I nte rna t io na l J o urna l o f   P u bli H ea lt h Science   ( I J P H S)   Vo l.   1 4 ,   No .   1 Ma r ch   20 2 5 ,   p p .   48 ~ 55   I SS N:  2 2 5 2 - 8 8 0 6 ,   DOI : 1 0 . 1 1 5 9 1 /ijp h s . v 13 i 3 . 2 3 9 1 2           48     J o ur na ho m ep a g e h ttp : // ijp h s . ia esco r e. co m   The ef fect iv en ess   o using  ID b ro th  in ident ifying     the  o ut er mem br a ne protein o Sa l m o nella  typhi       P esta ria t i Su ha riy a di   D e p a r t me n t   o f   M e d i c a l   La b o r a t o r y   Te c h n o l o g y ,   P o l y t e c h n i c   M i n i s t r y   o f   H e a l t h   S u r a b a y a ,   S u r a b a y a ,   I n d o n e s i a       Art icle  I nfo     AB S T RAC T   A r ticle  his to r y:   R ec eiv ed   Sep   1 2 ,   2 0 2 3   R ev is ed   J u l 1 1 ,   2 0 2 4   Acc ep ted   J u l 2 7 ,   2 0 2 4       Ty p h o i d   fe v e is  a n   i n fe c ti o n   t h a a ffe c ts  th e   d ig e sti v e   sy ste m .   It  sp re a d th ro u g h   c o n tam in a ted   fo o d   a n d   d rin k d u e   to   t h e   S a lmo n e ll a   b a c teria .   On e   wa y   to   d e v e lo p   imm u n it y   a g a i n st  S a lm o n e ll a   typ h i   is   b y   u si n g   o u ter  m e m b ra n e   p ro tein   (OM P ) wh ich   a c ti v a tes   th e   c e ll u lar  imm u n e   sy ste m .   Th is  re se a rc h   a im e d   to   d e term in e   th e   e ffe c ti v e n e ss   o u sin g   ID  Br o th   t o   id e n t ify   OMP   S a lmo n e ll a   typ h i .   T h e   st u d y   wa c o n d u c ted   e x p e rime n t a ll y   a t h e   In stit u te  o Tro p ica Dise a se   fro m   Ap ril   2 0 2 3   t o   M a y   2 0 2 3 .   F o r   th e   stu d y ,   we   o b tain e d   th re e   sa m p les   o f   S a l mo n e ll a   typ h i   iso late d   fro m   Eas Ja v a ,   a n d   e a c h   s a m p le  wa re p li c a ted   th re e   ti m e s.  We  iso late d   th e   b a c teria   a n d   e x trac ted   th e   OM P   t o   m e a su re   i ts  lev e ls  a n d   p e rf o rm   e lec tro p h o re sis  with   S DS - P AG E.   S o d iu m   d o d e c y l   s u lfate - p o l y a c ry lam id e   g e e lec tr o p h o re sis  (S DS - P AG E)  is  a   sta n d a rd   p r o tein   a n a ly sis   m e th o d .   To   a d d re ss   sa m p le   lo a d i n g   c h a ll e n g e s d u e   to   sta c k i n g   g e tran sp a re n c y ,   a n   a c id ic d y e   wa s a d d e d   to   imp ro v e   v isi b il it y   wit h o u a ffe c ti n g   g e p e rfo rm a n c e In   t h is stu d y   n u tri e n t   a g a fro m   M a c Co n k e y   m e d iu m   a n d   ID   b r o t h   we re   u se d   a s   v a ri a b les .   We   c u lt u re d   S a lmo n e ll a   typ h i   a n d   e x trac ted   OM P   u sin g   t h e   s o n ica ti o n   tec h n iq u e .   We  m e a su re d   p ro tein   lev e ls  th r o u g h   th e   n a n o d r o p   m e th o d .   S a lmo n e ll a   typ h i   fro m   ID  b r o th   p r o d u c e d   h i g h e p ro tei n   lev e ls  th a n   S a lmo n e ll a   typ h i   c u lt u re d   fro m   M a c Co n k e y   M e d iu m .   It   a ffe c ted   th e   id e n ti fica ti o n   o f   OMP   u si n g   S DS - P AG E.   Lo we p r o tein   lev e ls  lea d   t o   fe we p ro tei n   m o lec u les   in   th e   sa m e   b a n d   z o n e ,   c a u si n g   re d u c e d   v isi b il it y   a n d   re a d a b il it y   o th e   p r o tein   b a n d s.  Th e   ID  b ro t h   sta b il ize th e   b a c teria ' s   c o n d i ti o n   b e f o re   b e in g   g ro w n   o n   n u tri e n a g a m e d ia .   K ey w o r d s :   I b r o th   Ma cCo n k ey   m ed i u m   OM P   S a lmo n ella   typ h i   SDS - PAGE   T h is i a n   o p e n   a c c e ss   a rticle   u n d e r th e   CC B Y - SA   li c e n se .     C o r r e s p o nd ing   A uth o r :   Su h ar iy ad i   Dep ar tm en t o f   Me d ical  L ab o r ato r y   T ec h n o lo g y ,   Po ly tec h n i Min is tr y   o f   Hea lth   Su r a b ay a   Su r ab ay a,   I n d o n esia     E m ail s u h ar iy ad i@ p o ltek k es d ep k es - s b y . ac . i d       1.   I NT RO D UCT I O N   T y p h o i d   f e v er   is   d i g esti v in f ec tio n   ca u s ed   b y   t h Salm o n ella  b ac ter ia.   T h e   wo r d   "ty p h o id "   is   d er iv ed   f r o m   th Gr ee k   wo r d   "ty p h o s , wh ich   m ea n s   f o g .   T h is   is   b ec au s p eo p le  af f ec t ed   b y   th is   d is ea s e   o f ten   ex p e r ien ce   im p air e d   co n s cio u s n ess ,   r an g in g   f r o m   m ild   to   s ev er e.   I n   2 0 1 9 ,   an   esti m ated   9   m illi o n   ca s es   o f   ty p h o id   f ev er   r esu lted   in   ap p r o x im ately   1 1 0 , 0 0 0   d ea th s .   T h is   s er io u s   an d   p o ten tially   life - th r ea ten in g   in f ec tio n   is   ca u s ed   b y   t h e   b ac ter iu m   Salm o n ella  T y p h i,  ty p ically   tr an s m itted   t h r o u g h   c o n s u m in g   co n tam in ated   f o o d   o r   wate r .   On ce   in   t h b o d y ,   th e   b ac ter ia   m u ltip ly   an d   s p r ea d   in to   th b lo o d s tr ea m ,   lead in g   to   s ev er s y m p to m s   an d   c o m p licatio n s   [ 1 ] ,   [ 2 ] .   Salm o n ella  b ac ter ia   p r o d u ce   en d o to x in s ,   wh ic h   ar e   co m p lex es  o f   lip o p o l y s ac ch ar id es.  E n d o t o x in s   in d u ce   f ev er   an d   i n f lam m atio n ,   ca u s in g   ty p h o i d   f ev er .   Ad d itio n ally ,   th ey   ca n   s tim u late  m ac r o p h ag an d   leu k o c y te  ce lls   in   in f lam ed   tis s u es   to   p r o d u ce   cy to k in es ,   wh ich   ar m ed iato r s   o f   th e   o n s et  o f   f ev er   a n d   p r o in f lam m at o r y   s y m p t o m s   [ 3 ] ,   [ 4 ] .   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci     I SS N:   2252 - 8 8 0 6         Th effec tiven ess   o f u s in g   I b r o th   in   id en tifyin g   th o u ter me mb r a n p r o tein     ( P esta r ia ti )   49   S a lmo n ella   typ h i   is   g r am - n eg ativ e,   n o n - s p o r e ,   m o tile,  ca p s u lated ,   an d   f lag ellated   r o d   b ac ter iu m .   T h ese  b ac ter ia  ca n   liv e   at  p 6 - 8   at   tem p er at u r es  o f   1 5 - 41   º C   ( o p tim al  tem p e r atu r e   3 7   º C ) .   T h r o u g h   b o ilin g   an d   p asteu r izatio n ,   as  well  as  ch lo r in atio n ,   Salm o n ella   ca n   d ie  f o r   o n h o u r   at   5 4 . 4   º C   an d   f o r   1 5 - 2 0   m in u tes  at  6 0   º C .   So m e   an tig en s   f o u n d   in   S a lmo n ella   typ h i   in clu d a n tig en   ( s o m atic) ,   an tig en   ( f la g ellar ) ,   Vi  an tig en ,   an d   o u ter   m em b r an e   p r o tein   ( OM P)  an tig en .   S a l mo n ella   typ h i   ca n   ca u s h em o ly s is   o n   b lo o d   ag ar   p late   ( B AP)   m ed ia.   Ho wev er ,   it  is   non - lacto s f er m e n ter   ( NL F)  an d   ca n n o t   f er m e n lac to s e.   On   th o th er   h an d ,   f e r m en tatio n   o cc u r s   in   g lu co s e,   m an n ito l,   an d   m alto s m ed ia  with o u th f o r m atio n   o f   ac id   an d   g as.   T h b ac ter ial  c o n f ir m atio n   t est  r elies   o n   th I MV iC   T est,  wh ich   is   es s en tial  f o r   ef f ec tiv ely   d if f er en tiatin g   Gr am - n eg ativ e   r o d s ,   esp ec ially   with in   th e   E n ter o b ac ter ia ce ae   f am ily .   W h en   s u b jecte d   to   I MV iC   ass ay s   ( i n d o le,   M eth y R ed ,   Vo g es - Pro s k au er ,   an d   citr ate) ,   S a lmo n ella   typ h i   y ield s   n eg ativ i n d o le,   p o s itiv MR,  n eg ativ VP,  an d   m o s t lik ely   p o s itiv citr ate  r esu lts .   T h ese   b ac ter ia  d o   n o t h y d r o ly ze   u r ea   an d   d o   n o t p r o d u ce   H 2 S.  Mic r o s co p ic  S a lmo n ella   typ h i   o n   m ed ia  ap p ea r s   co n v e x ,   s lip p er y ,   an d   clea r   [ 5 ] ,   [ 6 ] .   OM an tig en s   ar lo ca ted   o n   th s u r f ac o f   g r am - n eg ativ b ac ter ia.   T h ey   a r k n o wn   to   b g o o d   at   in d u cin g   im m u n ity   ag ai n s S a lmo n ella   typ h i   b y   ac tiv atin g   th ce llu lar   im m u n s y s tem .   R esear ch er s   ar e   s tu d y in g   OM as  p o ten tial  v ac cin ca n d id ate  ag ain s ty p h o id   f e v er .   T h p ath o g en icit y   o f   S a lmo n ella   in   in d u cin g   d iar r h ea   is   co m p le x   p h en o m en o n   th at  in v o lv es  s ev er al  m ec h an is m s ,   in clu d in g   th p r o d u ctio n   o f   en ter o to x in   [ 7 ] Stu d ies  h av s h o wn   th at   v ac cin es  b ased   o n   OM ar e f f ec tiv i n   in d u cin g   p r o tectiv e   an tib o d ies  ag ain s ty p h o id ,   m ak in g   OM f r o m   S a lmo n ella   p o ten tial  ca n d id ate  f o r   p r o tectio n .   Ho wev er ,   v ac cin es  b ased   o n   p o ly s ac ch a r id es  an d   a n tig en s   m a y   n o b ef f ec ti v an d   ca n   e v en   in cr ea s s u s ce p tib ilit y   to   ex tr ac ellu lar   S a lmo n ella   g r o wth ,   wh ich   ca n   b d an g e r o u s .   I n   r ec en y ea r s ,   r esear ch e r s   h av co n d u cted   ex ten s iv s tu d ies  o n   th m o lecu lar   s tr u ctu r an d   f u n ctio n   o f   OM f r o m   S a lmo n ella   as  p o ten tial  v ac cin e   ca n d id ate,   v ir u len ce   f ac to r ,   a n d   d ia g n o s tic  an tig e n .   Desp it th is ,   o n ly   lim ited   n u m b er   o f   OM Ps   h av b ee n   f u lly   ch ar ac ter ize d   s o   f ar   [ 8 ] .   SDS - PAGE ,   wh ich   s tan d s   f o r   s o d iu m   d o d ec y s u lf ate - p o ly ac r y lam id e   g el  elec tr o p h o r esis ,   is   a   tech n iq u u s ed   to   s ep ar ate  p r o tein s   b ased   o n   th ei r   m o lec u lar   weig h t.   T h is   m eth o d   u ti lizes  th ab ilit y   o f   p r o tein s   to   m ig r ate  to war d s   an   elec tr o d e   in   th e   p o l y ac r y l am id g el  b ased   o n   th eir   s iz u n d e r   an   elec tr ic  cu r r en t   [ 9 ] ,   [ 1 0 ] Pro tein s   a r s ep ar ated   b y   p ass in g   th r o u g h   g el  m atr i x   m ad o f   ac r y lam id d u r in g   elec tr o p h o r esis .   T h is   s ep ar atio n   r elies  o n   th m o lecu lar   m as s   o f   th p r o tein s ,   with   s m aller   m o lecu les  m o v in g   t h r o u g h   t h e   g e l   f a s t e r   t h a n   l a r g e r   m o l e c u l e s .   E l e c t r o p h o r e s i s   i s   a   h i g h l y   s e n s i t i v e   t e c h n i q u e   t h a t   d o e s   n o t   a l t e r   t h e   s t r u c t u r e   o f   p r o t e i n s ,   e v e n   w i t h   s l i g h t   v a r i a n c e s   i n   c h a r g e   a n d   m o l e c u l a r   w e i g h t   a f f e c t i n g   t h e i r   m o v e m e n t   [ 1 1 ] .   Gr o wth   m ed ia  is   s u b s tan ce   th at  co n tain s   n u tr ien ts   ess en tial f o r   th g r o wth   o f   m icr o o r g an i s m s .   T h i s   m ed iu m   ca n   b u s ed   f o r   is o latin g ,   id en tif y in g ,   a n d   cr e atin g   p u r e   cu ltu r es  o f   m icr o o r g a n is m s ,   wh o s n u tr itio n al  r eq u ir em en ts   v ar y   d ep en d i n g   o n   th ty p e.   Gen er ally ,   th ey   r eq u ir m ac r o n u tr ie n ts ,   m icr o n u tr ien ts ,   v itam in s ,   an d   m in er als  to   th r iv e.   Ma cr o n u tr ie n ts   s u ch   as  ca r b o n ,   h y d r o g e n ,   an d   n itr o g e n   ar n ec ess ar y   in   lar g er   q u an titi es,  wh ile  m icr o n u tr ien ts   ar e   r eq u ir ed   in   s m aller   am o u n ts   an d   c o n tr ib u te  to   e n zy m f u n ctio n   a n d   p r o tein   s tr u ctu r e.   Mic r o n u tr ie n ts   ar ca teg o r ize d   in to   t r ac elem en ts   an d   g r o wth   f ac t o r s ,   with   tr ac elem en ts   s er v in g   as  en zy m co f ac to r s ,   in clu d in g   ir o n ,   m an g a n ese,   an d   zin c C u ltu r m ed ia  is   m at er ial  co n s is tin g   o f   a   m ix tu r o f   n u tr ien ts   u s ed   f o r   cu ltu r es  o f   m icr o o r g an is m .   T h cr ea tio n   o f   cu ltu r m ed ia   aim s   to   p r o v id b alan ce   o f   n u tr ien m ix tu r es   n ee d ed   b y   m icr o o r g an is m s   b y   p r o v id i n g   an   ar tific ial  en v ir o n m en as  a   s im u latio n   o f   n atu r al  co n d itio n s   th at  ar im p o r tan t f o r   g r o w th .   Mic r o o r g an is m s   ar r an g t h eir   ce ll  co m p o n e n ts   b y   ass em b lin g   s m all  m o lec u les  u tili zin g   n u tr ien ts   in   th e   g r o wth   m ed i u m .   Dif f er en t   m icr o o r g a n is m s   r eq u ir e   d if f er en t n u tr itio n al  m ate r ials .   T h er ef o r e,   th e r ar c u ltu r m ed ia  in   v ar y in g   s h a p es  an d   c o m p o s itio n s   ad ap ted   to   th ty p o f   m icr o o r g an is m s   b ein g   cu ltu r ed   [ 1 2 ] ,   [ 1 3 ] .   Ma cCo n k ey   m ed iu m   is   s elec tiv an d   d if f er en tial  m ed i u m   f o r   th g r o wth   o f   g r am - n e g ativ b ac ter ia   b ased   o n   th e   b ac ter ia' s   ab ilit y   to   b r ea k   d o w n   lacto s e.   T h e   m ain   co m p o n e n ts   o f   Ma cCo n k ey   m e d iu m   in clu d e   cr y s tal  v io let  d y es,  b ile  s alts ,   l ac to s e,   an d   n eu tr al  r ed   ( p in d icato r ) .   C r y s tal  v io let  d y es a n d   b ile  s alts   s to p   th e   g r o wth   o f   g r am - p o s itiv b ac t er ia.   Ma cCo n k ey   m ed iu m   co n tain s   p in d icato r   th at   tu r n s   p in k   u n d e r   ac id ic   co n d itio n s .   B ac ter ia  th at  ca n   f er m en lacto s will  p r o d u ce   o r g an ic  ac id s ,   esp ec ially   lacti ac id ,   wh ich   ca n   lo wer   p H.   T h p r esen ce   o f   n e u tr al  r ed   as  p in d icato r   wi ll  ch an g e   f r o m   f a d ed   w h ite  to   b r ig h r ed   o r   p in k   wh en   th e   p H   is   less   th an   6 . 8 .   T h u s ,   p i n k   co lo n ies  will  f o r m   o n   lacto s f e r m en ter   b ac ter ia ,   wh ile  n o n - lacto s e   f er m en ter s   will f o r m   o p aq u wh ite  co lo n ies Path o g en ic  b ac ter ia,   esp ec ially   b ac ter ia  th at  ca u s g astro en ter itis   s u ch   as  E s ch erich ia   an d   S a lmo n ella ,   ar wid el y   d is tin g u is h e d   u s in g   th is   m ed i u m   [ 1 4 ] .   Nu t r i en a g a r   is   o n e   o f   t h c o m p le x   m ed ia .   P er   l ite r ,   a g a r   n u t r ie n ts   co n t ai n   b ee f   e x t r ac ( 3   g ) ,   p ep to n (5   g ) ,   s o d i u m   ch lo r i d e   ( 5   g ) ,   a n d   a g a r   ( 1 5   g ) .   T h e   m ai n   c o m p o n en ts   o f   n u tr i e n t   a g a r   m e d i ar e   c ar b o h y d r at es  an d   p r o t ei n s   f o u n d   i n   m e at   e x t r a cts   a n d   p ep to n es.   T h ese   n u t r ien ts   p r o v i d e   a   s o u r ce   o f   n i tr o g e n   a n d   c ar b o n ,   as   well   as   v ita m i n s   t o   a id   in   b ac ter ial   g r o wt h   [ 1 5 ] .   T h e   n u tr i e n t   c o m p o s iti o n   o f   a g ar   an d   n u t r ie n t   b r o t h   ca n   b e   r e p l ac e d   wit h   al te r n at iv in g r e d ie n ts   w it h   s i m il a r   n u t r iti o n a co n t en t t o   s u p p o r b a ct er i al   g r o wt h   [ 1 6 ] .   T h e   S a lmo n ella   typ h i   is o late  t o   b id en tifie d   n ee d s   to   b is o lated   an d   en r ich ed   to   o b tain   a p p r o p r iate   r esu lts .   T h en r ich m en p h ase  o f   S a lmo n ell a   typ h i   u s es  n o n - s elec tiv m ed ia  to   h elp   r ep air   d am ag ed   b ac te r ial   ce lls ,   d is s o lv in h ib ito r y   s u b s tan ce s ,   an d   p r o v i d ad eq u ate  n u tr itio n .   T o   d etec Salm o n ella ,   s p ec if ic  cu ltu r Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                      I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 0 6   I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci Vo l.  13 ,   No .   3 Sep tem b er   20 24 :   48 - 55   50   p r o ce s s   is   n ec ess ar y   th at  in v o lv es  u s in g   o p tim al  m e d iu m   f o r m u latio n s   to   r e v iv th b ac te r ia  wh ile  r ed u cin g   th p r esen ce   o f   co m p etin g   b a cter ia.   Nu tr ien a g ar   is   an   e x a m p le  o f   a   n o n - s elec tiv en r ic h m en m et h o d   u s ed   f o r   is o latin g   S a lmo n ella   [ 1 7 ] .   I b r o th   is   b r o th   u s ed   as  m an u f ac tu r er   o f   b ac te r ial  in o cu lu m   f o r   au to m atic  an tib io tic  s u s ce p tib ilit y   test in g   with   th Ph o en ix   s y s tem .   Po s itiv cu ltu r es  o f   g r o win g   b ac ter ia  n e ed   to   b test ed   f o r   an tim icr o b ial  s u s ce p tib ilit y   test in g   ( AST )   r esis tan ce .   AST  is   cr itica p r o ce s s   in   cl in ical  m icr o b io lo g y   to   ev alu ate  an tib io tic  ef f ec tiv en e s s .   I t id en tifie s   wh en   b ac ter ia  b ec o m less   s u s ce p tib le  o r   r esis tan t to   an tib io tics ,   r ed u cin g   th eir   a b ilit y   to   elim in ate  b ac ter ia  o r   in h ib it  th eir   g r o wth   [ 1 8 ] Ph o en i x ' s   au to m atic  AST  r es is tan c e   test   was  p er f o r m ed   b y   m ak in g   an   i n o cu lu m   s u s p en s io n   o n   th I b r o th   i n   th a m o u n o f   0 . 5 - 0 . 6   Mc Far lan d .   T h b ac ter ial  s u s p e n s io n   f r o m   I B r o th   is   tr an s f er r e d   to   AST  b r o th   a n d   co n tin u ed   wit h   au to m ate d   test in g   [ 1 9 ] .   T h in o cu lu m   s u s p en s io n   o n   I B r o th   ca n   b u s ed   as a n   ad v a n ce d   test in g   m ater ial.   I n   th is   s tu d y ,   test in g   will  b ca r r ied   o u o n   t h ef f e ctiv en ess   o f   en r ich m en o f   S a l mo n ella   typ h i   b ac ter ia  f r o m   I b r o th   o n   n u tr ien t   a g ar   m ed ia  to   id en tify   OM P a n tig en s .       2.   M E T H O D   I n   th is   s tu d y ,   we  u s ed   S a lmo n ella   typ h i   wh ich   was  is o lated   an d   id en tifie d   f r o m   s u s p ec ted   ty p h o i d   f ev er   p atien ts   in   E ast  J av in   2 0 2 2   d u r i n g   p r ev io u s   r esear ch .   T h ex p er im en tal  r esear ch   w as  co n d u cted   at  th Dep ar tm en o f   Me d ical  L ab o r ato r y   T ec h n o lo g y ,   Po ly tech n i Min is tr y   o f   Hea lth   Su r ab ay a,   an d   th I n s titu te   o f   T r o p ical  Dis ea s f r o m   Ap r i l 2 0 2 3   to   Ma y   2 0 2 3 ,   u s in g   th r ee   s am p les o f   S a lmo n ella   typ h i   is o lates f r o m   E ast   J av with   th r ee   r ep licatio n s .   T h is   s tu d y   was  ap p r o v ed   b y   th Hea lth   R esear ch   E th ics  C o m m ittee  at  Po ly tech n ic  Min is tr y   o f   Hea lth   Su r ab ay with   ce r tific atio n   n u m b er   No . E A/1 6 0 0 /KE PK - Po ltek k es_ Sb y /V/2 0 2 3   d ated   11 /0 4 /2 0 2 3 .     2 . 1 .     M a k ing   cult ure  m edia   Me d ia   p r o d u c ti o n   o c c u r s   in   t h e   B a ct er i o l o g y   L ab o r a to r y   o f   t h e   D e p a r tm e n t   o f   Me d ic al   L a b o r at o r y   T ec h n o l o g y   at  th P o l y t ec h n i Mi n is tr y   o f   H ea l th   i n   S u r a b a y a .   I n   t h is   r esea r ch ,   w u t iliz ed   Ma cCo n k e y   m e d i u m   C M0 1 1 5   ( OXO I D )   an d   n u t r ie n a g a r   C M 0 0 0 3   ( OXOI D) .   T h m e d ia   is   p r e p ar ed   f o ll o w in g   th OXOI p r o ce d u r es.   T o   c r e at Ma cC o n k e y   m e d i u m   C M 0 1 1 5   ( OXO I D )   m ed ia ,   4 9 . 5 3   g r a m s   o f   m e d i a   p o w d e r ,   co n s is ti n g   o f   p ep t o n ( 1 7   g ) ,   p r o te o s e   p e p t o n ( 3   g ) ,   l ac t o s e   m o n o h y d r ate  ( 1 0   g ) ,   b ile   s al ts   ( 1 . 5   g ) ,   s o d i u m   c h l o r id ( 5   g ) ,   n e u t r a r e d   ( 3 0   m g ) ,   c r y s tal   v i o le ( 1   m g ) ,   a n d   ag ar   ( 1 3 . 5   g ) ,   is   d is s o l v e d   i n   o n e   li te r   o f   a q u a d est .   T h e   m e d ia   s h o u l d   b d is s o l v e d   w h i le  s ti r r in g   a 8 0   º C .   A f t er   d is s o lv in g ,   ch ec k   t h e   p a n d   ad ju s it   t o   t h f i n al  p o f   N A   m e d ia ,   w h ic h   is   7 . 1 ± 0 . 2 .   Fi n al ly ,   w r a p   t h e   m e d ia   a n d   s te r il iz u s i n g   1 2 1   º C   a u t o cla v e   f o r   1 5   m i n u tes .   T o   c r e at n u t r ie n t   ag ar   C M 0 0 0 3   ( OX OI D )   m e d ia ,   2 8   g r am s   o f   m e d ia   p o w d e r ,   c o n s is t in g   o f   p e p t o n e   ( 5   g ) ,   y ea s t   e x tr ac t   ( 2   g ) ,   s o d i u m   c h l o r i d e   ( 5   g ) ,   b e ef   e x t r ac t   ( 1   g ) ,   a n d   a g a r   ( 1 5   g ) ,   is   d is s o l v e d   i n   o n e   li te r   o f   aq u a d est.   T h e   m e d ia   s h o u l d   b e   d is s o l v e d   w h il e   s ti r r i n g   at   8 0   º C .   A f t er   d is s o l v i n g ,   ch ec k   t h e   p H   a n d   a d j u s t   i t   t o   th e   f i n a l   p H   o f   NA   m e d i a,   wh i ch   is   7 . 4 ± 0 . 2 .   Fi n al ly ,   w r a p   t h m e d i a   a n d   s te r i liz e   u s in g   a   1 2 1   º C   a u t o c la v e   f o r   1 5   m i n u tes .     2 . 2 .     Sa lm o nella   typ hi   is o la t io n   Fo r   th is   s tu d y ,   two   ty p es  o f   m ed ia  -   Ma cCo n k ey   m ed iu m   an d   I B r o th   -   wer u s ed   to   in o cu late  S a lmo n ella   typ h i   b ac ter ia.   T h b ac ter ia  wer g r o wn   o n   Ma cCo n k ey   m ed iu m   u s in g   th s t r ea k   tech n iq u an d   in cu b ated   at  3 7   º C   f o r   2 4   h o u r s .   I n   I B r o th ,   th b ac te r ia  wer in o cu lated   t o   lev el  o f   0 . 5 - 0 . 6   Mc Far lan d .   Af ter   g r o wth ,   S a lmo n ella   typ h i   f r o m   ea ch   v a r iab le  was  al s o   g r o wn   o n   Nu tr ien t   Ag ar   a s   s u p p lem en ta r y   m ed iu m .   T o   o b tain   p u r cu l tu r o f   th b ac ter ia  f o r   f u r th e r   test in g ,   th s am p les  wer s t r ea k ed   o n   N u tr ien Ag ar   an d   t h en   in c u b ated   at  3 7 º C   f o r   2 4   h o u r s   [ 2 0 ] .     2 . 3 .     O M P   Sa lm o nella   typ hi   e x t ra ct io n   S a lmo n ella   typ h i   is o late   f r o m   n u tr ien ag a r   m ed ia  was  s u s p en d ed   at  1 0   m L   1 0   m m o T r i s   HC p H   8 . 8   o n   1 5   cc   v alco n   tu b e .   O MP  ex tr ac tio n   of   S a lmo n ella   t yp h i   u s ed   s o n icatio n   tech n iq u with   a   f r e q u en c y   o f   3 5   k Hz  f o r   3 0   s ec o n d s   an d   r ep ea ted   f o r   1 5   c y cles  with   g ap   o f   3 0   s ec o n d s .   T h s o n i ca ted   is o lates  wer th en   ce n tr if u g ed   at  4   º C   to   1 5 , 0 0 0   r p m   f o r   3 0   m i n .   T h s u p er n atan ts   wer e   s ep ar ated ,   a n d   th e   p ellets  wer r esu s p en d ed   with   1 0   m L   PB an d   2 tr ito n - an d   in c u b ate d   at  3 7   º C   f o r   2 0   m in .   C en tr if u g es  r etu r n   is o lates  at  4   º C   to   1 5 , 0 0 0   r p m   f o r   3 0   m in u tes.  T h p ellets  wer r es u s p en d ed   with   5 0 0   μ L   PB S.  Sto r at - 20   º C   u n til  r ea d y   to   u s e.         Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci     I SS N:   2252 - 8 8 0 6         Th effec tiven ess   o f u s in g   I b r o th   in   id en tifyin g   th o u ter me mb r a n p r o tein     ( P esta r ia ti )   51   2 . 4 .     P r o t ein c o nte nt  ca lcula t io n   Pro tein   lev els  wer e   m ea s u r e d   u s in g   th er m o   s cien tific   n an o d r o p   at  a   wav elen g th   o f   2 8 0   n m   [ 2 1 ] SDS - PAGE   T o   ex tr ac th S a lmo n ella   typ h i   OM an tig en ,   we  u s ed   SDS - P AGE   with   a   1 2 s ep ar atin g   g el  co n ce n tr atio n   an d   a   4 s tack in g   g el.   W m ix e d   th e   cr u d s am p les  an d   lo a d in g   b u f f er s   i n   m icr o ce n tr if u g e   tu b es  at  r atio   o f   2 :1   a n d   h o m o g en ized   th em   u s in g   s p in   d o wn .   Nex t,   we  h ea te d   th e   s am p le  f o r   5   m in u tes  b etwe en   9 0   ºC - 95   º C .   W p r e p ar ed   t h g el  in   ch a m b er   with   r u n n i n g   b u f f er   a n d   f illed   th av ailab le  wells   with   2 0   μ L   o f   p r ep a r ed   s am p les.  W al s o   f illed   o n well  with   1 0   μ L   o f   p r o tein   m ar k er s .   W r an   elec tr o p h o r esis   at  1 0 0   4 0   m f o r   9 0   m in u tes,  u n til  th s am p le  alm o s r ea ch ed   th g el  b o tto m .   Fin ally ,   we  s tain ed   th g el  u s in g   c o o m ass ie  b r illi an t b lu e   R - 2 5 0   ( B io - R ad ) .       3.   RE SU L T S AN D I SCU SS I O N   Ma cCo n k ey   m ed iu m   is   ty p o f   b ac ter ial  g r o wth   m ed iu m   th at  is   b o th   s elec tiv an d   d if f er en tial ,   m ea n in g   it  is   u s ed   to   id en tify   an d   is o late  g r am - n eg ativ e   b ac ter ia.   T h is   m ed ia  h as  c o m p o s itio n   o f   b ile  s alts   as  in h ib ito r s   o f   g r a m - p o s iti v b ac ter ia,   n e u tr al  r ed   d y e   as  an   in d icato r   o f   p H,   lac to s e,   an d   p ep t o n e S a lmo n ella   typ h i   ap p ea r s   as  w h ite  co lo n ies  t h at  d o   n o ca u s an y   ch an g es  to   th p in   th e   ab s en ce   o f   lacto s f er m en tatio n .   Ma cCo n k e y   is   a   co m m o n ly   u s ed   g r o wth   m e d i u m   th at   s elec tiv ely   p r o m o tes   th g r o wth   o f   g r am - n eg ativ b ac ter ia  a n d   d is tin g u is h es  th em   b ased   o n   th eir   f e r m en tatio n   p r o f ile.   T h is   m ed i is   wid ely   u s ed   to   d if f er en tiate  p at h o g e n ic  b ac ter ia,   esp ec ially   in   s p ec ies th at  ca u s g astro en ter itis   [ 1 4 ] ,   [ 2 2 ] .   I B r o th   ( B Ph o en ix   I B r o th )   is   s o lu tio n   u s ed   to   cr ea te  b ac ter ial  s u s p en s io n s   f o r   u s in   Ph o en ix ' s   au to m ated   s u s ce p tib ilit y   id en tific atio n   an d   test in g   s y s tem .   I co n tain s   p o tass iu m   ch lo r id e,   ca lciu m   ch lo r id e,   tr icin g l y cin e,   an d   p o ly s o r b ate  8 0   in   o n e - liter   s o lu tio n .   T h am o u n o f   b ac t er ial  s u s p en s io n   is   d eter m in ed   u s in g   Mc Far lan d   s tan d ar d s .   Gly cin is   o n o f   th ess en tial  am in o   ac id s   an d   is   s o u r ce   o f   co n d en s ed   n itro g en   [ 2 3 ] T r is - tr icin h as  b ee n   f o u n d   to   b a   s u p er io r   b u f f e r   f o r   s ep ar ati n g   s er u m   p r o tein s   an d   is   co m m o n ly   u s ed   in   co n ju n ct io n   with   g ly cin e   to   s tab ilize  p H.   I B r o th   co n tain s   n o o n ly   tr icin an d   g ly cin e,   b u also   p o ly s o r b ate  8 0 .   T r i cin is   r ec o m m en d ed   m et h o d   f o r   co n tr o llin g   p H,   as  it  clo s ely   r esem b les   p h y s io lo g ical  s o lu tio n s   [ 2 4 ] ,   [ 2 5 ] .   T h er ap eu tic  p r o tein   f o r m u latio n s   u s Po ly s o r b ate  8 0   as  s u r f ac tan to   p r ev en ad s o r p tio n   an d   p r o m o te  p r o tein   ag g r eg atio n   [ 2 6 ] .   Po ly s o r b ate  im p ac ts   S a lmo n ella   typ h i   b y   s tab ilizin g   b ac ter ial  ce lls   an d   r ed u cin g   th eir   clu m p in g ,   wh ich   ca n   in ter f e r with   m ea s u r in g   p r o tein   lev els.   Po ly s o r b ate  ca n   also   in f lu en c th in teg r ity   o f   th b ac ter ial  ce ll  m em b r a n an d   alter   p r o t ein   s tr u ctu r with i n   th ce lls   [ 2 7 ] .   Nu tr ien Ag ar   is   co m m o n ly   u s ed   n o n - s elec tiv m ed ia  f o r   r ap id ly   g r o win g   v ar io u s   b ac ter ial  s p ec ies  f o u n d   in   wate r ,   waste,   an d   f e ce s .   I co n s is ts   o f   p ep t o n e,   b e ef   ex tr ac t,  a n d   a g ar ,   p r o v id in g   ess en tial  n u tr ien ts   f o r   b ac ter ial  g r o wth .   T h is   m ak es  it  an   ex ce llen ch o ice  f o r   b ac ter ial  id en tific atio n ,   esp ec ially   f o r   cu ltiv atin g   lar g q u an titi es  o f   Salm o n ella  b ac ter ia   [ 2 8 ] .   I n   s tu d y   c o n d u cte d   b y   Kh o s r av ( 2 0 2 2 ) ,   im m u n o m a g n etic  b ea d s   wer d ev el o p ed   t o   is o late  Salm o n ella  b ac ter ia  f r o m   co n tam in ated   m ilk   s am p l es.  T h r esear ch er s   s u cc ess f u lly   d etec ted   at  least  3 ×1 0 4   C FU/m L   o f   b ac ter ia  i n   th p o llu ted   s am p les  u s in g   n u tr ien ag ar   m e d ia   [ 2 9 ] .   S a lmo n ella   typ h i   is o la te   is   e x tr ac ted   u s in g   s o n icatio n   tec h n iq u es  b y   u tili zin g   u ltra s o n i en er g y   to   m o v th e   co n s titu en p ar ticles  o f   th ce ll  m e m b r an s o   th at  th p r o tein   co m p o n e n ts   ca n   b r elea s ed .   OM P   ex tr ac tio n   o f   S a lmo n ella   typ h i   in   th is   s tu d y   u s ed   s o n icatio n   tech n iq u with   f r eq u e n c y   o f   3 5   k Hz  f o r   3 0   s ec o n d s   an d   r ep ea ted   f o r   1 5   cy cles  with   g ap   o f   3 0   s ec o n d s .   Af ter   th s o n icatio n   p r o ce s s ,   p h o s p h ate - b u f f er e d   s alin ( PB S )   s u r f ac tan an d   T r ito n - ar e   ad d e d   to   ass is in   ly s in g   th b ac ter ial  ce ll  s u r f ac s o   th at   OM ex tr ac is   o b tain ed   to   b an aly ze d PB is   wate r - b ased   s alt  s o lu tio n   u s ed   to   m a in tain   th p an d   o s m o lar ity   f o r   ce lls ,   tis s u es,  a n d   b io l o g ical  s am p les   [ 3 0 ] .   T h p r o tein   co n ten o f   OM S a lmo n ella   typ h i   ex tr ac wa s   m ea s u r ed   u s in g   T h er m o   Scien tific   Nan o d r o p   at  a   wav elen g th   o f   2 8 0   n m .   T h er m o   Scien tific   n an o d r o p   u tili ze s   UV - Vis   s p ec tr o p h o t o m eter   to   m ea s u r ab s o r b an ce .   Pu r if ied   p r o tein s   ab s o r b   lig h at  a   p ea k   o f   2 8 0   n m   [ 2 1 ] .   T a b le  1   s h o ws  th at  th p r o tein   lev els in   S a lmo n ella   typ h i   OM P e x tr ac t o b tain ed   f r o m   I B r o th   cu ltu r s am p les r an g ed   f r o m   8 . 3 1 0   m g /m L   to   8 . 9 8 5   m g /m L ,   wh ile  s am p les  f r o m   Ma cCo n k ey   cu ltu r es  r an g ed   f r o m   1 . 1 0 5   m g /m L   to   5 . 4 7 1   m g /m L .   T h e   d if f er en ce   i n   b ac ter ial  g r o wth   b etwe en   s o lid   an d   liq u id   c u ltu r m ed ia  m a y   b d u to   d if f er en ce s   in   n u tr ie n t   av ailab ilit y .   B ef o r p r o tein   elec tr o p h o r es is ,   OM P   ex tr ac was  p r ep ar ed   b y   ad d i n g   lo ad in g   b u f f er   to   th e   m icr o ce n tr if u g tu b with   r atio   o f   2 : 1   an d   h o m o g e n izin g   u s in g   s p in   d o wn .   T h s am p le  was  h ea ted   at  a   tem p er atu r e   o f   9 0 º C - 9 5 º C   f o r   5   m in u tes.  SDS - PAGE   with   4 s tack in g   g el  a n d   1 2 s ep ar atin g   g el  was  u s ed   in   th is   s tu d y .   T h wells  wer e   f illed   with   2 0   μ L   o f   p r e p ar e d   s am p les,  an d   o n e   o f   th w ells   was  f illed   with   p r o tein   m ar k er s .   T h B io - R ad   Pro tein   Stan d ar d   with   s ize  o f   1 0   k Da  to   2 5 0   k Da  was  u s ed   as  p r o tein   m ar k er .   E lectr o p h o r esis   was  r u n   at  1 0 0 an d   4 0   m f o r   9 0   m in u tes  u n til  th s am p le  alm o s r ea ch ed   th g el   b o tto m .   Fin ally ,   th g el  was  s tain ed   u s in g   co o m ass ie  b r illi an b lu R - 2 5 0   ( B io - R ad ) .   T h OM an tig en   o f   S a lmo n ella   typ h i   was  id en tifi ed   b y   s ep ar atin g   p r o tein s   b y   th eir   m o lecu la r   weig h u s i n g   SDS - PAGE .   T h Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                      I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 0 6   I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci Vo l.  13 ,   No .   3 Sep tem b er   20 24 :   48 - 55   52   p r o tein   b a n d s   wer th en   v is u alize d   u s in g   co o m ass ie  b r illi an b lu as  s h o wn   in   Fig u r 1 .   I n   Fig u r 1 ( a ) ,   clo s e - u p   im a g s h o wca s es  th is o latio n   o f   th OM Salm o n ella  ty p h i   an tig en   f r o m   th e   M ac C o n k ey   m ed iu m .   Me an wh ile,   Fig u r 1 ( b )   p r o v id es a   d etailed   v iew  o f   th I b r o th   cu ltu r e.       T ab le  1 .   Pro tein   co n ten o f   th e   s am p les   S a mp l e   S .   t y p h i   f r o M a c   C o n k e y   A g a r   ( m g / mL)   S .   t y p h i   f r o m I D   B r o t h   ( mg / mL)   1a   1 . 1 0 5   8 . 9 8 5   1b   1 . 1 2 2   8 . 8 3 9   1c   5 . 0 5 4   8 . 4 8 4   2a   5 . 4 7 1   8 . 7 2 2   2b   2 . 4 0 6   8 . 3 1 0   2c   2 . 8 4 0   8 . 9 3 4   3a   3 . 3 2 4   8 . 8 3 8   3b   3 . 4 7 4   8 . 3 9 8   3c   4 . 0 7 6   8 . 8 8 7           ( a)   ( b )     Fig u r 1 .   R esu lts   o f   s ep ar atio n   S a lmo n ella   ty p h i   OM P a n tig e n   th at  cu ltu r e d   f r o m   ( a)   Ma cCo n k ey   m ed iu m   an d   ( b )   cu ltu r e d   f r o m   I b r o th       T h m o lecu lar   weig h o f   p r o tein   b an d s   is   au to m atica lly   c alcu lated   u s in g   th Gel  An al y ze r   1 9 . 1   ap p licatio n .   T h r esu lts   o f   th SDS - PA GE   an aly s is   s h o wed   th at  th s am p les  cu ltu r ed   o n   s o lid   m ed ia  r esu lted   in   th f o r m atio n   o f   6   p r o tein   b an d s ,   with   m o lecu lar   weig h t s   r an g in g   f r o m   1 4   k Da  to   9 7   k Da.   On   t h o t h er   h an d ,   s am p les  cu ltu r ed   o n   liq u id   m ed ia  r esu lted   in   th f o r m atio n   o f   1   to   3   p r o tein   b a n d s ,   with   m o lecu lar   weig h ts   r an g in g   f r o m   3 0   k Da   to   3 6   k Da.   Mo r e   d etails  ar av ailab le  in   T a b le  2 .   T h e   v ar i atio n   in   m o lecu lar   weig h o f   th p r o tein   f o r m ed   ca m f r o m   th d eb r is   o f   th ex tr ac ellu lar   co m p o n en o f   th s am p le  b ec au s th is   s tu d y   u s ed   cr u d s am p les  with o u p u r if icatio n .   T h m o lecu lar   weig h o f   a   p r o tein   ca n   es tim ates  th am in o   ac id   co m p o s itio n   th at  s am p l co n tain s   [ 3 1 ] .       T ab le  2 .   C alcu latio n   o f   m o lec u lar   weig h t   OM P   S .   t y p h i   f r o M a c   C o n k e y   a g a r   S .   t y p h i   f r o m I D   b r o t h   La n e   M o l e c u l a r   W e i g h t   ( k D a )   La n e   M o l e c u l a r   W e i g h t   ( k D a )   1   a n d   2   33   1 ,   2 ,   3 ,   a n d   4   9 7   k D a   4 2   k D a   3 ,   4 ,   7 ,   8 ,   a n d   9   36   3 6   k D a   2 7   k D a   3 4   k D a   2 3   k D a   1 4   k D a   3 0   k D a   5 ,   6 ,   7 ,   8 ,   a n d   9   5 4   k D a   4 2   k D a   5   a n d   6   3 6   k D a   3 6   k D a   2 7   k D a   3 0   k D a   1 6   k D a   1 4   k D a       Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci     I SS N:   2252 - 8 8 0 6         Th effec tiven ess   o f u s in g   I b r o th   in   id en tifyin g   th o u ter me mb r a n p r o tein     ( P esta r ia ti )   53   T h m o lec u lar   weig h t   o f   p r o tein   b an d s   f o r m ed   a f ter   O MP  s ep ar atio n   u s in g   SDS - PAGE   was   m ea s u r ed   u s in g   Gel  An aly ze r   1 9 . 1   s o f twar e,   f o llo win g   s t ain in g   with   c o o m ass ie  b r illi a n b lu e Fro m   t h m ea s u r em en r esu lts ,   o n t o   t h r ee   p r o tein   b a n d s   wer o b tain ed   in   s am p les  f r o m   Ma C o n k ey   Ag a r   an d   s ix   p r o tein   b a n d s   f r o m   I B r o th   with   m o lecu lar   weig h d etails  in   T ab le  2 .   T h d if f er e n ce   in   t h n u m b e r   o f   b an d s   f o r m ed   d u e   to   t h lo OM p r o tein   c o n ten o f   t h s a m p le  ex tr ac allo ws  th e   am o u n o f   p r o tein   to   b e   s ep ar ated   s lig h tly   s o   th at  t h v is u aliza tio n   o f   p r o tein   b an d s   is   less   o p tim al,   p r o tein   b a n d s   ca n n o b r ea d ,   an d   m o lecu lar   weig h ca n n o b id en tifie d   [ 3 2 ] T h p r o tein   b an d   f o r m e d   in   SDS - PAGE   ca n   b d eter m in ed   f r o m   th r esu lts   o f   s am p le  e x tr ac tio n   ca r r ie d   o u p r ev io u s ly ,   c o n s id er in g   th at  in   th is   s tu d y   s am p le  ex tr ac tio n   with   th s am m et h o d ,   th e   d if f e r en ce   in   r esu lts   ca n   b ca u s ed   b y   th p r o tein   le v els  co n tain e d .   T h d is ad v a n tag e   o f   th is   SDS - PAGE   m eth o d   is   th at  p r o tein   b a n d   v is u aliza tio n   is   d o n e   m an u ally   ev e n   th o u g h   m o lec u lar   weig h t   ca lcu latio n s   ar d o n au to m ati ca lly   u s in g   Gel  An aly ze r   1 9 . 1 .   I is   co m m o n   to   o b s er v d if f er en ce s   b etwe en   th ac tu al  m o lecu lar   weig h o f   p r o tein s   o n   S DS - PAGE   g els  an d   th eir   ex p ec ted   s ize.   T h is   d if f er en ce   ca n   ar is d u e   to   ch em ical  m o d i f icatio n s   s u ch   as  g ly co s y latio n   an d   u b i q u itin atio n ,   wh ich   c an   s ig n if ican tly   af f ec th eir   m o b ilit y   o n   th g el.   I t' s   wo r th   n o tin g   th at   p h o s p h o r y latio n   ca n   s o m etim es  ca u s s lig h v ar iatio n s   in   SDS - PAGE   g els.  Ho w ev er ,   wh en   h y p er - p h o s p h o r y latio n   o cc u r s ,   it  s h o ws  u p   as  s lo wer   s tain s .   T h er ef o r e,   it  is   im p o r ta n to   ex am in wh eth er   th d if f er en ce   in   s ize  is   d u e   to   ch em ical  m o d if icatio n s   o r   s p ec if ic  f ea tu r es  s u c h   as  th e   p r o tein ' s   am in o   ac i d   co m p o s itio n   [ 3 1 ] .       4.   CO NCLU SI O N   R esear ch   h as  s h o wn   th at  OM S a lmo n ella   typ h i   e x tr ac t   g r o wn   o n   Nu tr ie n Ag ar   f r o m   I B r o th   co n tain s   h ig h er   p r o tein   lev els th an   S a lmo n ella   typ h i   cu ltu r e d   f r o m   Ma cCo n k ey   m ed iu m .   T h is   v ar iatio n   is   d u e   to   en v ir o n m en tal  co n d itio n s   an d   n u tr ie n ab s o r p tio n   with in   th m ed ia.   Usi n g   I B r o t h   b ef o r g r o win g   o n   Nu tr ien Ag ar   s tab ilizes  th b ac ter ia' s   co n d itio n   an d   d ec r ea s es  th lik elih o o d   o f   er r o r s   in   g r o wth   m ed ia   p r o d u ctio n .   T h e   p r o tein   lev els   in   th e   ex tr ac ted   OM s am p le s   h av a n   im p ac t   o n   th e   id en t if icatio n   o f   OM Ps   b ased   o n   p r o tein   b an d   f o r m ati o n .   W h en   p r o tein   lev els  ar e   lo w,   f ewe r   p r o tei n   m o lecu les  s ep ar ate  in   th e   s am e   b an d   zo n e,   wh ich   r ed u ce s   th e   v is ib ilit y   an d   r ea d a b ilit y   o f   p r o tein   b a n d s m a k in g   it  d if f i cu lt  to   id en tify   t h ac cu r ate  m o lecu lar   weig h o f   th p r o tein .   T h er e f o r e,   u s in g   s am p les  with   h ig h er   p r o tein   lev els  y ield s   b etter   r esu lts   in   th SDS - PAGE   m e th o d .   I ca n   b c o n clu d ed   th a u s in g   S a lmo n ella   typ h i   f r o m   I B r o th   is   m o r e   ef f ec tiv in   id e n tify in g   OM P a n tig en s   th an   u s in g   Ma cCo n k e y   m ed iu m .       ACK NO WL E DG E M E NT S   T h au th o r s   wo u ld   lik to   ex p r ess   th eir   g r atitu d to   th P o ly tech n ic  Min is tr y   o f   Hea lth   Su r ab ay a,   Su r ab ay a,   I n d o n esia  f o r   p r o v id in g   f u n d in g   f o r   th is   r esear ch .   T h is   s tu d y   was  ap p r o v ed   b y   d ec r ee   o f   th e   Dir ec to r   o f   th e   Po l y tech n ic  Min is tr y   o f   Hea lth   Su r ab a y with   n u m b er   HK. 0 1 . 0 2 /1 /1 9 0 5 /2 0 2 3   o n   Feb r u ar y   1 4 th ,   2 0 2 3 .       RE F E R E NC E S   [ 1 ]   J.  V .   A s h u r s t ,   E.   J .   Tr u o n g ,   a n d   B .   W o o d b u r y ,   T y p h o i d   Fe v e r ( S a l m o n e l l a   t y p h i ) .   S t a t P e a r l s:   S t a t P e a r l s   P u b l i sh i n g ,   2 0 2 3 .   [ 2 ]   W H O ,   " Ty p h o i d , "   2 0 2 3 .   [ O n l i n e ] .   A v a i l a b l e :   h t t p s : / / w w w . w h o . i n t / n e w s - r o o m / f a c t - sh e e t s / d e t a i l / t y p h o i d .   [ A c c e sse d   7   A p r i l   2 0 2 4 ].   [ 3 ]   K .   K n u f f - Ja n z e n ,   A .   T u p i n ,   S .   Y u r i s t - D o u t sc h ,   J.  L .   R o w l a n d ,   a n d   B .   B .   F i n l a y ,   M u l t i p l e   S a l m o n e l l a - p a t h o g e n i c i t y   I sl a n d   e f f e c t o r s   a r e   r e q u i r e d   t o   f a c i l i t a t e   b a c t e r i a l   e st a b l i s h m e n t   o f   i t s i n t r a c e l l u l a r   n i c h e   a n d   v i r u l e n c e ,   PLo S   O N E ,   v o l .   1 5 ,   n o .   6 ,   2 0 2 0 ,   d o i :   1 0 . 1 3 7 1 / j o u r n a l . p o n e . 0 2 3 5 0 2 0 .   [ 4 ]   L.   Z h a ,   S .   G a r r e t t ,   a n d   J .   S u n ,   S a l m o n e l l a   i n f e c t i o n   i n   c h r o n i c   i n f l a mm a t i o n   a n d   g a s t r o i n t e s t i n a l   C a n c e r ,   D i s e a ses ,   v o l .   7 ,   n o .   1 ,   p .   2 8 ,   2 0 1 9 ,   d o i :   1 0 . 3 3 9 0 / d i s e a s e s7 0 1 0 0 2 8 .   [ 5 ]   N .   N .   U l y a ,   I .   F i t r i ,   a n d   D .   I .   W i d y a w a t i ,   M a c r o sc o p i c   a n d   M i c r o s c o p i c   P r o f i l e   o f   S a l mo n e l l a   t y p h i   a n d   S a l mo n e l l a   p a r a t y p h i   B a c t e r i a   i n   T y p h o i d   F e v e r   S u f f e r e r s ,   ( i n   I n d o n e si a n ) ,   J o u r n a l .   S i n t e si S u b m i t t e d :   1 4   A g u st u s ,   v o l .   1 ,   n o .   2 ,   p p .   4 0 4 6 ,   2 0 2 0 .   [ 6 ]   M .   O .   B h u t i a ,   N .   Th a p a   a n d   J .   P .   Ta man g ,   M o l e c u l a r   c h a r a c t e r i z a t i o n   o f   b a c t e r i a ,   d e t e c t i o n   o f   e n t e r o t o x i n   g e n e s,   a n d   scr e e n i n g   o f   a n t i b i o t i c   su s c e p t i b i l i t y   p a t t e r n i n   t r a d i t i o n a l l y   p r o c e ss e d   m e a t   p r o d u c t s   o f   si k k i m ,   I n d i a ,   Fr o n t i e rs  i n   M i c r o b i o l o g y ,   v o l .   1 1 ,   Jan u a r y   2 0 2 1 ,   d o i :   1 0 . 3 3 8 9 %2 F f m i c b . 2 0 2 0 . 5 9 9 6 0 6 .   [ 7 ]   A .   A l i ,   R .   S a r ma h ,   H .   R a h m a n ,   a n d   G .   K .   S a i k i a ,   F a c t o r i n f l u e n c i n g   p r o d u c t i o n   o f   S a l m o n e l l a   e n t e r o t o x i n   ( S t n ) ,   I n t e rn a t i o n a l   J o u rn a l   o f   C h e m i c a l   S t u d i e s ,   v o l .   8 ,   n o .   2 ,   p p .   1 1 5 8 1 1 6 1 ,   2 0 2 0 ,   d o i :   1 0 . 2 2 2 7 1 / c h e m i . 2 0 2 0 . v 8 . i 2 r . 8 9 2 5 .   [ 8 ]   K .   T .   S e a r s,  J.  E .   G a l e n ,   a n d   S .   M .   T e n n a n t ,   A d v a n c e i n   t h e   d e v e l o p me n t   o f   S a l m o n e l l a - b a se d   v a c c i n e   s t r a t e g i e f o r   p r o t e c t i o n   a g a i n st   S a l m o n e l l o si i n   h u ma n s,   J o u r n a l   o f   A p p l i e d   M i c r o b i o l o g y ,   v o l .   1 3 1 ,   n o .   6 ,   p p .   2 6 4 0 2 6 5 8 ,   2 0 2 1 ,   d o i :   1 0 . 1 1 1 1 / j a m. 1 5 0 5 5 .   [ 9 ]   T.   H a n d a y a n i ,   D .   P r i y o a t m o j o ,   a n d   A .   C .   Tr i n u g r a h a ,   O u t e r   M e m b r a n e   P r o t e i n   ( O M P )   P r o f i l e s   o f   B r u c e l l a   a b o r t u s   L o c a l   I so l a t e   b y   S D S - P A G P r o c e d u r e ,   Pr o c e e d i n g s   o f   t h e   I n t e rn a t i o n a l   C o n f e re n c e   o n   I m p r o v i n g   T r o p i c a l   An i m a l   Pr o d u c t i o n   f o Fo o d   S e c u r i t y   ( I T AP S   2 0 2 1 ) ,   v o l .   2 0 ,   p p .   2 8 3 1 ,   2 0 2 2 ,   d o i :   1 0 . 2 9 9 1 / a b sr . k . 2 2 0 3 0 9 . 0 0 6 .   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                      I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 0 6   I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci Vo l.  13 ,   No .   3 Sep tem b er   20 24 :   48 - 55   54   [ 10 ]   A .   T.   Y .   A l - J u r a i s y 1 ,   A .   A .   M .   A l - Ju r a i s y 1 ,   A .   A .   M .   A l - Ju r a i s y 1 ,   a n d   N .   A .   S a l e h 2 ,   B i o c h e mi c a l   a n d   K i n e t i c   S t u d y   f o r   t h e   p a r t i a l l y   p u r i f i e d   Le c i t h i n :   C h o l e st e r o l   a c y l t r a n sf e r a se   f r o s e r u m   c a r d i o v a s c u l a r   d i s e a s e ,   T i k ri t   J o u rn a l   o f   Pu r e   S c i e n c e   v o l .   2 5 ,   n o .   2 ,   p p .   3 2 3 7 ,   2 0 2 0 ,   d o i :   1 0 . 2 5 1 3 0 / j . v 2 5 i 2 . 9 5 5 .   [1 1 ]   S .   P .   e   A .   T.   S .   K u mar,  B i o c h e m i st r y :   A   P r a c t i c a l   M a n u a l ,   N e w   D e l h i :   I C AR - I n d i a n   Re s e a r c h   I n s t i t u t e ,   2 0 1 9 .   [1 2 ]   N .   P a r k e r ,   M .   S c h n e e g u r t ,   A . - H .   T.   T u ,   B .   M .   F o r s t e r ,   a n d   P .   Li st e r ,   M i c r o b i o l o g y ,   2 0 2 3 ,   [ O n l i n e ] .   A v a i l a b l e :   h t t p s : / / o p e n s t a x . o r g / d e t a i l s/ b o o k s/ m i c r o b i o l o g y   ( A c c e sse d   N o v e m b e r   2 1 ,   2 0 2 3 ).   [ 1 3 ]   M .   B o n n e t ,   J .   C .   L a g i e r ,   D .   R a o u l t ,   a n d   S .   K h e l a i f i a ,   B a c t e r i a l   c u l t u r e   t h r o u g h   s e l e c t i v e   a n d   n o n - se l e c t i v e   c o n d i t i o n s :   t h e   e v o l u t i o n   o f   c u l t u r e   me d i a   i n   c l i n i c a l   m i c r o b i o l o g y ,   N e w   Mi c r o b e a n d   N e w   I n f e c t i o n s ,   v o l .   3 4 ,   2 0 2 0 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . n m n i . 2 0 1 9 . 1 0 0 6 2 2 .   [1 4 ]   B e n j a mi n   J u n g   a n d   G i l e s J .   H o i l a t ,   M a c C o n k e y   M e d i u m,”   S t a t P e a r l s ,   2 0 2 3 .   [1 5 ]   Y .   S a n c h e z - R o sar i o   a n d   M .   D .   L.   Jo h n s o n ,   M e d i a   ma t t e r s,   e x a m i n i n g   h i st o r i c a l   a n d   m o d e r n   s t r e p t o c o c c u s   p n e u m o n i a e   g r o w t h   med i a   a n d   t h e   e x p e r i m e n t t h e y   a f f e c t ,   F ro n t i e rs  i n   C e l l u l a a n d   I n f e c t i o n   Mi c ro b i o l o g y ,   v o l .   1 1 ,   2 0 2 1 ,   d o i :   1 0 . 3 3 8 9 / f c i mb . 2 0 2 1 . 6 1 3 6 2 3 .   [1 6 ]   A .   Le e ,   M b 3 5 2   G e n e r a l   M i c r o b i o l o g y   L a b o r a t o r y   2 0 2 1 ,   L i b r e T e x t s ,   p p .   1 1 9 1 6 4 ,   2 0 2 1 ,   [ O n l i n e ] .   A v a i l a b l e :   h t t p s : / / l i b r e t e x t s. o r g   ( A c c e ss e d   N o v e mb e r   2 1 ,   2 0 2 3 ).   [1 7 ]   J.  R i g b y   e t   a l . ,   O p t i mi z e d   me t h o d s f o r   d e t e c t i n g   S a l m o n e l l a   T y p h i   i n   t h e   e n v i r o n me n t   u s i n g   v a l i d a t e d   f i e l d   s a m p l i n g ,   c u l t u r e   a n d   c o n f i r ma t o r y   m o l e c u l a r   a p p r o a c h e s ,   J o u rn a l   o f   Ap p l i e d   Mi c ro b i o l o g y ,   v o l .   1 3 2 ,   n o .   2 ,   p p .   1 5 0 3 1 5 1 7 ,   2 0 2 2 ,   d o i :   1 0 . 1 1 1 1 / j a m. 1 5 2 3 7 .   [1 8 ]   I .   G a j i c ,   J .   K a b i c ,   D .   K e k i c ,   M .   J o v i c e v i c ,   M .   M i l e n k o v i c ,   D .   M .   C u l a f i c ,   A .   Tr u d i c ,   L.   R a n i n   a n d   N .   O p a v s k i ,   A n t i mi c r o b i a l   S u sce p t i b i l i t y   Te s t i n g :   A   C o mp r e h e n si v e   R e v i e w   o f   C u r r e n t l y   U s e d   M e t h o d ,   A n t i b i o t i c s,   v o l .   1 1 ,   p .   4 2 7 ,   d o i :   1 0 . 3 3 9 0 / a n t i b i o t i c s 1 1 0 4 0 4 2 7 .   [ 1 9 ]   M .   L.   B a y o t   a n d   B .   N .   B r a g g ,   A n t i m i c r o b i a l   S u s c e p t i b i l i t y   Te s t i n g , ”  T r e a s u re  I s l a n d   ( FL) :   S t a t Pe a rl s   P u b l i s h i n g ,   2 0 2 2 .   [ 20 ]   O .   Er k me n ,   P r e p a r a t i o n   o f   m e d i a   a n d   s t e r i l i z a t i o n   t e c h n i q u e s ,   L a b o r a t o ry  Pr a c t i c e i n   Mi c r o b i o l o g y ,   p p .   3 1 8 ,   2 0 2 1 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / b 9 7 8 - 0 - 323 - 9 1 0 1 7 - 0 . 0 0 0 0 4 - 4.   [ 21 ]   T.   S c i e n t i f i c ,   P r o t e i n   A p p l i c a t i o n s,”   N a n o D r o p   Mi c ro   U V / Vi s   S p e c t ro p h o t o m e t e r:   N a n o D r o p   O n e   U ser   G u i d e ,   Wa l m i n g t o n ,   T h e rm o   Fi s c h e S c i e n t i f i c   I n c . . ,   p p .   6 7 1 4 5 ,   2 0 2 3 .   A v a i l a b l e :   h t t p s : / / k n o w l e d g e 1 . t h e r m o f i s h e r . c o m/ M a n u a l _ R e p o si t o r y / 2 6 9 - 3 0 9 1 0 2 _ - _ EN _ - _ R e v _ I _ - _ N a n o D r o p _ O n e _ O p e r a t o r _ M a n u a l   ( A c c e sse d   N o v e m b e r   1 2 ,   2 0 2 3 ).   [2 2 ]   Y .   S u p r i a t i n ,   V .   A .   S u m i r a t ,   a n d   M .   H e r d i a n i ,   G r o w t h   a n a l y s i o f   e sc h e r i c h i a   c o l i   a n d   s a l m o n e l l a   t y p h i   o n   mac c o n k e y   a g a r   mo d i f i c a t i o n ,   J o u r n a l   o f   P h y s i c s:   C o n f e re n c e   S e ri e s ,   v o l .   1 7 6 4 ,   n o .   1 ,   2 0 2 1 ,   d o i :   1 0 . 1 0 8 8 / 1 7 4 2 - 6 5 9 6 / 1 7 6 4 / 1 / 0 1 2 2 0 7 .   [2 3 ]   K .   A .   A g u a y o - C e r ó n   e t   a l . ,   G l y c i n e :   t h e   sma l l e st   a n t i - i n f l a mm a t o r y   m i c r o n u t r i e n t ,”  I n t e r n a t i o n a l   J o u r n a l   o f   M o l e c u l a S c i e n c e s v o l .   2 4 ,   n o .   1 4 ,   2 0 2 3 ,   d o i :   1 0 . 3 3 9 0 / i j ms2 4 1 4 1 1 2 3 6 .   [2 4 ]   D .   Jo n e e t   a l . ,   Ev a l u a t i o n   o f   t h e   e f f e c t   o f   a   c o m b i n e d   c h e m i c a l   a n d   t h e r mal   mo d i f i c a t i o n   o f   w o o d   t h o u g h   t h e   u s e   o f   b i c i n e   a n d   Tr i c i n e ,   F o res t s ,   v o l .   1 3 ,   n o .   6 ,   2 0 2 2 ,   d o i :   1 0 . 3 3 9 0 / f 1 3 0 6 0 8 3 4 .   [2 5 ]   D .   Jo n e s,  L.   N u n e s ,   a n d   S .   D u a r t e ,   I mp r o v i n g   p e r f o r ma n c e   o f   t h e r m a l   m o d i f i e d   w o o d   a g a i n s t   t e r mi t e s   w i t h   b i c i n e   a n d   t r i c i n e ,   Bi o - B a s e d   B u i l d i n g   Ma t e r i a l s ,   v o l .   1 ,   p p .   7 3 5 7 4 2 ,   2 0 2 2 ,   d o i :   1 0 . 4 0 2 8 / w w w . sci e n t i f i c . n e t / c t a . 1 . 7 3 5 .   [2 6 ]   A .   D .   G r a b a r e k   e t   a l . ,   W h a t   m a k e p o l y so r b a t e   f u n c t i o n a l ?   i m p a c t   o f   p o l y so r b a t e   8 0   g r a d e   a n d   q u a l i t y   o n   I g G   st a b i l i t y   d u r i n g   mec h a n i c a l   st r e ss ,   J o u r n a l   o f   P h a rm a c e u t i c a l   S c i e n c e s ,   v o l .   1 0 9 ,   n o .   1 ,   p p .   8 7 1 8 8 0 ,   2 0 2 0 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . x p h s. 2 0 1 9 . 1 0 . 0 1 5 .   [2 7 ]   S .   G a n a p a t h y   P i l l a y   e t   a l . ,   E v a l u a t i o n   o f   t w e e n   8 0   i n c o r p o r a t e d   m e d i a   t o   i n c r e a se  p a t h o g e n   i so l a t i o n   f r o p e r i t o n e a l   f l u i d   o f   c a p d   p a t i e n t s   a t   h o s p i t a l   k u a l a   l u mp u r ,   M a l a y s i a n   J o u rn a l   o f   P a t h o l o g y ,   v o l .   4 3 ,   n o .   2 ,   p p .   2 6 1 2 6 8 ,   2 0 2 1 ,   d o i :   1 0 . 1 1 2 8 / A E M . 0 0 7 9 5 - 14 .   [2 8 ]   N .   M .   S u s i l a w a t i ,   A .   A st u t i   a n d   A .   P e n i ,   U t i l i z i n g   ma i z e   c o b   m e d i a   a s   a   r e p l a c e m e n t   f o r   n u t r i e n t   a g a r   m e d i a   i n   t h e   g r o w t h   o f   e sc h e r i c h i a   c o l i   a n d   st a p h y l o c o c c u s   a u r e u s   b a c t e r i a ,   I n t e r n a t i o n a l   J o u r n a l   o f   Ed u c a t i o n a l   R e se a rc h ,   v o l .   1 ,   n o .   1 ,   p p .   2 8 - 3 5 ,   2 0 2 4 ,   d o i :   1 0 . 6 2 9 5 1 / i j e r . v 1 i 2 . 2 3 .   [ 2 9 ]   M .   K h o sr a v i ,   D .   G h a r i b i   a n d   S .   S .   M o g h a d a m ,   S y n t h e si a n d   e v a l u a t i o n   o f   t h e   i mm u n o m a g n e t i c   b e a d f o r   sep a r a t i o n   o f   t h e   sal m o n e l l a   t y p h i m u r i u f r o m i l k ,   R a z i   Va c c i n e   &   S e r u m   Re se a r c h   I n s t i t u t e ,   v o l .   7 7 ,   n o .   5 ,   p p .   1 6 0 1 - 1 6 0 9 ,   2 0 2 2 ,   d o i :   1 0 . 2 2 0 9 2 / A R I . 2 0 2 2 . 3 5 6 7 2 2 . 1 9 0 2 .   [ 3 0 ]   W .   To n g ,   M .   F o r st e r ,   F .   D i o n i g i ,   R .   S .   Er a m i ,   P .   S t r a sser ,   A .   J.  C o w a n   a n d   P .   F a r r a s,  El e c t r o l y s i o f   l o w - g r a d e   a n d   s a l i n e   s u r f a c e   w a t e r ,   N a t u r e   E n e rg y ,   v o l .   5 ,   p p .   3 6 7 - 3 7 7 ,   2 0 2 0 ,   d o i :   1 0 . 1 0 3 8 / s 4 1 5 6 0 - 0 2 0 - 0 5 5 0 - 8 .   [ 31 ]   P .   Zh a n g ,   C .   Z h a o ,   T .   Z h a o ,   M .   L i u ,   a n d   L.   J i a n g ,   R e c e n t   a d v a n c e i n   b i o i n s p i r e d   g e l   su r f a c e w i t h   su p e r w e t t a b i l i t y   a n d   s p e c i a l   a d h e s i o n ,   A d v a n c e d   S c i e n c e ,   v o l .   6 ,   n o .   1 8 ,   2 0 1 9 ,   d o i :   1 0 . 1 0 0 2 / a d v s.2 0 1 9 0 0 9 9 6 .   [ 32 ]   H .   H i r a n o   a n d   J.  S h i r a k a w a ,   R e c e n t   d e v e l o p me n t i n   P h o s - t a g   e l e c t r o p h o r e si f o r   t h e   a n a l y s i o f   p h o sp h o p r o t e i n i n   p r o t e o mi c s,   E x p e rt   Re v i e w   o f   Pr o t e o m i c s,  v o l .   1 9 ,   n o .   2 ,   p p .   1 0 3 - 1 1 4 ,   9   M a r c h   2 0 2 2 ,   d o i :   1 0 . 1 0 8 0 / 1 4 7 8 9 4 5 0 . 2 0 2 2 . 2 0 5 2 8 5 0 .       B I O G RAP H I E S O F   AUTH O RS       Pes ta r ia ti           P e sta riati   h a re c e iv e d   e d u c a ti o n   fro m   v a ri o u s   in sti tu t io n s,   i n c lu d in g   S DN   a n d   S M P i n   S u ra b a y a ,   a   4 - y e a An a l y sis  M a n a g e m e n S c h o o ( S P A)  in   Ba n d u n g ,   He a lt h   An a ly st  Ac a d e m y   in   Ba n d u n g ,   a   b a c h e lo r’s  d e g re e   in   c h e m istry   e d u c a ti o n ,   a n d   a   M a g ister  p r o g ra m   i n   Ba sic   M e d ica S c ien c e   with   a   p a rti c u l a in tere st  i n   M e d ica M icro b i o l o g y   fr o m   S u ra b a y a .   U p o n   c o m p letin g   S P A,  s h e   b e c a m e   a   c las II/civ il   se rv a n t   a n d   late st u d ied   a th e   Ba n d u n g   He a lt h   An a ly st   Ac a d e m y   to   q u a li fy   f o t h e   II/c  p o siti o n .   Cu rre n tl y ,   s h e   h o l d t h e   p o siti o n   o c las IV/c .   S h e   is  a   lec tu re f o r   th e   Ba c terio lo g y   c o u r se   a th e   De p a rtme n o M e d ica Lab o ra to r y   Tec h n o l o g y ,   P o l y tec h n ic  M in istr y   o He a lt h   S u ra b a y a ,   S u ra b a y a ,   In d o n e sia .   S h e   c a n   b e   c o n tac ted   b y   e m a il :   p e sta riati@p o lt e k k e sd e p k e s - sb y . a c . id .       Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci     I SS N:   2252 - 8 8 0 6         Th effec tiven ess   o f u s in g   I b r o th   in   id en tifyin g   th o u ter me mb r a n p r o tein     ( P esta r ia ti )   55     S u h a r i y a d         S u h a ri y a d i' s   e d u c a ti o n a b a c k g ro u n d   is  q u it e   e x ten si v e .   He   a tt e n d e d   S DN   Ce m a n d i   fo r   p rima ry   sc h o o l,   S M P Ju a n d a   f o r   m id d le   sc h o o l,   th e   He a lt h   An a ly st  Hi g h   S c h o o l   o t h e   M i n istry   o f   He a lt h   S u ra b a y a ,   IKIP   P G RI  S u ra b a y a   fo r   h is  b a c h e lo r’s  d e g re e   in   c h e m istry ,   a n d   t h e   M a ste P r o g ra m   o f   F a c u lt y   o f   M e d ici n e   Airlan g g a   Un iv e rsity   fo h is  m a ste r’s  d e g r e e   in   Im m u n o lo g y .   Ad d i ti o n a ll y ,   h e   h a tak e n   c o u rse i n   In stru m e n tati o n ,   Im m u n o lo g y ,   a n d   M o lec u lar  Bio lo g y .   S u h a riy a d h a w o rk e d   a P T.   S a n d a F a rm a ,   th e   M e rp a ti   C li n ic a Lab o ra to r y ,   a n d   a a n   in stru c t o a n d   tea c h e a S M AK   M in istr y   o f   He a lt h   S u ra b a y a .   S u h a riy a d h a a n   imp re ss iv e   wo rk   h ist o ry ,   h a v in g   h e l d   v a rio u p o si ti o n in   th e   h e a lt h   i n d u stry .   He   wa th e   He a d   o th e   D3   He a lt h   An a ly st   S t u d y   P ro g ra m ,   S e c re tary   o th e   He a lt h   An a ly st  De p a rtme n t,   a n d   He a d   o th e   Cli n ica Ch e m istry   Lab o ra to r y   a t   P o ly tec h n ic  M in i stry   o He a lt h   S u ra b a y a   I n teg r a ted   Lab .   He   is  a ls o   a   lab o ra to r y   c o n su l tan t   a t h e   F o o d   S e c u ri ty   Ag e n c y   o f   Eas Ja v a   P ro v i n c e   a n d   a   re so u rc e   p e rso n   a th e   F o o d   S e c u rit y   a n d   Ag ricu lt u re   Offic e   o Eas Ja v a   P ro v i n c e   o n   fo o d   sa fe ty   in   a ll   Cit y   Districts  i n   Eas Ja v a .   S u h a riy a d is  c u rre n tl y   a   lec tu re a P o l y tec h n ic  M in istr y   o f   He a lt h   S u ra b a y a ,   wh e re   h e   tea c h e Im m u n o l o g y ,   Bio m o lec u lar,  a n d   Im m u n o h e m a to l o g y .   He   se rv e a th e   He a d   o f   t h e   Dip lo m a   3   S t u d y   P ro g ra m   De p a rtme n o M e d ica La b o ra t o ry   Tec h n o l o g y ,   P o l y tec h n ic  M in istry   o f   He a lt h   S u ra b a y a ,   S u ra b a y a ,   In d o n e sia   (2 0 2 2   e tc   p re se n t).   H e   c a n   b e   c o n tac ted   b y   e m a il s u h a riy a d i @ p o l tek k e sd e p k e s - sb y . a c . id .                                         Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.