I nte rna t io na l J o urna l o f   P u bli H ea lt h Science   ( I J P H S)   Vo l. 5 ,   No . 4 Dec em b er   201 6 ,   p p .   48 4 ~ 4 88   I SS N:  2252 - 8806           484       J o ur na l ho m ep a g e h ttp : //ia e s jo u r n a l.c o m/o n lin e/in d ex . p h p / I JP HS   Subchro nic   To x ic ity  o G reen  Alga e ( Sp yro g yra   s p . Etha no lic   Ex tract  o H e m a t o lo g ic P a ra m ete r s       Nina   Sa la m a h Wa hy u Widy a nin g s ih H a ri  Su s a nti,   A ng g it a   Dev i,  Anita   Wening   Sej a t i,    Z a hra   Aly a   P utr i   De p a rt m e n o f   P h a rm a c y ,   Un iv e r sitas   A h m a d   Da h lan ,   In d o n e sia       Art icle  I nfo     AB ST RAC T   A r ticle  his to r y:   R ec eiv ed   J an   6 ,   2 0 1 5   R ev i s ed   Ma r   2 ,   2 0 1 6   A cc ep ted   Ma r   1 6 ,   2 0 1 6     G re e n   A lg a e ,   a n   o rg a n ism   w it h   a c ti v e   su b sta n c e   su c h   a p h y to m e l a to n i n ,   h a p o ten ti a to   b e   d e v e lo p e d   a In d o n e sia n   trad it i o n a m e d icin e .   As   th e   lo n g   term   a d d it io n   o f   G re e n   A lg a e   e th a n o l   e x trac ( Eks tra k   e ta n o l   g a n g g a n g   h ij a u ,   EE G H)  in f lu e n c e th e   h e m a to lo g y   s y st e m ,   in   t h is  p a p e r,   t h e   sa fe t y   tes t   w a d o n e   to   e n su re   th e   sa f e t y   o it u se   th ro u g h   s u b c h r o n ic  t o x icity   te st  o EE G o n   th e   h e m a to lo g y   p a ra m e ters   o f   W istar  ra ts.   T h e   tes g ro u p   c o n siste d   of   th re e   g ro u p s   trea ted   w it h   EE G H   100   mg / kg 200   m g /k g a n d   400   mg / kg w h il e   th e   c o n tro g ro u p   w a g i v e n   b y   0 . 5 CM C - Na ,   w it h   8   ra ts  e a c h   re sp e c ti v e l y .   B y   u sin g   b lo o d   sa m p les   ta k e n   f ro m   o rb it a sin u o n   t h e   2 9 th   d a y ,   c o m m o n   h e m a to lo g ic  p a ra m e ters   (e r y th ro c y tes ,   l e u k o c y t e s,  a n d   h e m o g lo b in   lev e l),   th e   p a ra m e te rs  o f   h e m o sta sis  (p late lets,  p T ,   a P T T ,   BT)   a n d   imm u n e   p a ra m e ters   ( Di f fe re n ti a L e u k o c y te Co u n ts   in c lu d e   n e u tro p h il se g m e n t,   ly m p h o c y tes ,   m o n o c y t e s,  a n d   e o sin o p h il s)  w e re   f in a ll y   o b se rv e d   a n d   sh o w e d   th a th e   2 8   d a y s - a d d it io n   o f   EE G in c re a se   th e   h e m a to lo g ica p a ra m e ters   o f   W istar rats.   K ey w o r d :   Gr ee n   a lg ae   He m ato lo g ic   Ho m eo s tas is   S p ir o g yra   s p   Su b cr o n ic  t o x ic it y   Co p y rig h ©   2 0 1 6   In stit u te o A d v a n c e d   E n g i n e e rin g   a n d   S c ien c e   Al rig h ts  re se rv e d .   C o r r e s p o nd ing   A uth o r :   Nin Sala m a h ,     Dep ar t m en t o f   P h ar m ac y ,   Un i v er s ita s   A h m ad   Dah lan ,   J l P r o f   So ep o m o ,   J an tu r a n ,   Yo g y a k ar ta - 55165 I n d o n esia .   E m ail:   s y i f a n ip u tr i @ y ah o o . co m       1.   I NT RO D UCT I O N   Gr ee n   alg ae   ( S p ir o g yra   s p . )   ar th r ed   lik g r ee n   alg ae .   I ts   b o d y   is   m ad u p   o f   ce lls   th at  f o r m   elo n g ated   s tr an d s   a s   t h r ea d li k e.   E ac h   o f   it s   ce lls   h a s   c h lo r o p last s   w it h   r ib b o n - s h ap ed Seed s   s p ir al  w it h   a   ce ll  n u c leu s P r o lif er atio n   v eg eta tiv e l y   t h r o u g h   f r ag m en tatio n   a n d   g e n er ati v p r o lif er atio n   t h r o u g h   co n j u g atio n .   Gr ee n   al g ae   ( S p ir o g yra   s p . )   liv in   s ea   w ater ,   f r es h   w ater ,   an d   h u m id   p lace .   Gr ee n   alg a co u ld   liv f r ee   b u t h er ar also   co lo n ized .   T h alg ae   h av c h lo r o p h y ll  a n d   y ello w   s u b s tan ce   ( c ar o ten e)   th at  ap p ea r   g r ee n i s h - y ello w .   Gr ee n   al g ae   ( S p ir o g yra   s p . )   h av th ac t iv s u b s ta n ce   i n   th f o r m   o f   m elato n in ,   w h ic h   m elato n in   co m p o u n d s   p r ese n in   p la n t s   is   o f ten   r e f er r ed   to   as p h y to m e lato n i n   [ 1 ] .   I n   p r ev io u s   s t u d y   r ep o r ted   th at  m elato n in   m a y   h elp   p r ev e n b r ea s ca n ce r   a n d   p r o s tate  ca n ce r   [ 2 ] An o th er   b en e f it  o f   m ela to n i n   is   an   an tio x id an [ 3 ] ,   to   p r ev en k id n e y   d a m ag wh ich   i s   ca u s ed   b y     s m o k in g   [ 4 ] ,   to   ad d r ess   t h m y o ca r d ial  d a m ag e   d u to   n ico tin [ 5 ] ,   p r ev en ti n g   ce r eb r al  h e m o r r h ag e   [ 6 ] in h ib its   n e u r o to x ic  o f   ar s e n i [ 7 ] ,   as  an   an ti - m o u t h   ca n ce r   [ 8 ] ,   an d   an ti - h y p er te n s io n   [ 9 ] .   Du to   th i m p o r tan ce   o f   t h f u n ctio n   p h y to m elato n in   co m p o u n d s ,   th er ef o r th s t u d y   o f   co m p o u n d s   p h y to m ela to n i n   n ee d s   to   b co n d u cted   [ 1 0 ] .   B ased   o n   th d escr ip tio n   ab o v e,   r esear ch er s   co n d u ct  r esear ch   o n   th e f f ec t s   o f   lo n g - ter m   tr ea t m en t   ( s u b ch r o n ic)   et h an o e x tr ac o f   g r ee n   alg ae   ( S p ir o g yra   s p . )   o n   th h e m ato lo g ic  p ictu r o f   W is tar   m ale  r ats,   an d   to   id en tify   t h to x ic  e f f ec t s   af ter   g iv i n g   eth a n o l e x tr ac t o f   g r ee n   alg ae   ( S p ir o g yra   s p . ) .     Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I J P HS   I SS N:  2252 - 8806       S u b ch r o n ic  To xicity  o f G r ee n   A lg a ( S p yro g yra   s p . )   E th a n o l ic  E xtra ct  o n   Hem a to lo g ic  . . . .   ( N in a   S a la ma h )   485   2.   RE S E ARCH   M E T H O D   T h is   s tu d y   u s ed   3 2   m ale  r ats   W is tar   - 2 - 3   m o n t h s   o ld   w i th   w e ig h r an g o f   1 5 0 - 2 0 0   g r a m s .   T h e   r esear ch   d esi g n   w a s ,   3 2   r ats  d i v id ed   in to   4   g r o u p s   a n d   ea ch   g r o u p   co m p r is ed   8   tails .   B ef o r tr ea t m e n th e   r ats   h av ad ap ted   f o r   o n w ee k ,   t h en   tr ea ted   f o r   2 8   d ay s   w ith   o r ally   i n j ec ted   ev er y   d a y .   T h tr ea tm e n t s   o f   ea ch   g r o u p   w er as  f o llo w s :   Gr o u p   I       As a  co n tr o l tr ea ted   w it h   s o l u tio n   o f   Na  0 . 5 % C MC s u s p en s io n   Gr o u p   I I       Giv e n   t h s u s p en s io n   o f   et h an o lic  ex tr ac o f   g r ee n   al g ae   o r al l y   at   d o s o f   1 0 0   m g / k g   b w   ( g r ee n   alg ae   eth a n o l e x tr ac t 1 0 0   m g / k g ) .   Gr o u p   I I I       Giv e n   t h s u s p en s io n   o f   et h an o lic  ex tr ac o f   g r ee n   al g ae   o r al l y   at   d o s o f   2 0 0   m g / k g   b w   ( g r ee n   alg ae   eth a n o l e x tr ac t 2 0 0   m g / k g ) .   Gr o u p   I     Giv e n   t h s u s p en s io n   o f   et h an o lic  ex tr ac o f   g r ee n   al g ae   o r al l y   at   d o s o f   4 0 0   m g / k g   b w   ( g r ee n   alg ae   eth a n o l e x tr ac 4 0 0   m g / k g ) .   T h last   d ay   ( af ter   2 8   d ay s   tr ea t m e n t)   r at  h av b lo o d   d r aw n   th r o u g h   o r b ital  s in u s   an d   a n al y ze d   o f   v alu o f   er y t h r o c y tes,  le u k o c y tes,  le u k o c y te  co u n t,  co u n th n u m b er   o f   p latelets,  P T ,   aPT T ,   B T   an d   h e m o g lo b in   lev el s .   T h en   t h r esu l ts   a n al y ze d   s ta tis tica ll y   an d   co m p ar ed   w it h   n o r m a h e m a to lo g ic  v al u e s     ra t   [ 1 1 ] .       3.   RE SU L T A ND  AN AL Y SI S   Gr ee n   al g ae   th a h a v b ee n   p o llin ated   an d   m ac er ated   with   9 6 et h an o p r o d u ce d   t h ex tr ac ts   v is co u s   s o lid   g r ee n   ch ar ac ter i s tic  w i th   o d o r   o f   g r ee n   al g ae .   He m ato lo g ica l   ex a m in a tio n   is   v er y   i m p o r tan i n   th d iag n o s is   o f   d is o r d er   o r   f u n c tio n al  d am a g to   o r g an s   o r   ti s s u es,  t h is   is   d u t o   h e m ato lo g ic  e x a m i n atio n   m a y   s h o w   a n   o v er v ie w   o f   th f u n ct io n s   o f   o r g a n s   an d   p h y s io lo g ical  s tat u s .   B lo o d   s a m p les  h a v ta k e n   v ia  t h o r b it al  s in u s   w h ite  r at  u s i n g   ca p illar y   t u b e.     clea n   E p en d o r f   th at  h as  b ee n   g iv e n   E th y le n Dia m in T etr A cid   ( E DT A )   h as  u s ed   to   ac co m m o d ate  th e   b lo o d .   E DT A   u s ed   as a n   a n tic o ag u la n t.  B lo o d   s am p li n g   p er f o r m ed   i n   all  g r o u p s   o f   r at  o n   d a y   2 8   [ 1 2 ] .     3 . 1 .   G ener a l H e m a t o lo g ica l P a ra m et er     T est  f o r   co m m o n   h e m ato lo g i ca p ar a m eter s   co n d u cted   to   d eter m in h o w   t h e f f ec o f   s u b ch r o n ic   E E GH  ca n   af f ec t   t h er y th r o cy te s ,   le u k o c y tes,   an d   h e m o g lo b in   co n ce n tr atio n   [ 1 3 ] All  r es u lt s   ar e   s u m m ar ized   in   T ab le  1 .   Valu es  h a v s h o w n   i n   t h r ed u ctio n   o r   in cr ea s e   in   th e   n u m b er   a n d   lev el s   t h at  h a v e   ad j u s ted   to   n o r m al  le v el s   in   t h b lo o d   o f   W is tar   r ats.       T ab le   1 .   T h Re s u lt s   o f   C a lcu l atio n   Gen er al  He m ato lo g ical  P ar am e ter s   o f   R at  a f ter   E th a n o lic  E x tr ac t o f   Gr ee n   A lg ae   w er g iv e n   f o r   2 8   Day s   G r o u p   D o sag e   ( mg / k g   bw )   X   ±   S D   ( g / d L )   Er y t h r o c y t e     C o n t r o l   5 . 3 2 5   ±   0 . 5 4   1 0 0   7 . 5 6 2   ±   0 . 2 5 *   2 0 0   6 . 4 6 6   ±   0 . 4 3 *   4 0 0   8 . 3   ±   0 . 3 7 *   L e u k o c y t e s   C o n t r o l   5 . 6 1 2   ±   2 . 4 7   1 0 0   1 4 . 1 8 7   ±   3 . 8 7 *   2 0 0   9 . 0 3 7   ±   2 . 4 0 *   4 0 0   1 1 . 2 8 7   ±   4 . 0 8 *   H e mo g l o b i n   C o n t r o l   9 . 7 8   ±   0 . 9 5   1 0 0   1 3 . 6 8   ±   0 . 4 8 *   2 0 0   1 4 . 9 7   ±   0 . 4 7 *   4 0 0   1 4 . 6 7   ±   0 . 9 1 *   No te  :   * p   0 . 0 5   ( Has sig n i f ican tl y   d if f er e n ce s   to   th co n tr o l)         3 . 1 . 1 .   E ry t hro cy t es    Data   o n   t h n u m b er   o f   er y t h r o cy te s   t h at  a n al y ze d   u s i n g   p ar a m etr ic  s tat is tic s ,   it  s h o w ed   d if f er e n ce s   b et w ee n   th e   tr ea t m e n g r o u p s .   Ho w e v er ,   if   v ie w ed   f r o m   n o r m al   m o u s ( 5 . 0 0   to   1 0 . 0 0   m illi o n / mm 3 ) th e   in cr ea s i n g   i n   th v alu o f   t h er y t h r o c y tes  i n   th tr ea t m e n g r o u p   w as  s til w ith in   t h e   n o r m a r an g e,   it  co n clu d ed   th at  t h et h an o l e x t r ac t o f   g r ee n   al g ae   d id   n o t a f f e ct  th n u m b er   o f   er y t h r o c y tes.            Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                      I SS N :   2 2 5 2 - 8806   I J P HS   Vo l.  5 ,   No .   4 Dec em b er   20 1 6 :   48 4     4 88   486   3 . 1 . 2 .   L eu k o cy t e     No r m a lit y   test   o f   leu k o c y te  c o u n h as  g e n er at ed   s ig n i f ica n v al u ( p > 0 . 0 5 ) ,   w h ic h   m ea n s   th d ata  w a s   h o m o g en eo u s .   Fu r t h er   an al y s i s   o f   p ar a m etr ic  s tatis tical   o n w a y   A NOV A   s h o w ed   th er w a s   s i g n i f ica n t   d if f er e n ce s   w h e n   co m p ar ed   with   th e   co n tr o g r o u p   ( p <0 . 0 5 ) .   I m ea n s   t h at  th e   tr ea t m en t   o f   et h a n o e x tr ac o f   g r ee n   alg ae   f o r   2 8   d ay s   d id   n o af f ec th n u m b er   o f   leu k o cy te s .   T h s itu atio n   w h ic h   ch ar ac ter ized   b y   an   in cr ea s ed   n u m b er   o f   le u k o c y tes  ab o v n o r m a n u m b er   is   ca lled   leu ko s ita s .   I f   th is   i n c r ea s is   v er y   h i g h     ( u p   to   3 0 0 , 0 0 0   ce lls / m m 3 )   is   ca lled   leu k e m ia  w h ile   m o d er ate  d ec r ea s in   le u k o c y te s   is   ca lled     leu k o p en ia  [ 1 4 ] .     3 . 1 . 3 .   H e m o g lo bin   L ev el   T h r esu lt s   o f   t h a n al y s i s   o f   th n u m b er   o f   le u k o c y tes   a f te r   s ta tis tical  test ed   b y   o n e   w a y   A NOV s h o w ed   th at  d o s g r o u p   o f   1 0 0   m g /k g ,   d o s o f   2 0 0   m g /k g   a n d   4 0 0   m g / k g   h ad   s ig n i f ican d if f er e n ce   co m p ar ed   w i th   t h co n tr o g r o u p   ( p < 0 . 0 5 ) ,   w h ich   w a s   an   in cr ea s ed   in   v alu b lo o d   h e m o g lo b in   i n   r at.   Ho w e v er ,   th e   in cr ea s ed   i n   h e m o g lo b in   le v els  w er s til w it h i n   t h e   n o r m al   r an g ( 1 1 . 0   to   1 9 . 0   g / d L ) .   T h er ef o r it  ca n   b c o n clu d ed   th at  th et h an o ex tr ac o f   g r ee n   alg ae   d id   n o g i v ef f ec t o   ch an g e s   in   b lo o d   h e m o g lo b in   le v els .     3 . 2 .   B lo o H e m o s t a s is   P a ra m et er     He m o s ta s is   i s   t h m ec h a n is m   o f   th b o d y   to   p r ev en an d   s to p   th b leed in g .   O v er v ie w   o f   h e m o s tas i s   w er tes ted   in   t h i s   s t u d y   i n cl u d b leed in g   t i m e /B T ,   p r o th r o m b i n   ti m e/ P T ,   ac tiv ated   p ar tial  th r o m b o p last i n e   ti m e/ aP T T   an d   co u n t h n u m b er   o f   p latelets.  T h h e m ato lo g ical   p ar a m eter s   o f   h e m o s tati s   w er co llected   i n   T ab le  2 .   B leed in g   T im e   / B T   o r   b leed in g   ti m i s   an   e x a m i n atio n   to   d eter m i n t h f u n ctio n   o f   v aso co n s tr ictio n   o f   th b lo o d   v es s el s   in   th e v en o f   in j u r y .   I n s p ec tio n   p las m p r o th r o m b i n   ti m ( P r o th r o m b i n   T i m e/ P T )   i u s ed   to   test   co ag u latio n   f ac to r s   t h r o u g h   th e   e x tr in s ic  p at h w a y   a n d   alo n g   p ath s   t h at  co a g u la tio n   f ac to r s   VI I ,   X ,   V,   p r o th r o m b i n   a n d   f ib r i n o g e n .   A P T T   ex a m i n atio n   s er v e s   t o   test   t h i n tr in s ic  p at h w a y   o f   co ag u latio n   f ac to r s   an d   p ath w a y s   alo n g   w h ic h   t h e   co ag u latio n   f ac to r s   V,   VI I I ,   I X,   XI I ,   p r ek alik r en ,   k in in o g en ,   p r o th r o m b in ,   an d   f ib r in o g e n .   W h ile  t h n u m b er   o f   p latelet  co u n h as  f u n cti o n   to   ev al u ate  t h f u n ctio n   o f   p latelets  i n   o r d er   to   clo g   o f   s m all  h o les i n   b lo o d   v ess els.         T ab le   2 .   R esu lts   C alc u lated   H e m ato lo g ical  P ar a m ete r s   o f   H e m o s tas is   R at s   a f ter   E th a n o l E x tr a ct  o f   Gr ee n   A l g ae   w er g i v e n   f o r   2 8   D a y s   G r o u p   H e mo st a si s Para me t e r   B T   ( se c o n d )   ( n = 8 )   P T   ( se c o n d )   ( n = 8 )   a P T T   ( s e c o n d )   ( n = 8 )   N u mb e r   o f   T h r o mb o si ( 1 0 ^ 9 / L )   ( n = 8 )   C o n t r o l   6 4 3 . 8 7 5   ±   1 3 1 . 280   30 . 1 2 5   ±   2 . 416   48 . 0 0 0   ±   4 . 071   2 2 3 . 6 2 5   ±   9 2 . 3 2 5   1 0 0   mg / k g B B   7 5 6 . 8 7 5   ±   1 4 5 . 840   23 . 1 2 5   ±   1 . 8 0 8 *   39 . 8 7 5   ±   2 . 0 3 1 *   7 9 5 . 7 5 0   ±   2 4 2 . 9 5 9 *   2 0 0   mg / k g B B   5 8 7 . 8 7 5   ±   2 1 4 . 109   21 . 7 5 0   ±   8 . 1 3 7 *   64 . 2 5 0   ±   5 . 4 4 5 *   8 1 8 . 7 5 0   ±   2 0 6 . 2 5 9 *   4 0 0   mg / k g B B   6 8 6 . 5 0 0   ±   2 3 2 . 408   13 . 2 5 0   ±   1 . 2 8 2 *   40 . 6 2 5   ±   1 . 6 8 5 *   8 2 1 . 1 2 5   ±   3 2 0 . 9 8 3 *   No te:   *   Si g n if ica n tl y   d if f er e n t f r o m   th co n tr o l     v al u is   s m a ller   th a n   t h co n tr o l     v al u is   b i g er   th a n   th co n tr o l       T h r esu lts   o f   t h A N OV A   s t atis tical  te s s h o w ed   n o   s i g n if ican d i f f er e n ce   f o r   B T   ( p =0 . 3 3 7 > 0 . 0 5 ) .   T h is   is   d u to   d if f er e n ce s   i n   th v a s cu lar   i n te g r it y   o f   ea ch   r at  w er n o th s a m a n d   th h u m an   s k il ls   i n   co n d u cti n g   e x a m in a tio n s   ev e n   th o u g h   t h d is ta n ce   cu ts   alr ea d y   eq u a ted   in   5   m m   f r o m   th tip   o f   th tail.  T h p ar am eter s   o f   P T ,   aPT T   an d   p latele co u n w er s ig n i f ica n t   d if f er en ce s   b et w ee n   th e   tr ea t m en t   g r o u p   an d   t h co n tr o g r o u p   ( p = <0 . 0 5 ) .   PT  test   r es u lt s   s h o r ten   o n   th e   t r ea t m en g r o u p   co m p ar ed   to   th co n tr o g r o u p .   Sh o r ten i n g   o f   P T   w as   as s o ciat ed   w i th   m elato n i n   d o s e   g i v e n ,   th e   g r ea ter   th e   d o s g iv e n ,   th s h o r ten i n g   o f   th e   PT   is   also   g ettin g   b i g g er .   I w as  b ec au s th i n cr ea s ed   o f   f i b r in o g en ,   v o n   W illeb r an d   f ac t o r   in cr ea s ed ,   P A I - in cr ea s ed ,   an d   f ib r i n o l y s is   d ec r ea s ed .   T h test   em p lo y ed   aP T T   test   r esu lt s   h as  S h o r ten ed   at  d o s o f   1 0 0   m g /k g   an d   4 0 0   m g / k g ,   it  is   d u e   to   in cr ea s ed   f ib r in o g e n ,   v o n   W illeb r an d   f ac to r   in cr ea s ed ,   f i b r in o l y s i s   d ec r ea s ed .   Ho w e v e r ,   o n   ex a m in a t io n   o f   aPT T   at  d o s o f   2 0 0   m g / k g ,   t h aP T T   b ec o m len g t h w is e,   i ca u s ed   b y   en d o th e lial  d y s f u n ctio n   w h ich   w o u ld   d eg r ad th co ag u la tio n   f ac to r s   V,   VI I I ,   I X,   X,   XI ,   XI I ,   p r o th r o m b i n ,   f ib r in o g e n ,   p r ek a lik r en ,   k i n in o g en ,   w h ic h   i n cr ea s f ib r in o l y s is   ac tiv it y   a n d   d ec r ea s ed   th le v el s   o f   f ib r in o g e n   w h ic h   ar u s u all y   ca u s ed   b y   t h p r esen ce   o f   in h ib ito r s   an d   d ef icien c y   co ag u latio n   f ac to r   VI I I ,   I X ,   XI ,   XI I ,   p r o th r o m b i n ,   f ib r i n o g e n ,   p r ek alik r ea n ,   a n d   k i n in o g en .   T h ex a m i n atio n   r es u lt s   o f   c o u n t h n u m b er   o f   p latelet s   in   th h e m ato lo g y   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I J P HS   I SS N:  2252 - 8806       S u b ch r o n ic  To xicity  o f G r ee n   A lg a ( S p yro g yra   s p . )   E th a n o l ic  E xtra ct  o n   Hem a to lo g ic  . . . .   ( N in a   S a la ma h )   487   an al y ze r   to o s h o w ed   th s ig n if ica n d if f er en ce s ,   th n u m b e r   o f   p latelets  h av s ig n i f ica n tl y   in cr ea s ed   d u to   th ef f ec t o f   m elato n i n   w h ic h   is   also   co n s i s te n w it h   s t u d ies  th at  h a v b ee n   co n d u cted   [ 1 5 ] .       3 . 3 .   P a ra m et er s   B lo o d I mm u ni ty   I m m u n it y   r e f er s   to   th b o d y ' s   ab ilit y   to   r esis o r   eli m in a tes  t h ab n o r m al  ce lls   o r   f o r eig n   o b j ec ts   th at  h av p o ten tia to   d am a g e.   L e u k o c y tes  a n d   it  d er iv ativ e s   ( ly m p h o c y te s ,   m o n o c y tes,  eu s i n o f il,  a n d   n eu tr o p h i l   s eg m e n ts )   ca n   r e s is t s   an   i n v asio n   b y   p at h o g e n s   ( d is ea s e - ca u s i n g   m icr o o r g a n is m s ,   s u c h   as  b ac ter ia  an d   v ir u s es)  t h r o u g h   t h p r o ce s s   o f   p h a g o c y to s is ,   id en tify   a n d   d estro y s   ca n ce r   ce lls   th at  ap p e ar s   in   t h b o d y   an d   clea n i n g   th b o d y   w it h   d eb r is   f a g o c y   w h ic h   co m es  f r o m   t h d ea d   o r   in j u r ed   ce lls   [ 1 6 ] .   T h p ar am eter s   o f   i m m u n it y     w er ca lcu la ted   in   T ab le  3 .       T ab le  3 .   T h r esu lt o f   th P ar am eter s   C alcu lat io n   o n   I m m u n i t y   o f   R at  af ter   E t h an o l E x tr ac t   o f   Gr ee n   A l g a w a s   g i v e n   f o r   2 8   D ay s   G r o u p   D o sag e   ( mg / k g   bw )   X   ±   S D   ( g / d L )   N e u t r o p h i l   se g me n t   C o n t r o l   82 . 8 7 5   ±   3 . 441   1 0 0   78 . 1 2 5   ±   5 . 866   2 0 0   80 . 5 0 0   ±   7 . 309   4 0 0   76 . 1 2 5   ±   9 . 234   M o n o c y t e s   C o n t r o l   2 . 0 0 0   ±   0 . 7 5 6   1 0 0   1 . 0 0 0   ±   1 . 0 6 9   2 0 0   0 . 7 5 0   ±   1 . 0 3 5   4 0 0   1 . 2 5 0   ±   1 . 5 8 1   Eo si n o p h i l s   C o n t r o l   1 . 7 5 0   ±   2 . 1 8 7   1 0 0   1 . 7 5 0   ±   1 . 0 6 9   2 0 0   1 . 2 5 0   ±   1 . 0 3 5   4 0 0   1 . 5 0 0   ±   1 . 5 8 1   L y mp h o c y t e s   C o n t r o l   1 . 7 5 0   ±   2 . 1 8 7   1 0 0   1 . 7 5 0   ±   1 . 0 6 9   2 0 0   1 . 2 5 0   ±   1 . 0 3 5   4 0 0   1 . 5 0 0   ±   1 . 5 8 1   No te  :   * =p < 0. 0 5   ( h as si g n i f ican t l y   d i f f er en t to   th co n tr o l)         3 . 3 . 1 .   Nu m ber  o f   Neut ro p hil s   T h n u m b er   o f   a v er ag e   n e u tr o p h ils   s eg m e n i n   a ll  d o s g r o u p s   o f   et h a n o ex tr ac t   o f   g r ee n   alg ae   w a s   h ig h er   th a n   th e   co n tr o a n d   t h er ar n o   s i g n i f ica n tl y   d i f f er en ce s   th a m ea n   t h et h a n o e x t r ac o f   g r ee n   al g ae   d id   n o af f ec o n   t h n u m b er   o f   n e u tr o p h il  s e g m e n t s .   T h n o r m al   v al u o f   n eu tr o p h i ls   s e g m e n t   in   r at  is   1 8 . 0   to   3 5 [ 1 6 ]     3 . 3 . 2 .   Nu m ber  o f   L y m p h o cy t es   T h av er ag n u m b er   o f   l y m p h o c y te s   in   t h g r o u p   d o s o f   2 0 0   m g / k g   o f   et h a n o ex tr ac o f   g r ee n   alg ae   w as  h i g h er   co m p ar th co n tr o l,  it c au s e s   th e th a n o l e x t r ac t o f   g r ee n   al g ae   at  d o s o f   2 0 0   m g   k g   h as   ef f ec ted   o n   l y m p h o c y te  co u n t.   B u o v er all  th er ar n o   s ig n i f ica n d if f er en ce s ,   it  m ea n s   th eth an o ex tr ac o f   g r ee n   alg ae   d o es  n o af f ec to   th n u m b er   o f   l y m p h o c y tes.  A cc o r d in g   Sch a l m 's  Vete r in ar y   He m ato l o g y   [ 1 7 ]   th n o r m al   v a lu e   o f   l y m p h o c y tes   in   r at  i s   8 4 . 8 ± 8 . 3 %,  w h i le  th e   n u m b er   o f   l y m p h o c y te s   o f   n o r m al  r at  is     62 - 75%   [ 1 6 ] .     3 . 3 . 3 .   Nu m ber  o f   M o no c y t es   T h av er ag n u m b er   o f   m o n o c y tes   in   d o s g r o u p   o f   4 0 0   m g / k g   o f   et h a n o ex tr ac o f   g r ee n   al g ae   w a s   h i g h er   co m p ar th co n tr o l;  it  ca u s ed   th et h a n o ex tr a ct  co n tr o o f   g r ee n   al g ae   at  d o s o f   4 0 0   m g   k g   af f ec ted   o n   l y m p h o c y te  n u m b er .   I n   o v er all  th er w er n o   s i g n i f ica n d i f f er e n ce s ,   t h eth a n o ex tr ac o f   g r ee n   alg ae   d id   n o t a f f ec t t h n u m b e r   o f   m o n o c y te s .   T h n o r m al  v alu o f   m o n o c y tes is   0 - 6 %.     3 . 3 . 4 .   Nu m ber  o f   Eo s i no ph il s   T h av er ag e   n u m b er   o f   eo s in o p h ils   i n   all  d o s g r o u p s   o f   e th an o l   ex tr ac o f   g r ee n   al g ae   w a s   lo w er   co m p ar es  t h co n tr o an d   th er w er n o   s ig n i f ica n d if f er en ce s   in   th et h an o ex tr ac o f   g r ee n   alg ae   d id   n o af f ec t th n u m b er   o f   eo s i n o p h i ls .   T h n o r m al  v al u o f   eo s i n o p h ils   is   1 - 4%   [ 1 8 ] .         Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                      I SS N :   2 2 5 2 - 8806   I J P HS   Vo l.  5 ,   No .   4 Dec em b er   20 1 6 :   48 4     4 88   488     4.   CO NCLU SI O N   B ased   o n   h e m ato lo g ical   ex a m i n atio n   a n d   s tatis t ical  a n al y s is   o f   et h an o e x tr ac o f   g r ee n   al g ae   f o r     2 8   d ay s   h a s   in cr ea s ed   t h g en er al  h e m ato lo g ical  p ar a m e ter s   ( er y t h r o c y te s ,   leu k o c y te s ,   an d   h e m o g lo b in   co n ce n tr atio n ) ,   an d   m a y   a f f ec th e   f u n ctio n   o f   h e m o s ta s is   b y   ac ti v ati n g   t h co a g u lat io n   o f   e x tr i n s ic  a n d   t h e   in tr i n s ic  p ath w a y ,   b ased   o n   P T   p ar am eter s   a n d   aP T T .   Giv in g   E E GH  h a s   in cr ea s ed   th n u m b er   o f   p latelets b u t   h as  n o af f ec ted   to   B T ,   an d   h as  r o le  to   s tim u late  i m m u n e   ac tiv it y   b y   in cr ea s in g   t h e   n u m b er   o f   le u k o c y te s ,   esp ec iall y   n e u tr o p h ils   s eg m e n ts   i n   all  tr ea t m e n g r o u p s ,   th l y m p h o c y te s   i n   th g r o u p   o f   2 0 0   m g / k g ,   m o n o c y tes  i n   d o s g r o u p   o f   4 0 0   m g / k g .   T h in cr ea s in   t h n u m b er   o f   le u k o c y te s   is   ac tin g   as  an   e f f o r to   m ai n tai n   t h b o d y ' s   i m m u n e   s y s te m   w h e n   a   f o r eig n   s u b s ta n ce   p o s s ess ed .   T h er ef o r i ca n   b co n cl u d ed   th at   th eth a n o l e x tr ac t o f   g r ee n   al g ae   h a s   n o   h ar m f u l e f f ec t.       ACK NO WL E D G E M E NT S   T h is   r esear ch   p ap er   is   m ad p o s s ib le  th o u g h   th f u n d   s u p p o r f r o m   Mi n is tr y   o f   H ig h er   E d u ca tio n   R ep u b lic  o f   I n d o n e s ia .       RE F E R E NC E S   [1 ]   Ko lar  J .   a n d   M a c h a n c k o v a   I. ,   O c c u rre n c e   a n d   p o ss ib le  f u n c ti o n   o f   m e lan to n in   in   p lan ts ,”   En d o c y to b io sis  a n d   Ce l l   Res ,   v o l/ issu e :   1 4 (1 ) ,   p p .   75 - 84 2 0 0 1 .     [2 ]   T .   Kie f e r,   e a l. ,   M e lato n in   i n h ib it e stro g e n   re se p to tran sa c ti v a ti o n   a n d   c A M P   lev e ls  in   b re a st  c a n c e c e ll s,”  Bre a st Ca n c e r R e se a rc h   a n d   T re a tme n t ,   v o l /i ss u e 71 ( 1 ) ,   p p .   3 7 - 4 5 ,   2 0 0 2 .   [3 ]   V .   L e n o ir ,   e a l. ,   P re v e n ti f   a n d   c u ra ti v e   e ff e c o f   m e lato n in   o n   m a m m a r y   c a rc in o g e n e sis  in d u c e d   b y   d i m e th y lb e n z   ( a)   a n th ra c e n e   in   th e   f e m a le S p ra g u e - Da w le y   r a t,   Bre a st Ca n c e Res e a rc h ,   v o l /i ss u e 7 ( 10 ) ,   p p .   4 7 0 - 4 7 6 ,   2 0 0 5 .   [4 ]   E.  Oz a n ,   e a l. ,   Eff e c ts  o f   m e lato n in   a n d   v it a m in   o n   c ig a re tt e   s m o k e - in d u c e d   d a m a g e   in   th e   k id n e y ,   T o x ico In d   He a lt h ,   v o l /i ss u e 23 ( 8 ) ,   p p .   4 7 9 - 5 6 4 ,   2 0 0 7 .     [5 ]   A .   Ba y k a n ,   e a l . ,   T h e   P r o tec ti v e   E ff e c ts  o f   M e lato n in   o n   n ico ti n e - in d u c e d   m y o c a rd ial  in ju ry   i n   n e w b o rn   ra t s   w h o se   m o th e rs rec e iv e d   n ico ti n e ,   An a d o l u   K a rd iyo l   De rg ,   v o l /i ss u e 8 ( 4 ) ,   p p .   2 4 3 - 2 5 1 ,   2 0 0 8 .   [6 ]   Ko h   P O. ,   M e lato n i n   p re v e n ts   isc h e m ic  b ra in   in ju ry   th ro u g h   a c ti v a ti o n   o f   th e   M to r/p 7 0 S 6   k i n a se   sig n a li n g   p a th w a y ,   Ne u ro sc L e tt ,   v o l /i ss u e 14 ( 5 ) ,   p p .   1 3 4 - 1 3 9 ,   2 0 0 8 .     [7 ]   L in   A M. ,   e a l. ,   M e lato n i n   in h i b it a rse n it e - in d u c e d   p e ri p h e ra n e u ro to x icity ,   J   Pi n e a Res ,   v o l /i ss u e 18 ( 6 ) ,   p p .   34 - 5 1 ,   2 0 0 8 .   [8 ]   V a rv a re s M A. ,   M a n a g e m e n o f   Ora Ca v it y   Ca rc in o m a ,   M o   M e d ,   v o l /i ss u e 1 0 5 ( 3 ) ,   p p .   2 4 4 - 2 5 3 ,   2 0 0 8 .   [9 ]   X ia  C M. ,   e a l. ,   Ef f e c ts  o f   m e lato n in   o n   b lo o d   p re ss u re   in   stre ss - in d u c e d   h y p e rten sio n   in   ra ts,   Cli n   Ex p   Ph a rm a c o P h y sio l ,   v o l /i ss u e 32 ( 8 ) ,   p p .   1 6 2 - 1 6 9 ,   2 0 0 8 .   [1 0 ]   W irt z   P H. ,   e a l . ,   Ora M e lato n in   Re d u c e Blo o d   C o a g u latio n   A c ti v it y A   P lac e b o - C o n tr o ll e d   S tu d y   in   He a lt h y   Yo u n g   M e n ,   De p a rte me n o Cl i n ica Psy c h o lo g y   a n d   Psy c h o t h e ra p y   Un ive rs it y   o f   Z u ric h ,   2 0 0 8 .     [1 1 ]   I.   I.   P a sh a li e v a ,   e a l. S c re e n i n g   S tu d y   o f   M e lato n i n   Ef f e c ts  o n   Ba sic   In teg ra P a ra m e ters   o f   Blo o d   Co a g u lati o n   (P T ,   A P T T ,   TT ,   ECL T ),   Acta   P h y sio lo g ica v ol /i ss u e :   03 ( 6 8 6 ) ,   2 0 1 1 .   [1 2 ]   H.  No to p u r o ,   Ex a m in a ti o n   P T   d a n   A P T T   to   su p p o rt  t h e   Dia g n o sis  C li n i c ,   Co n fer e n c e   o f   F a a He mo st a sis   PA T EL KI ,   2 0 0 2 .   [1 3 ]   Ro sid a h ,   e a l . ,   T o x ico lo g y   e v a lu a ti o n   o f   sta n d a rd ize d   m e th a n o e x trac o f   Gy n u ra   p r o c u mb e n s ,   J o u r n a o f   Et h n o p h a rm a c o lo g y v o l.   1 2 3 ,   p p .   2 4 4 2 4 9 ,   2 0 0 9 .   [1 4 ]   S .   A .   P r ice   a n d   L .   M .   W il so n ,   P a to f isio lo g i,   t h e   c o n c e p o f   c li n ica l   d ise a se   p ro c e ss e s ,   EGC ,   v o l/ issu e :   1( 6 ) ,   2 0 0 6 .   [1 5 ]   S h e rw o o d   L . ,   P h y sio lo g y   f ro m   c e ll   to   sy ste m ,”   Ja k a rta E G C ,   pp.   6 0 1     6 0 6 2 0 0 1 .   [1 6 ]   B.   Ha rio n o ,   G u id e li n e f o c o ll e g e   p a th o lo g y   c li n ic ,   th e   p a th o lo g y   l a b   c li n ic,  th e   F a c u lt y   o f   V e terin a ry   M e d icin e ,   UG M ,   2 0 0 5 .   [1 7 ]   A .   V .   Ho f f b ra n d ,   e a l. ,   Ca p it a   s e lek ta h e m a to lo g y ,   4 th   E d ,   EG C,   2 0 0 5 .   [1 8 ]   X ia  C M. ,   e a l . ,   Ef f e c ts  o f   m e lato n in   o n   b lo o d   p re ss u re   in   stre ss - in d u c e d   h y p e rten sio n   in   ra ts,   Cli n   Ex p   Ph a rm a c o P h y sio l ,   v o l /i ss u e 32 ( 8 ) ,   p p .   1 6 2 - 1 6 9 ,   2 0 0 8 .   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.