   activ ity th an  n o r m a l SGOT (p  <0 .05 ) , in d i catin g  th at th e adm i ni st rat i on of al l o xan a ffe ct  l i v er fu nct i o n an d   in creasing  t h e activ ity o f  SGOT.  Accord in g to   resear ch Mard iastu ti  (2 002 ob serv ed  m i cro s cop i cally o n   al l oxan - i n d u ce d l i v er  1 25 m g  /  k g  s h o w e d  t h e p r esenc e   of l i v e r  dam a ge i n  t h e  f o r m  of de ge nera t i on t o   necr ose.   B C S O at  dos e  of 6 8  m g / kg  sho w e d  a si g n i fi cant differe n ce with the  ne gat i v e c o nt r o l  (p< 0 . 0 5) B C S O at  a  do s e  of  6 8  m g  /  k g   have  bee n  a b l e  t o  p r ev en t the in crease in   SGOT lev e ls  rats bu t no t yet reach ed  no rm al . Anot h e r st udy  co n d u c t e d by  Ju wi t a  (2 01 1)  [1 4]  p r o v e d  t h at  t h e adm i ni st rat i on of B C S O can l o w e r   el evat ed l e vel s  of  SG PT a nd  SG OT i n   rat s  i n d u ce d by  et ha nol Thy m oqui no ne, t h e m a i n  act i v e i n g r e d i e nt  o f   Nig e lla sativ a,  h a s b e en   repo rted  to  prev en t liv er dam a g e  in  rats th ro ugh  an tio x i d a tiv e and  an ti-i n flammato ry  m echani s m s  [ 15] , [ 1 6 ] .  Thy m oqui no ne ha ve ant i o xi da nt  act i v i t y   t h ro u gh t h do nat i o n o f  el ect ro ns  t o  free   rad i cals [1 7 ] ,[1 8 ] . BCSO  g r o u p  of 68  m g  / k g  wh en  com p ared  with  po sitiv e g r ou p  t h at v ita m i n  C  h a d  a  si gni fi ca nt   di ff erence , i n  w h i c h si m v ast a t i n  g r o u p   had  hi ghe r l e vel s  cl oser  t o   no rm al   3. 2.   Acti vity   S G P T   The re sul t  o f   SGPT a r pres ent e d i n   Tabl e  2. T h e res u l t s  sho w e d  t h at  a d m i ni st rat i on at  equi val e nt   dos es B C S 6 . 8 a nd  6 8  m g  / kg t h y m oqui n one  f o 7 day s  di not  a ffect   t h e act i v i t y  of  SGPT . S G PT  bef o r e   i n d u ced  by  al l oxa n i n  rat s   gi ven  B C S O a n d  vi t a m i n C  are  not   di f f ere n t  f r o m  t h e no rm al gr o u p  ( p >0 .0 5 ) . T h treat m e n t  g i v e n  to th e test  an im a l s d i d   no t affect th e lev e ls  o f   SGOT and   do es  no t ch ang e  th e no rm al  co nd itio ns b u t  DMSO  ad m i n i stratio n   i n creases SGPT lev e ls (p <0.05 )     Tabel   2. L e vel   of  SG PT l i v e r   rat s  p r e-  an p o st -i n d u ced  by  al l oxa n a n d  t r eat ed by  B C S or  vi t a m i n C  Groups   SGPT  level   Pre ( m e a n ± SD U/I   Post( m ean ±  SD U/I   Norm al  18. 73± 0. 63 8   19. 28± 0. 54 2 a   Negative contr o l (alloxan)   18. 15± 0. 26 8   27. 31± 0. 61 2*   BCSO 6. 18. 44± 0. 39 6   26, 78± 0. 00 *& **  BCSO 68  18. 98 ± 0. 554   24. 97 ± 0. 473 * a   Vitam i n C   17. 96± 0. 59 2   23. 01± 0. 55 4* a   DM SO  23. 28 ± 2. 288 *     Ext :   *   = p  < 0. 05   (si gni fi cant  di ffe re nce  t o   n o rm al   gro u p );  * *= p  > 0. 0 5  ( not  si g n i f i cant    di ffe re nce t o  al l oxa gr o u p ) ;   a =p<0 .0 5 (si g ni fi cant  di ffe re nc t o   al l o xa n gr ou p       Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                        I S SN 2 252 -88 06  I J PH S Vo l. 4 ,  N o . 3 ,  Sep t emb e 201  1 59   16 16 2 Aft e r  i n d u ct i o of  al l o xan   day   9 S G PT   l e vel s  we re  n o rm al  gr ou has si g n i f i cant  di f f ere n ce   com p ared t o   other treatm e nt SGPT  levels.  SGPT  leve ls  of  neg a tiv e gr ou p co m p ar ed   w ith  th e nor mal g r ou had si gni fi cant  di ffe ren ces.  G i vi ng al l o xa n a ffect  S G PT l e vels are charact erized  by  in creased   lev e ls o f  SGPT  m i ce was hi g h er  t h a n   no r m al  cont r o l   g r o u p  [ 1 9] Ac cor d i n g t o   res earch  M a r d i a s t ut i  (2 0 0 2 )   [ 1 9] ,[ 20]  obs er ved  m i cr osc opi cal l y  o n  al l oxa n-i n d u c e d l i v e r  1 2 5  m g  /   kg  sh o w ed   t h e p r ese n ce  o f  l i v er  dam a ge i n  t h e   fo rm  of dege n e rat i on t o   ne kr ose. B C S O g r ou p S G PT l e v e l s  6.8 m g  /  kg w h en c o m p ared  wi t h  t h e n e gat i v e   gr o up h a d n o   si gni fi ca nt  di ff erence , i ndi cat i ng t h at  t h e B C S O d o se o f  6. 8 m g  / kg h a ve n o t  been  abl e  t o   pre v e n t  t h e i n crease i n  S G P T  l e vel s  al l oxa n-i n d u ce d m i ce (p> 0 . 0 5 ) . B C SO eq ui val e nt  d o se o f  6 8   m g  / kg  t hym oqui no ne  SGPT l e v e l s  l o wer t h a n  ne gat i ve gr o up ( p  < 0 . 0 5 ) , i n di cat i n g t h at  B C S O equi val e nt  d o se  of 6 8   m g  / kg t h y m oqui no ne ca n p r event  a nd  red u ce l e vel s  of S G PT S D  rat s  i n d u ce d by  al l o xan .  The s e res u l t s  are  su ppo r t ed  b y   r e sear ch  condu cted   b y  Ju w i ta [ 1 1 ] ,[ 21 ] that th e p r ov isi o n   o f   b l ack  cu m i n  o il  may  lo w e r   el evat ed l e vel s  o f  S G PT  an SG OT  on  et ha nol -i n duce d   rat s   3. 3.   p53 Expressi on  Th e r e su lt o f   p 5 3  expr ession s ar e pr esen ted  in  Tab l e 3. A llo x a n  admin i str a tio n  decr eased   p53  exp r essi on  (p> 0 . 0 5 ) . T h res u l t s  sh owe d  t h at  adm i ni st rat i on at  e q ui val e nt  d o ses B C S O 6 . 8 a n 68  m g  /  kg  t hym oqui no ne fo r 7 day s   i n c r eased of   p 5 3   e x p r essi on   ( p <0 .0 5) .       Tabel  3.  Perce n tage  of m ean p53 e x pres sion each  group  in  rats induce d   by  alloxa n treate d   by BCSO or  v ita m i n  C  Gr oups  %   m e an p53 expr ession   Norm al 11. 12±0. 3 7   Negative contr o l (alloxan)   19. 24±4. 4 7 *   BCSO 6. 30. 31±1. 5 9 * a   BCSO 68  40. 43±1. 7 4 * a   Vitam i n C   29. 67±0. 4 7 * a   DM SO 12. 02±1. 0 1 a   Ext :  *= p< 0. 05   com p are t o   n o r m al  gro u p ;   a =p<0.05 com p are  to  negative    (al l oxa n)  co nt r o l  g r ou p       Table  3 s h ows  that the BCSO  have  increas ed the  e xpr essi o n  of    p5 3 activ ity w h en  co mp ar ed   w ith  th e con t r o l grou p  allox a n  as sick . Expr ession  of  p5 3  in  a  do se of  68  BCSO  gr oup  is th e lar g est co m p ar ed  to  t h e ot he r gr o u p s i n  t h e am ount  o f  4 0 . 43  ± 1. 7 4 . I n  t h e  heal t h y  cont r o l  gr o up c ont ai ned p 5 3  ex p r essi o n   because apopt o sis is  one  wa y to kee p  a  bal a nce (hom eost asis) in t h e body. Norm al cells have  low levels of  p5 pr ot ei n be cause t h ey  ha v e  a sho r t  l i f e,  and  ha ve a l a t e nt  fo rm . Level  and  p5 3 act i v i t y  i n creases cel l u l a r   dam a ge suc h  a s  res p o n d i n g t o   DN dam a ge by  e x p o s u re   allo x a n.  Gen e rally, th e activ ity o f   p5 3 h a s a  p i vo tal   rol e  i n  t h e cel l  cy cl e or  pr o g r am m e d deat (ap o p t o si s)  [ 2 2 ] . P5 pr ot ei was  use d  t o   d e t ect  DN A da m a ge,   DN A re pai r   h e l p  t h r o ug h t h e t e rm i n at i on  of t h e G 1  p h a s e of t h e cel l  cy cl e and D N A  re pai r   gene s  t r i gge r.   Dam a ged cel l s  an DN A ca not   be  re pai r ed , t h e n   di rec t ed by   p 5 3  t o   un de rg o a p opt osi s I n   no rm al  cel l   gr owt h , s u r v i v al  t i m e  i s  very  sho r t  p 53 i n  m i nut es , w h er eas  if there is damage to DNA ca n live a longer  tim e ,   wh ich  in  a  m a t t er o f  ho urs.  W i t h  th e incre a sed expres sion of  p53 m eans it  wi ll  di rect ly  dri v e the process of  ap op tosis.  When  th e inj u red   cells, p5 in  t h e nu cleu s of cells trig g e red a  te m p o r ary  h a lt  to  th e bord e G1 / S  by  i n duci ng C DK i nhi bi t o r s   (cy c l i n  D  ki na se) a nd  D NA  repai r  sy st em   i n  ad va nce t o   el im i n at e t h e i n j u ry   b e fo re th e cell en ters t h e S phase in   t h e a b se nce  of inju red  DN A [2 2] ,[ 2 3 ] .   Tim oqui no ne  i s  bl ac cum i n seed  bi oact i v com pou nd s t h at  ha ve  an t i oxi da nt  a n d   im m unom odul at ory  effect s t h at  can o p t i m i ze t h e im m u n e  resp onse a g a i nst  forei gn s u bst a nces  or an t i g ens   [7] , [8] , [2 4] Wirries et al. (20 1 0 )  [ 25] stated that Thym oquinone, the m a in com pound of black see d  oi l can  i n d u ce p r o - a p o p t o t i c  si gnal i n g  pat h way s . T r eatm e nt  wi t h  cy t o st at i c  effect  t hym oqui no ne  caused ,  m e di at ed by   up -re g u l a t i on  of p 2 1  an d d o w n -re g u l a t i on  of cy cl i n  E, w h i c is associated with the arre st of S / G2 of the cell  cy cl e. These  f i ndi n g s i ndi cat e t h at  Ti m oqu i n o n e ca n i n hi bi t  cel l  pr ol i f e r at i on  de pen d e n t  o n   p5 3 st at us  by  activating the  cell cycle inhibitor  p2 1. T h y m oquinone als o  can ca use no n-s p ecific cytotoxic reactions, for  exam ple, due t o  the  form a tio n  o f   ox id ativ e stress.      4.   CO NCL USI O N   a)   B C S O at  equi val e nt  d o se o f   68 m g / kg t h y m oqui no ne h a ve he pat o pr ot e c t o r ef fect  by  l o we ri n g  S G PT  and  SGOT lev e ls in   rats ind u c ed   b y  allo x a n .   b)   BCSO  m a y in cr ease th e expr essio n  of   p5 3 in  t h l i v e r  of rat s   i n duce d  by   al l oxa n.   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I J PH S I S SN 225 2-8 8 0 6       Black Cumin Seed  Oilas  He patopr otector in Decre a sing SGPT and SG O T   Activity  and  ....   ( A krom)   16 3 c)   B C S O at  equi val e nt  d o se o f   6. 8 m g / k g W B   t hym oqui no ne  can i n crea se p 53 e x p r essi on  equi val e nt  t o  t h e   adm i ni st rat i on  of  vi t a m i n C  i n  t h e l i v e r  i n  rat s  i n duce d   by  al l oxa n.       ACKNOWLE DGE M ENTS   Di rect o r at e Ge neral   of  Hi g h e r  Ed ucat i o n ( D IKT I ) ,  R e p u b l i c  of  I n d o n esi a   wh hel p e d  fi nance s  t h i s   st udy .       REFERE NC ES    [1]  Price, S. A., Wilson, L. M., “Dis ease Procest clinical Concept Pathoph y s io log y  Disease  Proce sst”, d iterjemahkan   oleh Br ahm, U.,  Huriawati, H., Pi ta, W., Dewi, A.M.,  EGC, Jak a rta,  vo l/issue: 6(6) , pp . 475-479 , 2 005.  [2]  Crowin, E. J . , “Handbook of Pathoph y s iolog y ”,  2 nd  ed, Lippinco t t, New  York, pp . 573, 2000.  [3]  Sizer, F. S. E.,  Whitney , “Nutrition Concept  and  Cont roversies”, Belmont, USA, T hompson Wadsworth, pp. 118-9 :   121:157, 2007 [4]     Armstrong, D.,  Gadoth, N., Go bel, H .  H., “Oxidativ Stress in  Applied B a sic  Resear ch  and C linical Practice:  Oxidativ e Stress  and Free R a dical Damage in N e u r olog y ,  HUMANA Pres, Spring er, N e w York, 2 011.  [5]  Nickavar  B. , M o jab,  F . ,  J a vidn ia,  K. , Amoli, M.  A., “Chemical  composition of  th e fix e and volatile  oils of  Nigella  sativa L. from Ir an”,  J.  Naturforsc h , vo l/issue: 58 (9-10), pp . 629- 31, 2003 [6]  El Say e d  I., Fukushima S ., “Chemopreventive p o tential of  volatile oil  from black cumin (Nigella sativ a L)  seed agains t  rat  co lon  car cinog enes is ,   J .  o f  Nu trit and  Cancer,   vol/issue: 45(2) , pp . 195 -202, 2003 [7]  Farrah, K. M.,  “Mechanisms of th e h y pogly c aemic and  immunopotentiatin g e f f ects of  Nigella  sativa L. oil  in  streptozo t ocin- i n duced d i ab etic h a msters”, 2001 [8]  Salem, M. L.,  “Immuno modulator y   and ther apeutic properties of the  Nigell a sativa  L. S e e d ”,  Internationa l   Imunopharmaco l,  vo l. 5, pp. 174 9-1770, 2005 [9]  Mursito, “Trad i tional herb  for m a la r i a”, Pen e bar   Swaday a, Jakarta, 2002 [10]  Purnama, A., “The effect of Ec hinacea purpurea  on the productio n of IFN ga mma and tumor cell apoptosis index of  m i ce with  bre a s t  can cer  who ar experi encing  s t r e s s Disse rtation,   UniversitasDiponegoro, S e marang, 2008 [11]  Giknis, M.L.A. ,  Clifford, C.B. C linic al laborator y  par a meters for Crl:WI (Han)  Sprague Dawley  Rat”, Charles  River Labor ato, 2008.  [12]  Himawan, R., “Effect of  Gre e Tea  Le af Ex tra c t  ( Camellia  sinen s is ) against SGPT lev e ls Ra ts ( R a ttus  nover gi cus Induced b y   Isoniazid Skripsi , U n iversitas Sebelas Ma ret, Surakar t a, 2008.  [13]  Walter H .  Hsu, “ H andbook of Veterin a r y  Pharmacolog y ”, 5 th  ed ition, lowa State University , Low a 2008.  [14]  Juwita, R., “Eff ect of B l ack C u min Oil ( Nigella sativa ) for  ALT and AST leve ls in the W h ite Ra t ( Ra ttus   nover gicus ) Mo del Hep a totox i c i t y  (E thanol) ,   Skripsi , Universitas Jendral So edir man, Purwokerto, 2011 [15]  El aziz, M .  A.,  Hassan, H. A.,  Mohammad, M. H., Mek i , A. R ., “Th e  bi o c hemical and  morphological  alteratio n following adm i n i stration  of m e latonin,  retinoic acid and   Nige lla sativa  in  m a m m ar y c a rcinom a :  a n  anim al m ode l” ,   int.   J. ExpPa t hol , vol/issue: 86(6) , pp . 383-96 , 20 05.  [16]  Randhawa, M .   A., Al-Ghamdi,  M.  S., “A Review of the pharmacother a peutic  ef fects of Nigella  sativa”,  Pa kista n   J.Med .  Res ., vo l/issue: 41(2), pp.  21 – 31 , 2002 [17]  Salem, M. L.,  “Immuno modulator y  and  ther apeu tic properties of the Ni gella sativ a L. seed”,  Internationa Immunopharma cology , vo l. 5, p p . 1749  – 1770 2005.  [18]  Sha h z a d , M. , Yang,  X. , Asi m ,  M.  B.  R. , Sun,  Q., Ha n,  Y.,  Z h a n g,  F. , Ca o, Y. , L u ,  S. , “Bl a c k  see d  oi l   a m e l i o rat e a l le rgi c  a i rway   infl a mma tion b y   inhibiting T-cell proliferation in  rats”,  Pulmonary Pharmacology  &   therapeutics vol. 22 , pp . 37  –  43, 2009 [19]  Mardiastuti ,  E. G am baran Hist opa tologi Organ  Hati dan Ginjal  Tikus Diab et es Mellitus  yang Di beri Infus Batan g   Brotowali ( Tinosporatuberculata ) sebaga i B a han   Antidiab e tik S k ripsi , Institut Per t anian Bogor , B ogor, 2002 [20]  Lenzen, S., “The Mechan isms of  allox a n and strept ozoto c in-indu ced diabetes”,  Diabetologia , vol. 51, pp. 216-226 2007.  [21]  Szkudelski,  T., “The Mech anism  OfAlloxanAndStrepto zotocin Action In  β  Ce lls  o f  The R a t P a n c r eas ”,   Physio logy  Research , vol. 5 0 , pp . 536-54 , 2 001.  [22]  S y aifud i n, M., “Gen Penekan  Tu mor p53, Kank er dan  Rad i asi  Pengion”,  B u le tin A l ara,  vol/issue: 8(3) , pp . 11 9- 128, 2007 [23]  Siu, W. Y., Yam, C. H., Poon,  R. Y. C., “G1 versus G2 Cell Cy cle Af ter Adriamy c in-indu ced  Damage in Mouse  Swiss3T3 Cells” ,   Le ft,  vol. 461 pp. 299-305 , 19 99.  [24]  Akrom, Khoiri N., Suhana, Y.,  Must ofa, “ T he e ffect of th e eth a nol extra c t of bl ack cum i n s eeds  agains t phago c y tic  activity   and ROI secretion  of  macrophages of male mice str a in  B a lb C in vi tro ”, Seminar  Nasiona l Tanaman Obat  Dan Obat Tr ad isional Balai  besar penelitian  dan  pengemb angan tanaman  obat ba d a n litbang keseh a tan,  Departemen  kes e hatan RI , Solo 10-11 July  2007 [25]  Wirries, A., Br ey er , S., Quin t, K., Schob ert, R . , “Th y moquinoneh y drazone der i vatives cause  cell cy cle arr e st in  p5 3   com p etent  co lor ect al  can cer  c e ll s experimen t al and  therapeu tic medicin e , vol. 1, pp. 369-375, 20 10.        Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.