I n t e r n at ion al   Jou r n a l   of   P u b l ic  Hea l t h   S c ience   ( I JP HS )   Vo l .   8 ,   N o .   2 J un e   2019 ,   pp.   23 8 ~ 24 5   I S S N:  2252 - 8806,   DO I 10 . 11591/i j p h s . v 8 i 2 . 17930       238   J our nal  home page :   htt ps : // w w w . iaes c or e . c om/jour nals /i nde x . php/I J P HS   B la c k   c u m i n  se e d  oi i n c r e ase   le u c oc y t e  an d  C D 4T h e lp e r   n u m b e r  i n  sp r agu e - d aw le y   r a t s i n d u c e d  w ith   d i m e t h y lb e n z a n t h r ac e n e       T it iek   Hi d ayat i 1 ,   Ak r om   A k r o m 2 ,   I n d r ayan t i 3 ,   S agir an 4   1 D e p art men t   o Fa mi l y   a n d   C o mm u n i t y   M e d i c i n e ,   M ed i c i n e   a n d   H e al t h   F a c u l t y ,   U n i v e rs i t as   Mu h a mm a d i y ah   Y o g y ak art a ,   I n d o n e s i a   2 D e p art men t   o P h ar m a c o l o g y   an d   Cl i n i c al   Ph ar m a cy ,   P h arm a cy   Fa cu l t y ,   U n i v e rs i t as   A h m ad   D a h l a n ,   In d o n e s i a   3 D e p art men t   o Pat h o l o g y ,   M ed i ci n an d   H e a l t h   F a c u l t y ,   U n i v e rs i t as   Mu h a mm ad i y a h   Y o g y ak art a ,   In d o n e s i a   4 D e p art men t   o S u rg e r y ,   M ed i ci n an d   H e a l t h   F a c u l t y ,   U n i v e rs i t as   Mu h a mm a d i y ah   Y o g y a k art a ,   I n d o n e s i a       Ar t ic l e   I n f o     AB S T RA CT     A r ti c le  h is tor y :   R e c e i ve d   J a n   25 ,   201 9   R e vi s e A pr   2 0 201 9   A c c e pt e M a y   27 ,   201 9       Ci g ar e t t e   s mo k e   c o n t ai n s   7 ,   1 2   d i me t h y l b en zan t h ra cen (D MBA ).   M e t ab o l i o D MBA   i s   i mm u n o s u p p re s s i v e.   Bl a c k   c u mi n   s ee d   o i l   (BCSO i s   i mm u n o mo d u l at i o n .   T h i s   s t u d y   ai med   t o   d e t e r mi n e   t h e   e ff ec t   o f   BCSO   o n   l eu k o cy t e ,   C D 4 T h   an d   CD 4 CD 2 5 T re g   i n   Sp rag u e - D a w l ey   (S D mi ce  i n d u ce d   w i t h   D MBA .   T h e   9 6   SD   rat s   w e r e   d i v i d e d   i n t o   ei g h t   g ro u p s   o 1 2 .   G ro u p   I   r ecei v ed   aq u ab i d e s t   an d   r eg u l ar  f ee d i n g .   G r o u p s   II ,   III  an d   I V   rece i v e d   BCSO   (an   e q u i v a l e n t   o 6 . 8 ,   6 8   an d   1 3 6   m g / k g   BW / d a y   t h y m o q u i n o n e ,   r e s p ec t i v el y ) .   G ro u p   V   r ece i v e d   t h y mo q u i n o n   (5 0   m g / k g   BW / d a y an d   g ro u p   V I   r ecei v ed   t amo x i f e n   (6 0   mg / k g   B W ).   G ro u p   V II   (D MB A )   w as   i n d u ced   w i t h   D MB A   (1 0 x 2 0 m g / k g   BW   f o fi v w eek s ).   G ro u p   V III   r ecei v ed   reg u l ar  f ee d i n g   an d   c o r n   o i l   t re at men t .   I n   t h t h i rd   w eek ,   al l   g ro u p s   b e g an   t o   b e   i n d u ce d   w i t h   D MB A   (2 0   m g / k g   BW   t w i ce  p e w eek   fo f i v w eek s ).   D at c o l l ec t i o n   o l eu k o cy t e s ,   C D 4 T h   an d   CD 4 CD 2 5 T re g ,   w e r e   p e rfo r med   at   w e ek   2 7 t h .   T h e   m e a n   d i ff e r en ce   o f   CD 4 T h   an d   CD 4 CD 2 5 T re g   co u n t s   b e t w een   g ro u p s   w a s   c al c u l a t ed   w i t h   o n w a y   A N O V A .   T h e   ad m i n i s t rat i o n   o BCSO ,   t h y mo q u i n o n e,   an d   t amo x i fen   h ad   i n c r e as ed   l e u k o cy t e s   an d   C D 4   T h   c el l   c o u n t .   T h e   CD 4 T h   ce l l   co u n t   o t h e   t r e at men t   g ro u p s   w as   h i g h e r   t h an   t h at   o t h e   D M BA   g r o u p   (p < 0 . 0 5 ).   BCSO   e q u i v a l e n t   d o s e s   o 6 . 8   an d   6 8   m g / k g   BW / d a y   t h y mo q u i n o n e   s h o w ed   i mm u n o p ro t ec t i v e   e ff ec t s .   I t   c an   b e   co n cl u d e d   t h at   t h e   BCSO   ad mi n i s t rat i o n   at   d o s e s   o 6 . 8   an d   6 8   m g / k g   B / d a y   s h o w s   i mmu n o p ro t e c t i v e   e ff ec t s   d u e   t o   D MBA   i n d u c t i o n .   K e y w o r d s :   B l a c c u m i s e e o i l   C D4C D 25T r e g   C D4T h   DM B A   L e uko c y t e s   Co p yr i g h t   ©   2 0 1 9   In s t i t u t o f   A d va n ced   E n g i n ee r i n g   a n d   S ci e n ce   A l l   r i g h t s   r e s er ved .   C or r e s pon din A u th or :   A kr o m   A kr o m   De pa r t m e n t   o f   P h a r m a c o l o g y   a n C li n i c a l   P h a r m a c y ,   P h a r m a c y   F a c u l t y ,   U ni ve r s i t y   o f   Ahm a Da hl a n ,     J l .   P r o f . Dr . H.   S o e p o m o ,   S . H . ,   J a n t ur a n ,   UH ,   Y o gy a ka r t a ,   DI Y .   E m a i l a kr o m @ p h a r m . ua d. a c . i d       1.   I NT RODU C T I ON   A   c i g a r e tt e   i s   o n e   o f   t h e   c a us e s   o f   c o m m u ni t y   he a l t h   pr o bl e m s   i t h e   wo r l d.   C i ga r e t t e   s m o ke ,   a l o n g   w i t h   k i t c h e a n d   m o to r   v e hi c l e   s m o ke s ,   c o n t a i ns   po l y c y c l i c   a r o m a t i c   hy dr o c a r b o ( P A H)   c o m po un ds   t h a t   a r e   h a r mf u l   t o   h e a l t h   [ 1] .   One   o f   t h e   P A H   c o m po un d s ,   7,   12  d i m e t hyl be nz a n t h r a c e n e   ( DM B A ) ,     i s   a   c a r c i n o ge ni c   i mm u n o s uppr e s s i ve   a ge n t   [ 2] .   I n   t h e   b o d y ,   DM B A   i s   m e t a b o l i z e by   c y t o c h r o m e   e n z ym e s   a n mi c r o s o m a l   e po xi d e   hy dr ol a s e   i n t o   t h e   u l t i m a t e   c a r c i n o ge n ,     i . e .   7,   12 - di m e t hyl be nz a n t h r a c e n e - 3, 4 - d i o l - 1, 2,   e po xi de   (D M B A - DE ) ,   t h a t   i s   im m u n o to xi c   [ 3 - 4] .     DM B A   m e t a b o l i t e s   t h r o ugh   DN A   m e t hy l a t i o n   c a n   t r i gge r   t h e   f o r m a t i o n   o f   v a r i o us   c a nc e r s   s uc h   a s   b r e a s t ,   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t .   J .   P ubl i c   He a l t h   S c i .   I S S N:  2252 - 8806       B lack   c umin  s e e oil   incr e as e   leuc oc y te  and  C D4Thelpe r   numbe r   in  s pr ague - da w ley   r at s …  ( T it iek   Hi day ati )   239   s k i n ,   bl o o d,   m o u t h ,   a n l u n [ 5] .   A s   a n   im m u n oto xi c   c a r c i n o ge n ,   DM B A   h a s   be e n   s h o wn   t s uppr e s s   b o n e   m a r r o a c t i vi t y   a n t h us   i nhi b i t   e r y t h r o p o i e s i s   a n d   l ym p h o c y t e   de v e l o p m e n t   [ 1,   6] .   C D4  T   h e l pe r   l ym p h o c y t e s   a r e   a   s i g ni f i c a n t   c o m po n e n t   i n   t h e   a d m i n i s t r a t i o n   o f   a da pt i v e   i mm u ne   r e s po n s e s .   I m m u n e   s y s t e m 's   i na bi li t y   t r e c o gni s e   n o n - s e lf - pa t h o ge n s   ( n e o p l a s m s ,   c a n c e r   c e ll s ,   pa t h o ge n s ,   x e n o bi o t i c s )   i s   t h e   b e g i nn i ng  o f   t h e   da m a ge   t o   t h e   b o d y ' s   de f e n c e   s y s t e m   a ga i ns t   pa t h o ge ns   [ 7 - 8] .     On e   c o m po n e n t   o f   t h e   c e ll u l a r   im m u n e   s y s t e m   t h a t   pl a y s   a   vi t a l   r o l e   t o   r e gul a t e   t h e   im m u n e   r e s po ns e   due   t e x po s ur e   to   i m m u n o s uppr e s s o r   c a r c i n o ge ns   i s   C D4  T   h e l p e r   ( T h )   a n T   r e gul a t or y   c e ll s   ( T r e g)   [ 8 ] .     As   a   r e gu l a to r   o f   t h e   a d a pt i v e   im m u n e   r e s po n s e ,   T   h e l pe r   lym p h o c y t e s   p l a y   a n   e s s e n t i a l   r o l e   i i d e n t i f yi ng   a n r e s i s t i n t h e   de v e l o p m e n t   o f   pa t h o ge ns   o r   n e o pl a s m s   i t h e   b o d y .   W e a po s i t i ve   im m u ne   r e a c t i o ns ,   pa r t i c u l a r l y   c e ll u l a r   im m u n e   r e s po n s e s ,   t o   pa t h oge ns   i nc r e a s e   t h e   o r ga ni s m   m o r bi d i t y   a n d   m o r ta l i t y   [ 9] .     T   h e l pe r   c e ll s   p l a y   a   r o l e   i de s i g ni n g   c e ll - s pe c i f i c   i mm u n e   r e s po ns e s ,   w h e r e a s   T   r e gu l a t o r   pl a y s   a   r o l e   in  r e gu l a t i n t o l e r a n c e   r e s p o n s e   t o   p r e v e n t   e x c e s s i ve   im m u ne   r e a c t i o n s   [ 10] .   B e c a us e   e f f e c t i v e   c a n c e r   t h e r a pe ut i c   m e t h o ds   h a v e   n o b e e n   f o un d,   t h e   s e a r c h   c o n t i n ue s   t o   f i n c h e m o pr e v e n t i v e   c o m po un ds   t h a t   c a n   b e   u s e t o   i nhi b i t   o r   de l a y   c a r c i n o ge n e s i s   due   t o   DM B A   e x po s ur e .   An t i o xi da n t s ,   pr o a p o p to s i s   a ge n t s   o r     a n t i - pr o l if e r a t i v e   a ge n t s ,   a n i mm u n o m o du l a t i o n   a r e   t h o ugh to   i m pe de   c a r c i n o ge ne s i s   o r   pr e v e n t   ne o pl a s m   f o r m a t i o n   [ 11 - 12] .   A n t i o xi da n t s   p l a y   a   r o l e   i i nhi b i t i n t h e   f o r m a t i o n   o f   DM B A - DE   [ 13 - 14] A n t i o xi da n t s   p l a y   a   r o l e   i i nh i b i t i n t h e   f o r m a t i o n   o f   r e a c t i v e   m e t a b o l i t e s   DM B A - DE   s o   a s   n o t   to   b e   c a r c i n o ge ni c ,   h e pa t oto xi c   o r   i mm u n o s uppr e s s i ve .   On e   o f   th e   p l a n t s   e m p i r i c a l ly   a l r e a d y   us e a s   a n   o xi da t i v e   c h e m o pr e v e n t i v e   a n im m u n o m o du l a t i o n   i s   bl a c c u m i s e e o r   Ni ge ll a   s a t i va   ( S a t i v a ) .   T h e   c o n t e n t   o f   bl a c c u m i s e e ds ,   t hym o qu i n o n e ,   i s   pr o v e n   l a b o r a tor i c a l ly   a s   im m u n o m o du l a t i o n   b e c a us e   i t   c a n   i nc r e a s e   c e l l u l a r   a n h u m o r a l   i mm u n e   r e s po n s e .   E t h a n o l   e x t r a c t   o f   bl a c c u mi n   s e e d s   c a n   i nc r e a s e   t h e   a c t i vi t y   o f   ph a go c y t o s i s   a n m i c r o bi c i da l   m a c r o ph a ge s   [ 15 17] .   B l a c c u mi n   s e e o i l   ( B C S O)   i s   t h o ugh to   i nc r e a s e   h e l pe r   T   c e l l   f u n c t i o n   a n a f f e c t   T   r e gul a t or ,   b u t   u n t i l   n o t h e r e   h a s   b e e n   n o   r e s e a r c h   o n   t h e   e f f e c t   of   B C S O   o n   t h e   n u m be r   a n a c t i vi t y   o f   T h   a n T r e l ym p h o c y t e s   i n   DM B A - i n duc e S pr a gue - Da w l e y   ( S D)   r a ts .       2.   RE S E AR CH  M E T HO D   2. 1 .   De s ign   T h e   s t ud y   us e a   r a n do m i z e d,   e x pe r im e n t a l   de s ign   w i t h   t h e   c o n t r o l   gr o up  i n   96  f e m a l e   S r a t s .   B a s e o n   t he   r e s u l t s   o f   pr e vi o us   s t ud i e s   i t   i s   k no wn   t h a t   t h e   i m p a c t   o f   DM B A   e x po s ur e   i s   i nf l u e n c e b y   ge n de r   [ 18]   h e n c e   t e s t   a ni m a l s   a r e   u ni nf o r m e by   f e m a l e s   f o r   r e a s o n s   to   r e duc e   ge n de r   bi a s   due   to   e n do c r i n e   f a c t o r s .   T hi s   r e s e a r c h   pr oto c o l   h a s   o b t a i ne e t hi c a l   c l e a r a n c e   ( No   043/K E C - L P P T /I I /2012)   f r o m   a   r e s e a r c h   e t hi c s   c o m mi t t e e   f r o m   Ga d j a h   M a da   U ni ve r s i t y   ( U GM ) ,   Y o gy a ka r t a ,   I n do n e s i a .     2. 2.     M at e r ial s   an d   r e ag e n t s   T h e   m a t e r i a l   us e i t hi s   r e s e a r c h   i s   bl a c c u m i s e e o i l   pr o duc e i n   t h e   l a b o r a to r y   o f   P h a r m a c e ut i c a l   B i o l o g y ,   F a c u l t y   o f   P h a r m a c y ,   Ahm a Da hl a U ni ve r s i t y ,   Yo g y a ka r t a ,   I n do n e s i a .     T e s t   r e s u l t s   o f   bi o a c t i ve   c o n t e n t   f r o m   B C S s h o we f a t t y   a c i ds   ( 78% )   a n d   s m a ll   a m o u n t s   o f   t hym o qu i n o n e .   As   a i mm u n o s uppr e s s i ve   i nduc i ng   a ge n t   us e 7,   12 - d i m e t hy l be nz   [ a ]   a n t h r a c e n e   ( DM B A )   ( > 9 5% )   w i t s y n o nym   1, 4 - D i m e t hyl - 2, 3 - b e n z o phe n a n t h r i d i ne ,   9, 10 - Di m e t hyl - 1, 2 - b e n z a n t h r a c e ne   ( C 20H16)   o b t a i n e d   f r o m   S i g m a - Al dr i c h   ( c a t .   D3254) .   A s   a   po s i t i v e   c o n t r o l ,   t w o   i n gr e d i e n t s   we r e   us e d,   n a m e ly ,   t hym o qu i n o n e   a n d   t a m o xi f e n .   T hym o qu i n o ne   us e a s   a   po s i t i ve   c o n t r o l   wa s   2 - I s o pr o py l - 5 - m e t hyl - 1, 4 - b e n z o qu i n o n e     ( > 98% )   O b t a i n e f r o m   S i g m a - A l dr i c h   ( c a t .   27466 6)   a ge n t ,   whi l e   t a m o xif e n   ( T a m o xif e n ,   K a l be   F a r m a )   wa s   pur c h a s e f r o m   a   p h a r m a c y .   S a r d ji t o ' s   Ho s p i t a w i t h   pr e s c r i bi ng  f r o m   t h e   do c to r .   C or n   o i l   a s   DM B ( l i po phil i c )   s o l v e n t   wa s   o b t a i n e f r o m   S i g m a - Al dr i c h   ( c a t .   C 8267) .   Al l   m a t e r i a l s   o r i g i na t i n f r o m     S i g m a - Al dr i c h   we r e   o b t a i n e t h r o ugh   o f f i c i a l   a ge nt s   i n   Yo gy a ka r t a .   M a t e r i a l s   f o r   t h e   t e s t   o f   C D4T   h e l p e r   a n C D4 C D25T r e c e l l   c o un t   we r e   F I T C   C D4,   a n d   R P E   C D25  m o n o c l o n a l   a n t i b o d y   e B i o s c i e n c e   ®  F l o C y t o m e t r y   S t a i ni ng  ( e B i o s c i e n c e   c a t .   N o .   0 0 - 4222) .   S a m p l e s   we r e   a n a ly z e d   i n   a   B e c t o n   D i c k i ns o n   F AC S - C a l i bur   f l o c y t o m e t e r ,   wi t h   m a c hi ne   f l o c yto m e t r y   B e c k m a n   C o ul t e r   F C 500.   C O2   i nc u b a t or   ( i nc ub a t o r   c o m bi ne   E S C O,   C a t a l o g - 051817 - L R ) ,   c e n t r i f uge   ( T h e r m o   S c i e n t i f i c ™  c e n t r i f uge s )   m i c r o pl a t e   r e a de r   ( S y n e r g y &#8482 ;   HT M u l t i - M o de   M i c r o pl a t e   R e a de r ) ,   a n   i nve r t e m i c r o s c o pe   ( Ol ym pu s ,   B X5 m i c r o s c o pe )   a r e   us e f o r   t h e   pr e pa r a t i o a n c u l t ur e   o f   lym p h o c y t e   c e l l s .   G l a s s wa r e ,   h e m o c y t o m e t e r s ,   gl a s s   o bj e c t s ,   bl e n de r s ,   s t r a i n e r s ,   s ur g i c a l   i ns t r u m e n t s ,   a n d   s ur g i c a l   t a bl e s   a r e   us e f o r   m a t e r i a l   we i g hi ng,   tr e a t m e n t   pr e pa r a t i o n ,   a n a nim a l   c a ge .     T hi s   s t ud y   us e f e m a l e   S pr a gue   Da w l e y   r a t s   a ge 3 - we e ks ,   we i g hi ng  100 - 140  gr a m s   o b t a i n e d   f r o m   t h e   e x pe r i m e n t a l   a nim a l   b r e e d i ng  u ni t ,   UG M .   B a s e d   o n   pr e vi o us   r e vi e w s ,   i t   wa s   f o u n t h a t   DM B i nduc t i o n   i n   r a t s   a ge l e s s   t h a n   16  we e ks   h a a   b e t t e r   s uc c e s s   r a t e   [ 19]   s o   t h a t   i n   t hi s   s t ud y ,   S r a t s   a ge 3 - we e ks   we r e   us e d.   T he   t e s t   a ni m a l s   we r e   ke pt   i n   a   50x 30 x 20  c m   i nd i vi du a l   i r o n   c a ge ,   f e 528  pe l l e t s ,   a n d   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
             I S S N:  2252 - 8806   I n t .   J .   P ubl i c   He a l t h   S c i .   Vo l .   8,   N o .   2 J un e   2019 :   23 8     24 5   240   s upp l i e m o de r a t e l y - h a n d li ng  o f   r e s e a r c h   t e s t   a n im a l s   by   i n t e r n a t i o n a l   e t hi c a l   s t a n da r d s   f o r   h a n d li ng  t e s a nim a l s   a s   a pp l i e i n   UPHP   UG M .       2. 3.     T r e at m e n t   an d   DM B in d u c t io n   All   r a t s   we r e   ke p t   wi t h   t h e   s a m e   c o n d i t i o n   a n f e e d.   T h e   t e s t   a ni m a l s   we r e   r a n do m ly   d i v i de i n t e i g h t   gr o ups   o f   12.   Gr o up  I   ( n or m a l )   r e c e i ve d   r e gu l a r   f e e d i ng  dur i ng  t h e   t e s t.   Gr o up  I I   ( B C S O6. 8) ,     I I I   ( B C S O68) ,   a n I ( B C S O136)   we r e   t h e   t r e a t m e n t   gr o ups ,   e a c h   o f   w hi c h   r e c e i ve B C S do s e s   o f   6. 8,   68,   a n 136  m g/kgB W /d a y   r e s pe c t i v e ly   f o r   14  da y s   b e f o r e   a n dur i n D M B A   i nduc t i o n .   Gr o up  V     ( po s i t i v e   c o n t r o l   I )   r e c e i v e t hym o qu i n o n e   a t   a   do s e   o f   50  m /kg  B W /da y   f o r   14  da y s   b e f o r e   a nd  dur i n g   DM B A   i nduc t i o n .   Gr o u VI   ( po s i t i v e   c o n t r o l   I I )   r e c e i ve t a m o xif e n   a t   a   do s e   o f   60   m g/kg   B W   f o r   14  da y s   b e f o r e   a n d   dur i n g   DM B A   i nduc t i o n .   Gr o up  VI I   ( n e ga t i v e   c o n t r o l )   r e c e i ve c o r o i l   f o r   14   da y s   b e f o r e   a n d   dur i n DM B A   i nduc t i o n .   Gr o up  VI I I   ( s o l ve n t   c o n tr o l )   r e c e i v e s t a n da r d   f e e d i ng  a n c o r n   o i l   a t   a   do s e   o f   100  m g/kg  B W /da y   f o r   14  da y s   b e f o r e   a n dur i n DM B A   i nduc t i o n .   T h e   DM B A   c o m po un i s   d i s s o l v e d   i c o r o i l   a t   a   do s e   o f   20  m g/kg  B W   a n a d mi n i s t e r e pe r s o n a l ly   b y   t r a i ne pe r s o nn e l .   T he   DM B A   i nd uc t i o n   is   r e pe a t e t e n   t i m e s   w i t h   t h e   f r e qu e n c y   o f   a d mi ni s t r a t i o n   o f   t w i c e   a   we e [ 18 ] .   DM B A   i nduc t i o n   wa s   pe r f o r m e i a ll   gr o ups   e x c e pt   t h e   h e a l t hy   gr o u ( gr o up  1)   a n t h e   s o l v e n t   c o n tr o l   gr o up  ( gr o u VI I I ) .     A t   we e 27,   pe r i p h e r a l   bl o o wa s   t a ke n   t h r o ugh   a n   or bi t a l   v e i n   t c o l l e c t   da t a .   W e   m e a s ur e t h e   n u m be r   a n t y pe   o f   l e uko c y t e ,   th e   n u m be r   o f   C D4  T   h e l pe r   a n C D4 C D25  T r e lym p h o c y t e s .   B l o o wa s   t a ke n   f r o m   a n   o r bi t a l   v e in   by   a   t r a i n e l a b o r a to r y   s t a f f   a t   t h e   27t h   we e o f   t h e   t r i a l .   B l o o wa s   t h e n   f e i n t o   a   va c ut a i n e r   t ub e   c o n t a i nin a n t i c o a gu l a n t s   r e a d y   f o r   us e   t o   m e a s ur e   t h e   n u m be r   a nd   c o un t   o f   l e uko c y t e   t y pe s   a n T   h e l pe r   a n d   T r e lym p h o c y t e   c o un t s   w i t a   f l o w   c y t o m e t e r .   T h e   n u m be r   o f   C D4T h   a n C D4 C D25  T   c e l l s   ( T r e g)   wa s   m e a s ur e by   t h e   f o l l o w i ng  s t a n da r pr o c e dur e   a s   h a s   b e e n   do n e   b y   pr e vi o us   r e s e a r c h .   F i f t y   μ L   s pe c im e ns   we r e   p i pe d   i n t o   t h e   f a l c o n   t ub e ;   ( ii )   10  pL   o f   C D4  F I T C /C D 25  tr i t e s t   r e a ge n t s   pe r   C P   we r e   a dde d.   T h e   s a m p l e s   a n r e a ge n t s   we r e   m i xe us i ng  a   v o r t e x   m i xe r   un t i l   h o m o ge n e o us   a n t h e n   i nc u b a t e f o r   15  m i nut e s   a t   a   t e m pe r a t ur e   o f   20 - 25° C   i n   t he   da r kr oo m .   W hil e   wa i t i ng   f o r   t h e   i nc u b a t i o n   t i m e ,   50  pL   o f   F A C S   s o l ut i o n   wa s   d il ut e by   mi x i ng  w i t h   450  pL   o f   d i s t i l l e wa t e r   a n t h e n   s t i r r e u n t i l   h o m o ge n e o us .   Af t e r   t h e   i nc u b a t i o n   t i m e   w a s   c o m p l e t e ,   450  μ L   o f   t h e   F A C S   r e a ge n t   w a s   a dde d   to   t h e   t ub e   a n m i xe u n t i l   h o m o ge n e o us ;   Af t e r   h o m o ge n e o us ,   t h e   s a m p l e   w a s   i nc u ba t e f o r   15  m i a t     a   t e m p e r a t ur e   o f   20 - 25 ° C   i t h e   da r kr o o m .   Af t e r   t h e   i n c u ba t i o t i m e   wa s   c o m p l e t e ,   B B i o s c i e n c e s   F A C S   a n C e ll   Que s t   we r e   us e to   de t e r m i ne   C D4   a n C D4C D25  c o un t s .     2. 4.     Dat an al ys is   T h e   m e a d i f f e r e n c e   o f   t h e   n u m be r   o f   l e uko c y t e   c e ll s ,   t h e   n u m be r   o f   C D4,   a n d   C D4 C D25   lym p h o c y t e s   b e t we e n   t h e   gr o ups   we r e   d o n e   by   AN OV A   t e s t   a n f o l l o we by   m u l t i p l e   c o m pa r i s o n   t e s t s   w i t h   a   95%   c o nf i de n c e   l e v e l .         3.   RE S UL T S   A ND  DI S CU S S I ON   3. 1.   Num b e r   an d   t yp e   of   l e u k oc yt e s   T h e   m e a s ur e m e n t   r e s u l t s   o f   t h e   n u m be r   o f   l e uko c y t e   t y pe s   a r e   pr e s e n t e i n   T a bl e   1.   L e uko c y t e s   a r e   t h e   f i r s t   n a t ur a l   de f e n c e s   r e s po ns i bl e   f o r   e l im i n a t i n pa t h o ge ns   t h a t   e n t e r   t h e   bl o o ds t r e a m .   T h e   n o r m a l   l e uko c y t e   c o un t   i n   S pr a gue   Da w l e y   r a t s ,   a c c o r di ng  to  S c h a l m 's   ve t e r i n a r y   h a e m a t o l o g y   [ 19 ]   i s   9. 810± 1. 789  106  c e l l s / mm 3) .   T h e   n u m be r   o f   l e uko c y t e s   i n   t h e   h e a l t hy   gr o up  a t   we e 27   wa s   6. 33± 1. 37  ( 106   c e l ls / m m 3) ,   whi c h   wa s   l o we r   t h a n   t h e   n u m be r   o f   l e uko c y t e s   by  S c h a l m .   T a bl e   s h o ws   t h a t   DM B A   i nduc t i o n   de c r e a s e s   th e   n u m be r   o f   l e uko c y t e s .   T h e   l e uko c y t e s   i n   t h e   n o r m a l   gr o up  ( 6. 33± 1. 37   ( 106  c e l l s / mm 3) )   we r e   di f f e r e n t   f r o m   t h o s e   i n   t h e   DM B A   gr o up    ( 2. 80± 1. 10  ( 106  c e l l s / mm 3) )   ( p < 0. 05) .   T h e   D M B A   gr o up  ha t h e   l o w e s t   a ve r a ge   l e uko c y t e   c o un t .     T h e   B C S gr o up  h a hi g h e r   a ve r a ge   l e uko c y t e   c o un t   t h a n   t h a t   i n   t h e   D M B A   gr o up  ( p < 0. 05) .   T h e   B C S O   gr o ups   h a r e l a t i v e ly   t h e   s a m e   n u m be r   o f   l e uko c y t e s   a s   t h e   n o r m a l ,   t hym o qu i n o ne ,   a n t a m o xif e gr o ups .   T h e   B C S O6. gr o up  h a t h e   hi g h e s t   l e uko c y t e   c oun t ,   hi g h e r   t h a n   t h e   n o r m a l ,   t hy m o qu i n o n e   a n t a m o xi f e gr o ups   ( p < 0. 05) .   DM B A   i nduc t i o n   r e duc e s   t h e   n u m be r   o f   lym p h o c y t e s   a n i nc r e a s e s   t h e   n u m be r   o f   n e ut r o phi l s   a n d   m o n o c y t e s .   T h e   n u m be r   o f   l ym p h o c y t e s   a n m o no c y t e s   i t h e   D M B A   gr o u wa s   l o we r   t h a n   t h a t   o f   i t h h e a l t hy   a n s o l v e n t   gr o ups   ( p < 0. 05) .   Ho we v e r ,   th e   n u m be r   o f   n e ut r o phi l s   i t h e   DM B gr o up  wa s   hi g h e r   t h a n   t h a t   o f   t h e   h e a l t hy   gr o up  ( 50 . 80± 5. 54  c o m p a r e to  30. 67± 4. 23 )   ( p< 0 . 05) .   B C S O,   t hy m o qu i no n e ,   a n d   t a m o xif e n   pr e ve n t   a   de c r e a s e   i n   t h e   n u m be r   o f   l ym p h o c y t e s   a n m o n o c y t e s   due   t o   DM B A   i n duc t i o n .     T h e   n u m be r   o f   lym p h o c y t e s   a n m o n o c y t e s   i n   t h e   B C S O,   t hy m o qu i n o n e   a n t a m o xi f e n   gr o ups   wa s   hi g h e r   t h a n   t h a t   o f   i n   t h e   DM B A   gr o up  ( p< 0 . 05) .     Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t .   J .   P ubl i c   He a l t h   S c i .   I S S N:  2252 - 8806       B lack   c umin  s e e oil   incr e as e   leuc oc y te  and  C D4Thelpe r   numbe r   in  s pr ague - da w ley   r at s …  ( T it iek   Hi day ati )   241   T a bl e   1.   T h e   m e a s ur e m e n t   r e s u l t s   o f   t h e   n u m b e r   a n c o un t   o f   l e uko c y t e   t y pe s   i n   t h e   DM B A - i nduc e d   S r a t s   a t   a   d o s e   o f   2x 20  m g / kg  B W / we e f o r   w e e ks   a f t e r   r e c e i vi n B C S ( a d o s e s   o f   6. 8,   68   a n 136  mg / kg  B W ) ,   t hy m o qu i n o n e   ( 50  m g / kg  B W / da y )   a n t a m o xif e n   ( 60 m g / kg  B W / da y )   f o r   14  da y s   b e f o r e   a n dur i n i n duc t i o n .   B l o o c o l l e c t i o n   wa s   do n e   a t   we e 27.   T h e   s o l v e n t   gr o up   r e c e i v e c o r n   o i l   a t   a   d o s e   o f   100  mg / kg  B W / da y   w i t h o ut   DM B A   i n duc t i o n   G r o ups   n   numbe r   of   le uk oc y te s  ( x 10 6 ( me a n±S D )   pe r c e nt a ge   of   ne ut r o phi ls   ( me a n±S D )   pe r c e nt a ge   of   l y mph oc y t e s   ( me a n±S D )   pe r c e nt a ge   of   mo n oc y t e s   ( me a n±S D )   pe r c e nt a ge   of   e o s in o ph il s   ( me a n±S D )   N o r ma l   12   6.33±1.37   30.67±4.23   61.67±3.61   6.33±0.52   1.33±0.52   B C S O 6.8   12   9.86±0.90 b   33.57±0.98 b   53.71±1.80 b   10.86±1.07 b   1.86±1.07   B C S O 68   12   6.29±0.49 b   27.14±3.63 b   65.14±3.58 b   6.14±0.89 b   1.57±0.53   B C S O 136   12   7.00±0.93 b   27.75±1.67 b   65.13±0.83 b   5.75±1.04 b   1.38±0.52   T h y m oqui n o ne   12   6.86±0.90 b   28.14±1.68 b   64.71±1.11 b   5.71±0.95 b   1.43±0.53   T a m ox i f e n   12   7.00±2.68 b   35.53±8.64 b   57.50±7.12 b   5.67±1.86 b   1.33±0.52   D M B A   12   2.80±1.10 *   50.80±5.54 *   44.40±2.51 *   3.20±1.64 *   1.60±1.52   S o l ve nt   12   6.67±1.03 b   30.67±4.23 b   61.67±3.72 b   6.33±0.52 b   1.33±0.52   no t e : * = p< 0.05 to  n or ma gr o up;  b= p< 0.05 to  D M B A  g r o up       3. 2.     Num b e r   of   CD T h   an d   CD 4CD 25  T r e g   T h e   C D4  T hi s   a   l ym p h o c y t e   t h a t   pl a y s   a   r o l e   i n   r e gu l a t i n s pe c if i c   c e ll u l a r   i mm u n e   r e s po n s e s   w hi le   C D4C D25T r e a c t s   a s   a   r e gul a t o r   o f   t o l e r a n c e   r e s po n s e   a n pr e v e n t s   hy pe r s e n s i t i v i t y   r e a c t i o ns .   C D4  T h   a n d   C D4C D25  T r e t e s r e s ul t s   w i t h   f l o c y t o m e t e r   a r e   p r e s e n t e d   i n   T a bl e   2.       T a bl e   2 T h e   m e a s ur e m e n t   r e s u l t s   o f   t h e   a b s o l ut e   nu m b e r   o f   C D4  T   He l pe r   &   C D4C D5  T   r e gu l a t or   a n pe r c e n t a ge   o f   C D4C D25T r e g   i n   t h e   DM B A - i n du c e S r a t s   a a   d o s e   o f   2x 20  m g / kg  B W / we e f o r   5   we e ks   a f t e r   r e c e i vi ng  B C S ( a t   d o s e s   o f   6. 8,   68  a n 13 6   mg / kg  B W ) ,   t hy m o qu i n o n e   ( 50  m g / kg  B W / da y )   a n t a m o xif e n   ( 60 m g / kg  B W / da y )   f o r   14  da y s   be f o r e   a n dur i n i n du c t i o n .   B l o o c o l l e c t i o n   wa s   do n e   a   we e 27.   T h e   s o l v e n t   gr o up   r e c e i ve c o r n   o i l   a t   a   do s e   o f   100  mg / kg  B W / da y   w i t h o ut  DM B A   i n duc t i o n   G r o up   n   A bs o lu te  C o unt   O f   C D 4 ( x 103 /m m3 )   A bs o lu te  C o unt   O f   C D 4 C D 25   ( x 103 /m m3)   P e r c e nt a ge   of   C D 4C D 25  to   C D 4 Th   ( me a n±s d)   N o r ma l   12   1575. 67±131 . 70 b   70 . 50±11 . 76 b   4 . 41±0 . 01 b   B C S O  68   12   1619 . 57±519 . 86 b   80 . 86±17 . 78 b   4 . 19±0 . 01 b   B C S O  68   12   1868 . 57±382 . 55 b   113 . 32±20 . 58 b   6 . 14±0 . 01 b   B C S O  136   12   1668 . 75±398 . 01 b   92. 50±20 . 53 b   5 . 66±0 . 01 b   T h y m oqui n o ne   12   1799 . 83±429 . 90 b   97 . 50±21 . 69 b   5 . 62±0 . 02 b   T a m ox i f e n   12   1940 . 00±203 . 76 b   84 . 50±13 . 46 b   4 . 34±0 . 00 b   D M B A   12   484 . 17±33 . 98 *   45 . 17±9 . 07 *   11 . 50±0 . 02 *   S o l ve nt   12   1490 . 33±508 . 98 b   109 .33±64. 06 b   7 . 35±0 . 04 b   no t e : * = p< 0.05  to  n or ma gr o up b= p< 0.05  to   D M B A   g r o up       T h e   D M B A - i nduc e d   gr o up  e x pe r i e n c e d   a   de c r e a s e   i a bs o l ut e   C D4  T h   c o un t .   T h e   a b s o l ut e   n u m be r   o f   C D4  T h   i t h e   DM B A   gr o up  wa s   l o we r   t h a n   t h a t   o f   i n   t he   he a l t hy   gr o up  ( p< 0. 05) .   F l o c y t o m e t e r   a n a ly s i s   s h o we t h a t   C D4  T h   c e ll   c o un t   i n   n o r m a S r a t s   wa s   1575  c e ll s / ml ,   w hi l e   f o r   DM B A - i nd uc e r a t s   DM B A   t h e   c o un t   wa s   484. 17± 233. 98  c e ll s / ml .   D M B A   i nduc t i o n   a t   a   do s e   o f   10x 20  m g/kg  B W   i f e m a l e   S D   mi c e   s uppr e s s e C D4T h   c e l l   c o un t .     T h e   DM B A   i nduc t i o n   de c r e a s e s   a b s o l ut e   C D4C D25  T r e c o un b ut   i n c r e a s e s   t h e   pe r c e n t a ge   o f   C D4C D25T r e g.   T h e   a b s o l ut e   n u m be r   o f   C D4 C D2 i t h e   D M B gr o up  ( 45 . 17± 9 . 07)   wa s   l o we r   t h a n   t ha t   o f   i t h e   h e a l t hy   gr o up  ( 70 . 50± 11 . 76)   ( p< 0. 05) ,   i t   i s   n o t   t h e   s a m e   a s   t h e   pe r c e n t a ge   o f   C D4C D 25T r e g.     T h e   DM B A   gr o up  h a a   hi g h e r   C D4 C D25  T r e pe r c e n t a ge   t h a n   t h e   h e a l t hy   gr o up     ( 11. 50± 0. 02  v . s . 4. 41± 0. 01)   e v e t h e   hi g h e s t   a m o ng  t h e   s t ud y   gr o up  ( p< 0. 05) .   B o x   p l o t s   o f   C D4  T   he l pe r   a n d   C D4C D25  T r e e x a m i na t i o n   r e s u l t s   a r e   pr e s e n t e d   i n   F i gur e   1.     Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
             I S S N:  2252 - 8806   I n t .   J .   P ubl i c   He a l t h   S c i .   Vo l .   8,   N o .   2 J un e   2019 :   23 8     24 5   242               F i gur e   1.   B o x   p l o t s   o f   C D4   l ym p h o c y t e   m e a s ur e men t s   o n   pe r i p h e r a l   bl o o o f   S r a t s   a f t e r   r e c e i vi n B C S a t   d o s e s   o f   6. 8,   68   a n 136   mg / kg  B W ,   t a m o xif e n   a n t hy m o qu i n o ne   f o r   14   da y s   b e f o r e   a n dur i n DM B A   i nduc t i o n   ( a t   a   d o s e   o f   20  m g/kg  B W   i n   c o r n   o i l ,   t w i c e   a   we e pe r o r a l ly ) .   T h e   m e a s ur e m e n t   wa s   pe r f o r m e a t   we e 27 .       T h e   a d mi n i s t r a t i o n   o f   B C S O,   t hym o qu i n o n e ,   a n d   t a m o xi f e n   ha i nc r e a s e C D4  T h   a n d   C D4C D25T r e c o un t .   T h e   C D4T a n C D4 C D 25  T r e c o un t   o f   t h e   t r e a t m e n t   gr o ups   r e c e i vi n B C S O,   t hy m o qu i n o n e ,   a n t a m o xi f e n   w a s   hi g h e r   t h a n   t h a t   o f   t h e   DM B A   gr o up  ( p< 0 . 05) .   T h e   gr o up  r e c e i vi n B C S a t   a   d o s e   o f   68  m g/kg  B W / da y   h a t h e   hi g h e s t   a b s o l ut e   n u m b e r   o f   C D4  T   h e l pe r   f o l l o we by   t h e   B C S gr o up  o f   6. m g/kg  B W / da y   a n d   t h e   B C S gr o up  o f   136  m g/kg  B W / d a y .   T h e   gr o up  r e c e i vi ng   t a m o xif e n   h a a   hi g he r   a b s o l ut e   n u m be r   o f   C D4  T   h e l pe r   t h a n   t h e   t hy m o qu i n o n e   a n s o l v e n t   c o n tr o l   gr o ups .     I c a n   b e   s e e n   t h a t   B C S O,   t hy m o qu i n o ne   a n ta m o xif e n   a d mi ni s t r a t i o n   h a i nc r e a s e a b s o l ut e   C D4C D25T r e c o un t s   i D M B A - i nduc e S D   r a ts   b ut   B C S O,   t hy m o qu i n o ne   a n d   t a m o xi f e de c r e a s e   C D4   C D25  T r e pe r c e n t a ge .   T ot a l   a bs o l ut e   C D4C D2 T r e c o un t   o f   t h e   B C S O,   t hym o qu i n o n e   a n t a m o xif e gr o ups   wa s   hi g h e r   t h a n   t h e   D M B A   gr o up  ( p< 0. 05) .   T h e   B C S O6. gr o up  h a t h e   l o we s t   C D4C D25T r e g   pe r c e n t a ge .   T h e   p e r c e n t a ge   o f   C D4C D25  T r e i t h e   B C S O,   t hym o qu i n o n e   a n d   t a m o xi f e gr oups   wa s   s m a l l e r   t h a n   t h e   C D4C D25T r e pe r c e n t a ge   i n   th e   DM B A   gr o u ( p< 0 . 05) .   T h e   B C S O6. gr o up   h a t h e   l o we s t   C D4C D25T r e pe r c e n t a ge .   T h e   a d m i n i s t r a t i o n   o f   m u l t i p l e   B C S do s e s   b e f o r e   a n dur i n DM B A   i nduc t i o n   i nc r e a s e t h e   n u m be r   o f   C D4   T   h e l pe r   a n de c r e a s e d   C D4C D25   T   r e c o un t s   i n   D M B A - i nduc e d   S r a t s .   B C S t r e a t m e n t   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t .   J .   P ubl i c   He a l t h   S c i .   I S S N:  2252 - 8806       B lack   c umin  s e e oil   incr e as e   leuc oc y te  and  C D4Thelpe r   numbe r   in  s pr ague - da w ley   r at s …  ( T it iek   Hi day ati )   243   w i t hi t wo   we e ks   b e f o r e   a n d   f i ve   we e ks   dur i n g   DM B A   i ndu c t i o c a r e duc e   t h e   im m u n oto xi c   e f f e c t s   o f   DM B A .   T h e   a bil i t y   o f   B C S w i t h   do s e s   o f   6. 8,   68  a n 136  m g/kg  B W /da y   i i nh i b i t i n t h e   im mun o to xi c   e f f e c t s   o f   DM B A   i s   e qu i va l e n t   to  t h e   s t r e n gt h   o f   t h ym o qu i n o n e   a t   a   d o s e   o f   50  m g/kg  B W   ( p> 0. 05) .   B a s e d   o n   t h e   r e s u l t s   o f   t hi s   s t ud y ,   i t   c a b e   s e e t h a t   t h e   a d mi n i s t r a t i o n   o f   B C S O   b e f o r e   a n dur i ng   DM B i n du c t i o c a i nh i bi t   t h e   d e c r e a s e   i C D4  T c o un t .   B a s e o t h e   im m u n e   r e s po ns e   t e s t   r e s u l t s ,   B C S a d mi n i s t r a t i o n   c a n   i nc r e a s e   t h e   n u m be r   o f   leuko c y t e s ,   C D4   T h   a n C D4 C D25  T r e c o un t .   T h e   B C S O   gr o up  o f   6. m g/kg  B W /da y   wa s   a bl e   t o   i m pr o v e   th e   im m u n e   r e s po ns e   t o   t h e   s a m e   l e v e l   a s   t h e   B C S gr o up   o f   68  a n d   136  m g/kg  B W /da y   a n d   m a y   b e   s a f e r   w i t h   s m a ll e r   do s e s .   T h e   r e s u l t s   o f   t hi s   s t ud y   a r e   c o n s i s t e n t   w i t h   pr e vi o us   s t ud i e s   s h o w i n t h a t   B C S i s   b o t h   a n t i o xi da t i v e   a n d   i mm u n o m o du l a t o r y   [ 16 - 17,   20 - 22 ] .     Da t a   f r o m   t hi s   s t ud y   s uppo r t   t h e   r e s u l t s   o f   pr e vio us   s t udi e s ,   n a m e ly   t h e   e f f e c t   o f   B C S o n   t h e   nu m b e r   o f   C D4C D25T r e g.   C D4C D25T r e l ym p h o c y t e s   h a ve   a n   e s s e n t i a l   r o l e   i pe r i p h e r a l   t o l e r a n c e   r e s po ns e ,   s o   t hi s   i n f o r m a t i o n   o pe ns   a   ga f o r   r e s e a r c h   o n   t h e   e f f e c t   o f   B C S o n   a ut o i mm u n e   d i s e a s e .   T h e   da t a   f r o m   thi s   s t ud y   s uppo r t   t h e   da t a   f r o m   t h e   pr e vi o u s   r e s e a r c h ,   whi c h   i s   a b o ut  t h e   i m pa c t   o f   B C S o n   t h e   nu m b e r   o f   C D4C D25T r e g.   C D4C D25T r e lym p h o c y t e s   h a v e   a n   e s s e n t i a l   r o l e   i pe r i p h e r a l   t o l e r a n c e   r e s po n s e s ,   s o   t h i s   i n f o r m a t i o n   o pe n s   a   ga f o r   r e s e a r c h   o n   t h e   e f f e c t   o f   B C S o n   a uto i mm u n e   d i s e a s e .   T h e   r e s u l t s   o f   t hi s   s t ud y   a l s o   s uppo r t   t h e   c l a im   t h a t   h a s   de ve l o pe s o   f a r   t h a t   B C S c a n   a c t   a s   a im m u n o s ur v e il l a n c e   a m p li f i e r   [ 8,   15,   20] .   F i r s t   de v e l o pe by   P a u l   E h r li c h   i n   t h e   e a r l y   20t h   c e n t ur y ,     t h e   c o n c e pt   o f   i mm u n e   s ur v e il l a n c e   i s   b a s e o n   t h e   a s s u m pt i o n   t h a t   t h e   i mm u n e   s y s t e m   h a s   a   r o l e   i pr e v e n t i n a n li mi t i ng  t u m o ur   gr o w t h   [ 7,   8,   23]   i nc l ud i ng  t h e   pr o c e s s   o f   c a r c i n o ge ne s i s   du e   t o   e x po s ur e   to  c a r c i n o ge ns .   R e s e a r c h   i n   t h e   f i e l o f   i mm u n o l o g y ,   l a b o r a to r y ,   a n c li ni c   t h e n   j us t i f y   t h e   a s s u m pt i o n.   On e   o f   t h e   c e l l u l a r   c o m po n e n t s   t h a t   pl a y   c r uc i a l   r o l e   i i mm u n o s ur v e il l a nc e   a ga i ns t   e x p o s ur e   to   im m u n o s uppr e s s i ve   c a r c i n o ge n s   i s   C D4  T h   ly m p ho c y t e s .   I m m u n o s ur v e il l a nc e   a c t i vi t y   p e r f o r m e by   C D4  T lym p h o c y t e s   i s   a s s o c i a t e w i t h   C D4T h   a bil i t to   a c t i v a t e   C D8  c y t o l y t i c   l ym p h o c y t e s   i n   de s t r o y i ng   n e o p l a s m s   a n pa t h o ge n s .   A s   C D4  T h   i nc r e a s e s ,   t h e   pr o duc t i o n   o f   I L - 2,   I L - 12  a n I F N - y   c y t o k i n e s   a l s o   i nc r e a s e s ,   t h us   i nc r e a s i n t he   n u m be r   a n a c t i v i t y   o f   C D8  c y t o l y t i c   l ym p h o c y t e s   [ 8] .   I t   h a s   b e e de m o ns t r a t e t h a t   B C S de c r e a s e s   e NO S   a c t i vi t y ,   lym p h o c y t e   pr o l i f e r a t i v e   a c t i vi t y   a n d   d i f f e r e n t i a t i o i nc r e a s e s   t h e   pr o duc t i o n   o f   I L - 12  c y t o ki n e s   by   m a c r o ph a ge s   a n i nhi b i t s   i n f l a mm a t i o n   t h r o ugh   i nhi bi t i o n   o f     pr o s t a gl a n d i pr o duc t i o n   [ 15,   21 - 22,   24 ] .     A   r e a s o na bl e   a m o u n t   o f   C D4 C D25  T r e s e r v e s   to   r e gul a t e   t h e   to l e r a nc e   r e s po n s e ,   b ut   e x c e s s i ve   C D4C D25T r e g   c o un t   i s   im m u n o s uppr e s s i ve   [ 25 - 26] .   Da t a   f r o m   t hi s   s t ud y   i n d i c a t e   t h a t   DM B A   in duc t i o de c r e a s e s   t h e   t ot a l   a m o u n t   o f   C D4 C D25T r e b u t   i n c r e a s e s   t he   pe r c e n t a ge   o f   C D4C D25  t o   C D4T h   c e ll s .   C D4C D25T r e l ym p h o c y t e s   a r e   a c t i v a t e to   pr e v e n t   e x c e s s i ve   a n d e s t r uc t i v e   i mm u ne   r e s po n s e s .   C D4C D25T r e a c t i v a t i o n   i s   pe r f o r m e d   i c o n d i t i o n s   w he r e   l ym p h o c y t e   pr o l if e r a t i o n   a c t i v i t y   i s     e x c e s s i ve   [ 9,   25 - 2 6] ,   b u t   i f   t h e   C D4C D25  T r e c o un t   i s   too   l a r ge ,   i t   w i ll   b e   im m u n o s uppr e s s i ve .   B a s e o t h e   r e s u l t s   o f   pr e vi o us   s t udi e s ,   t h e   a v e r a ge   p e r c e n t a ge   o f   C D4C D25T r e t o   C D4T h   i s   l o we r   o r   e qua l   to   10 %   [ 27] .   I n   t h e s e   i de a l   c o n d i t i o ns ,   T r e c a n   p l a y   a   r o l e   i n   m a i n t a i n i ng  t h e   h o m e o s t a s i s   o f   t h e   im m u n e   r e s po n s e ,   pr e v e n t i n t h e   o c c ur r e n c e   o f   a n   e x c e s s i ve   im m u ne   r e s po n s e   o r   i mm u n o de f i c i e n c y .   B a s e o n   t h e   r e s u l t s   o f   pr e vi o us   s t ud i e s ,   t h e   a v e r a ge   pe r c e n t a ge   o f   C D4 C D25T r e to   C D4T h   i s   l o we r   o r   e qua l   t 10%   [ 27] .   I n   t h e s e   i de a l   c o n d i t i o n s ,   T r e c a n   p l a y   a   r o l e   i n   m a i n t a i n in t h e   h o m e o s t a s i s   o f   t h e   i mm u n e   r e s po n s e ,   pr e ve n t i n t h e   o c c ur r e n c e   o f   a n   e x c e s s i ve   im m u n e   r e s po n s e   o r   i mm u n o de f i c i e n c y .   B a s e o n   t h e   r e s u l t s   o f   t hi s   s t ud y ,   i t   c a b e   pr o v e t h a t   DM B A   i n duc t i o n   de c r e a s e s   C D4C D25  T r e g   c o un t.   T h e   l o C D4T h   c o un t   s e e m s   t b e   r e l a t e to   t h i s   C D4C D25T r e n u m be r   due   to   DM B m e t a b o l i t e s ,   w hi c a r e   im m u n o s uppr e s s i ve   a n h e m a t oto xi c   [ 15,   24] .   B C S a d m i n i s t r a t i o i nc r e a s e t he   a bs o l ut e   a m o un t   o f   C D4C D25  T r e b ut   de c r e a s e t h e   pe r c e n t a ge   o f   C D4C D25T r e to  C D4.   T h e   B C S O,   t hy m o qu i n o n e   a n t a m o xif e n   gr o ups   h a hi g h e r   C D4C D25  T r e a b s o l ut e   n u m be r s   t h a n   t h e   D M B A   gr o up  b ut   ha a   l o we r   C D4 C D25T r e pe r c e n t a ge   t h a n   t he   DM B A   gr o up.   B C S a d mi n i s t r a t i o n   i nc r e a s e t he   a bs o l ut e   a m o un t   o f   C D4C D25  T r e b ut   de c r e a s e t h e   r a t e   o f   C D4C D25T r e to  C D4.   T h e   B C S O,   t hy m o qu i n o n e   a n t a m o xif e n   gr o ups   h a hi g h e r   C D4C D25  T r e a b s o l ut e   n u m be r s   t h a n   t h e   D M B A   gr o up  b ut   h a a   l o we r   C D4C D25T r e pe r c e n t a ge   t h a n   t h e   DM B A   gr o up .       4.   CONC L USI ON   B C S a d m i n i s t r a t i o n   b e f o r e   a n dur i n D M B A   in duc t i o n   i S r a t s   c a n   i nc r e a s e   c e ll u l a r   i mm u n e   r e s po n s e ,   e s pe c i a ll y   t h e   a bs o l ut e   n u m be r   o f   C D4  T   h e l p e r   a n C D4C D25  T r e c o un t .   B C S a t   a   d os e   o f   6. m g/kg  B W /d a y   wa s   a bl e   t o   i n c r e a s e   C D4  T   he l pe r   c o un t   to   t h e   s a m e   l e v e l   a s   t h e   do s e s   o f   68  a n d   13 m g/kg   BW / da y   do s e s .         Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
             I S S N:  2252 - 8806   I n t .   J .   P ubl i c   He a l t h   S c i .   Vo l .   8,   N o .   2 J un e   2019 :   23 8     24 5   244   AC K NOWL E DGE M E NT S   W e   a r e   gr a t e f u l   t o   t h e   I n do n e s i a   mi n i s t r y   o f   r e s e a r c h ,   t e c hn o l o g y   a n hi g h e r   e duc a t i o n   w h o   h a ve   f u n de t h e   s t udy   ( No   gr a n t :   28376541/28376) .       RE F E R E NC E S   [1 ]   Re i t s m MB,   Fu l l m an   N ,   N g   M,   Sa l a m J S,   A b aj o b i r   A ,   A b at e   K H ,   e t   al .   S mo k i n g   p re v a l e n ce   an d   at t ri b u t ab l e   d i s e as e   b u rd en   i n   1 9 5   c o u n t ri e s   an d   t e rri t o r i e s ,   1 9 9 0 2 0 1 5 :   s y s t em at i c   an al y s i s   fro m   t h e   G l o b al   Bu r d en   o D i s e as e   St u d y   2 0 1 5 .   Th La n ce t .   2 0 1 7 ;   3 8 9 ( 1 0 0 8 2 ): 1 8 8 5 1 9 0 6 .     [2 ]   Szc z e k l i k   A ,   Sz c z e k l i k   J ,   G al u s zk Z ,   Mu s i al   J ,   K o l a rzy k   E ,   T arg o s D .   H u m o ra l   i mm u n o s u p p re s s i o n   i n   me n   e x p o s e d   t o   p o l y cy cl i c   ar o m at i c   h y d ro c arb o n s   an d   r el at e d   c ar c i n o g e n s   i n   p o l l u t e d   e n v i r o n men t s .   E n vi r o n   H ea l t h   P er s p ect .   1 9 9 4 ;   1 0 2 (3 ): 3 0 2 .     [3 ]   J ac o b   CV ,   St el z e G T ,   W al l a ce   J H .   T h e   i n fl u e n ce   o ci g ar e t t e   t o b acco   s m o k e   p ro d u c t s   o n   t h e   i mm u n e   r e s p o n s e .   T h e   cel l u l ar  b as i s   o i mmu n o s u p p re s s i o n   b y   w at e r - s o l u b l e   c o n d en s at e   o t o b acc o   s mo k e.   Im m u n o l o g y .   1 9 8 0 ;   4 0 ( 4 ): 6 2 1 .     [4 ]   T h e rri a u l t   M - J ,   Pro u l x   L - I ,   Cas t o n g u a y   A ,   B i s s o n n e t t e   E Y .   Immu n o m o d u l at o r y   e ffec t s   o f   t h e   t o b a cc o - s p eci fi c ar c i n o g e n ,   N N K ,   o n   a l v eo l ar  m a c r o p h ag e s .   Cl i n   E xp   Im m u n o l .   2 0 0 3 ;   1 3 2 ( 2 ): 2 3 2 2 3 8 .     [5 ]   D o g a n   MV ,   S h i el d s   B,   Cu t ro n C,   G ao   L ,   G i b b o n s   FX ,   Si m o n s   R,   e t   al .   T h e   e ff ec t   o s mo k i n g   o n   D N A   me t h y l at i o n   o p e r i p h e ral   b l o o d   m o n o n u cl e ar  ce l l s   fro A fr i c an   A me ri c an   w o me n .   B M G en o m i cs .   2 0 1 4 ;   1 5 ( 1 ): 1 5 1 .     [6 ]   Bart o n   SE ,   J en k i n s   D ,   C u zi ck   J ,   Ma d d o x   PH ,   E d w ar d s   R,   Si n g e r   A .   E ff ec t   o c i g ar e t t e   s m o k i n g   o n   ce rv i c al   e p i t h e l i al   i mmu n i t y :   a   mec h a n i s m   fo r   n eo p l as t i c   ch an g e?  Th La n ce t .   1 9 8 8 ;   3 3 2 (8 6 1 2 ): 6 5 2 6 5 4 .     [7 ]   Iw as ak i   A ,   M ed zh i t o v   R.   C o n t ro l   o a d ap t i v e   i mm u n i t y   b y   t h e   i n n at e   i mm u n e   s y s t em.   Na t   Im m u n o l .   2 0 1 5 ;   1 6 ( 4 ): 3 4 3 .     [8 ]   Bu rn e t   M.   Immu n o l o g i c al   s u r v e i l l a n ce .   E l s evi er ;   2 0 1 4 .     [9 ]   Mars h al l   H D ,   Ra y   J P,   L ai d l a w   BJ ,   Z h an g   N ,   G a w an d D ,   St aro n   MM,   e t   al .   T h e   t ran s fo r m i n g   g ro w t h   fa c t o b e t a   s i g n al i n g   p at h w a y   i s   c ri t i c a l   fo t h e   f o r m at i o n   o CD 4   T   fo l l i cu l ar  h e l p e cel l s   an d   i s o t y p e - s w i t ch e d   an t i b o d y   re s p o n s e s   i n   t h l u n g   m u co s a.   eL ife .   2 0 1 5 ; 4 .     [1 0 ]   Su an   D ,   N g u y en   A ,   Mo ra n   I,   B o u r n e   K ,   H e r me s   J R,   A r s h i   M,   e t   al .   T   fo l l i c u l ar  h e l p e cel l s   h av d i s t i n c t   m o d es   o mi g rat i o n   a n d   mo l ecu l ar   s i g n at u r e s   i n   n a i v e   a n d   memo r y   i mmu n e   r e s p o n s e s .   Im m u n i t y .   2 0 1 5 ;   4 2 (4 ): 7 0 4 7 1 8 .     [1 1 ]   K h an   N ,   A faq   F,   Mu k h t ar  H .   Can ce ch em o p r e v en t i o n   t h ro u g h   d i e t ar y   an t i o x i d a n t s :   p ro g r e s s   an d   p ro mi s e .   A n t i o x i d   R ed o x   S i g n al .   2 0 0 8 ; 1 0 ( 3 ): 4 7 5 5 1 0 .     [1 2 ]   Ro d u an   MRM ,   H a m i d   R A ,   S u l a i m an   H ,   Mo h t arru d i n   N .   A n n o n mu ri c at l e a v e s   e x t rac t s   p re v e n t   D MBA / T PA - i n d u ce d   s k i n   t u m o r i g en e s i s   v i mo d u l at i n g   a n t i o x i d an t s   e n z y me s   s y s t em   i n   I CR  m i ce.   B i o m ed   P h a r m a co t h er 2 0 1 7 ;   9 4 : 4 8 1 4 8 8 .     [1 3 ]   Raj ak u m ar   T ,   Pu g al en d h i   P,   T h i l a g av at h i   S ,   A n an t h a k ri s h n an   D ,   G u n as e k ara n   K .   A l l y l   i s o t h i o cy a n at e ,   p o t e n t   c h emo p rev e n t i v e   a g e n t   t arg e t s   A h R/ N rf2   s i g n al i n g   p at h w a y   i n   ch em i c al l y   i n d u ce d   m a mm ar y   c ar ci n o g en e s i s .   M o l   Cel l   B i o c h em .   2 0 1 8 ;   4 3 7 (1 2 ): 1 1 2 .     [1 4 ]   G u l   H F ,   Il h a n   N ,   S u s am   S ,   T at ar  O ,   I l h an   N .   I s   T h e r A n y   Pr o t ec t i v e   E ff e c t   o P o me g ra n at an d   T an g e r e t i n   O n   T h e   D MBA - In d u ce d   Rat   Br e as t   Can ce M o d el M u l t i d i s ci p   D i g i t   P u b l   In s t   P r o c .   2 0 1 7 ; 1 (1 0 ): 1 0 2 5 .     [1 5 ]   A k ro A ,   M u s t o fa  M.   B l a c k   c u mi n   s ee d   o i l   i n c r e as e s   p h ag o cy t i a c t i v i t y   a n d   s ec r e t i o n   o IL - 1 2   b y   m a c ro p h a g e s .   B i o m ed   R es .   2 0 1 7 ;   2 8 ( 1 2 ).     [1 6 ]   A b o u   K h al i l   N S,   A b d - E l k ar eem   M,   Sa y ed   A H .   N i g el l s at i v s ee d   p ro t ec t s   ag ai n s t   4 - n o n y l p h en o l - i n d u ced   h aem at o t o x i ci t y   i n   Cl ari as   g ar i e p i n u s   (Bu r ch e l l ,   1 8 2 2 ):   O x i d an t / an t i o x i d a n t   r e b al an ce .   A q u a N u t r .   2 0 1 7 ;   2 3 ( 6 ): 1 4 6 7 1 4 7 4 .     [1 7 ]   Bu ri t s   M,   Bu c ar  F.   A n t i o x i d an t   a c t i v i t y   o N i g e l l s at i v a   e s s en t i al   o i l .   P h yt o t h er   R es .   2 0 0 0 ; 1 4 (5 ): 3 2 3 3 2 8 .     [1 8 ]   D eh e l e a n   CA ,   S o i c C,   Pi n zaru   I ,   Co r i c o v a c   D ,   D a n c i u   C,   Pav el   I ,   B o r c an   F,   Sp an d i d o s   D A ,   T s at s ak i s   A M Bad e r c F .   S e x   d i ff e r en c e s   an d   p at h o l o g y   s t at u s   c o r re l at e d   t o   t h e   t o x i ci t y   o s o me   co mm o n   c ar c i n o g e n s   i n   e x p e ri men t al   s k i n   c ar c i n o m a ,   Fo o d   C h em   T o x i c o l .   2 0 1 6   Se p ; 9 5 : 1 4 9 - 5 8 .   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . fc t . 2 0 1 6 . 0 7 . 0 0 7 .   E p u b   2 0 1 6   J u l   1 1 .   [1 9 ]   Si m s ,   P. ,   G ro v e r,   P.   L .   V ar i a t i o n s   d e p en d en t   o n   A g e   a n d   D i e t   i n   t h e   M e t ab o l i s m   o 7 , 1 2 - D i me t h y l b e n z[ a] - an t h racen e   b y   Rat   L i v e H o m o g e n at e s ,   N at u r v o l u me   2 1 6 ,   p ag e s   7 7 7 8   (0 7   O c t o b e 1 9 6 7 ) ;   h t t p s : / / w w w . n at u r e . co m / art i cl e s / 2 1 6 0 7 7 a)   [2 0 ]   K u b at k P,   A h l e rs   I ,   A h l e rs o v á  E ,   A d á me k o v á  E ,   L u k   P,   Bo j k o v á  B ,   e t   al .   C h em o p r e v en t i o n   o m a mmary   c ar c i n o g e n e s i s   i n   f em a l e   rat s   b y   ro f ec o x i b .   Ca n cer   Let t .   2 0 0 3 ;   2 0 2 (2 ): 1 3 1 1 3 6 .     [2 1 ]   A h m ad   A ,   H u s ai n   A ,   Mu j ee b   M,   K h a n   S A ,   N aj mi   A K ,   Si d d i q u e   N A ,   e t   al .   A   r ev i ew   o n   t h e rap eu t i c   p o t en t i al   o f   N i g el l a   s at i v a:   A   mi ra c l e   h e rb .   A s i a n   P a Tr o p   B i o m ed .   2 0 1 3 ;   3 (5 ): 3 3 7 3 5 2 .     Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t .   J .   P ubl i c   He a l t h   S c i .   I S S N:  2252 - 8806       B lack   c umin  s e e oil   incr e as e   leuc oc y te  and  C D4Thelpe r   numbe r   in  s pr ague - da w ley   r at s …  ( T it iek   Hi day ati )   245   [2 2 ]   H i d a y at i   T ,   A k r o m   A ,   In d ra y an t i   I ,   Sag i ran   S.   E v a l u at i o n   o t h e   Bl a ck   Cu mi n   S ee d   O i l   Ro l e   (BCSO o n   D ecl i n i n   e N O E x p re s s i o n   an d   Pl as m N O   L ev e l s :   In i t i al   St u d i e s   Ch emo p rev e n t i v e   BCSO   fo L u n g   Can ce r.   In t e r n a t i o n a l   Jo u r n a l   o f   P h a r m a   M ed i c i n a n d   B i o l o g i c a l   S c i en ce s ,   2 0 1 7 ;     [2 3 ]   A rb o re  G ,   W e s t   E E ,   Sp o l s k i   R,   Ro b e rt s o n   A A ,   K l o s   A ,   Rh ei n h e i me r   C,   e t   al .   T   h el p e 1   i mm u n i t y   r e q u i re s   c o m p l emen t - d ri v e n   N L RP3   i n f l a mm as o me   a c t i v i t y   i n   C D 4 +   T   cel l s .   S ci en ce .   2 0 1 6 ;   3 5 2 (6 2 9 2 ): aad 1 2 1 0 .     [2 4 ]   H i d a y at i ,   T . ,   H ab i b ,   I .   A n d   A k r o m ,   A .   A n t i i mm u n o t o x i c   o Bl a ck   C u m i n   S ee d   O i l   ( N i g e l l s at i v O i l i n   D M BA   (D i me t h y l b en zan t ra ce n e ) - In d u ce d   Mi ce .   In t er n a t i o n a l   Jo u r n a l   o f   P h a r m a   M ed i ci n a n d   B i o l o g i ca l   S c i e n ces   V o l .   4 ,   N o .   3 ,   J u l y   2 0 1 5   [2 5 ]   Ch en   W ,   J i n   W ,   H ar d eg e n   N ,   L ei   K ,   L i   L ,   Mar i n o s   N ,   et   al .   Co n v e rs i o n   o p e r i p h e ral   C D 4 +   CD 2 5 -   n ai v e   T   c el l s   t o   CD 4 +   CD 2 5 +   reg u l at o r y   T   ce l l s   b y   T G F - β  i n d u c t i o n   o t ran s c r i p t i o n   fa c t o F o x p 3 .   E xp   M ed .   2 0 0 3 ;   1 9 8 (1 2 ): 1 8 7 5 1 8 8 6 .     [2 6 ]   Sh i mi zu   J ,   Y a m azak i   S,   T ak ah as h i   T ,   I s h i d Y ,   Sak ag u c h i   S.   St i mu l at i o n   o C D 2 5 + CD 4 + reg u l at o r y   T   ce l l s   t h ro u g h   G I T b re ak s   i mm u n o l o g i c a l   s el f - t o l e ra n ce .   Na t   Im m u n o l .   2 0 0 2 ;   3 ( 2 ): 1 3 5 .     [2 7 ]   W an g ,   H ,   Z h ao ,   L ,   S u n ,   Z ,   Su n ,   L ,   Z h an g ,   B ,   Z h ao ,   Y .   A   p o t en t i al   s i d e   e ff ec t   o cy cl o s p o ri n   A :   i n h i b i t i o n   o C D 4   (+ CD 2 5   (+ r e g u l at o r y   T   ce l l s   i n   m i ce.   Tr a n s p l a n t a t i o n .   2 0 0 6   D ec   1 5 ;   8 2 ( 1 1 ): 1 4 8 4 - 9 2 .   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.