I nte rna t io na l J o urna l o f   Adv a nces in Applie d Science s   ( I J AAS)   Vo l.  14 ,   No .   3 ,  Sep tem b er   20 25 ,   p p .   9 66 ~ 9 74   I SS N:  2252 - 8 8 1 4 ,  DOI :  1 0 . 1 1 5 9 1 /ijaas . v 14 . i 3 . pp 9 66 - 9 74           966       J o ur na l ho m ep a g e :  h ttp : //ij a a s . ia esco r e. co m   Thera peutic  pote ntial o f  a lpha - lino lenic acid  from  S a cha  Inchi   o il in c ervi ca l can cer:  an  in vitro   st udy  on H eLa   cells       Adi P er m a di 1 ,   M utia ra   Wils o n P utr i 1 ,   M uh a m m a d Ali  Ak ba r 2   1 D e p a r t me n t   o f   C h e m i c a l   En g i n e e r i n g ,   F a c u l t y   o f   I n d u st r i a l   Te c h n o l o g y ,   U n i v e r s i t a s   A h m a d   D a h l a n ,   B a n t u l ,   I n d o n e s ia   2 C V .   I n o v a s i   A n a k   N e g e r i ,   S l e m a n ,   I n d o n e s i a       Art icle  I nfo     AB S T RAC T   A r ticle  his to r y:   R ec eiv ed   No v   1 7 ,   2 0 2 4   R ev is ed   Ma y   1 9 ,   2 0 2 5   Acc ep ted   J u n   8 ,   2 0 2 5       Th is  st u d y   in v e stig a ted   t h e   p o te n ti a l  o f   a lp h a - li n o len ic   a c id   (A LA)  fro m   S a c h a   In c h i   o il   a s  a   th e ra p e u ti c   a g e n t  fo r  c e rv ica l  c a n c e r  th ro u g h   a n   in   v it ro   stu d y   o n   He La  c e ll s.  Ce rv ica l  c a n c e r  is  o n e   o f  th e   m o st  c o m m o n   ty p e s  o f  c a n c e r  in   w o m e n ,   wh ich   is   o fte n   c a u se d   b y   h u m a n   p a p il l o m a v i ru s  (HPV)   in fe c ti o n .   Alt h o u g h   c h e m o th e ra p y   t h e ra p y   is   o n e   o f   t h e   m a in   m e th o d s   in   c a n c e r  trea tme n t,   th is  a p p r o a c h   o ften   c a u se s  sid e   e ffe c ts  a n d   d ru g   re sista n c e .   ALA,  wh ich   is  o n e   o f  t h e   m a in   c o m p o n e n ts  o f  S a c h a   In c h i   o il ,   is  k n o w n   t o   h a v e   a n ti o x id a n t   a n d   a n t i - c a n c e r  a c ti v it ies .   In   t h is  st u d y ,   S a c h a   In c h i   o il   wa s   a n a ly z e d   u si n g   li q u id   c h r o m a to g ra p h y - h i g h   re so lu t io n   m a ss   sp e c tro m e try   (LC - HRMS )  fo r  i d e n ti fica ti o n   o f  it s  a c ti v e   c o m p o n e n ts .   Cy t o to x ic  a ss a y s  we re   p e rfo rm e d   u sin g   t h e   M TT   m e th o d   o n   He La  c e ll s,  wh ich   sh o we d   th a t  ALA  sig n ifi c a n tl y   i n h i b it e d   c a n c e r  c e ll   v iab il it y   a t   lo w   c o n c e n trat io n s,   with   lo w  IC 50   v a l u e s  c o m p a re d   to   t h e   p o siti v e   c o n tr o l  c o m p o u n d   c is p latin .   Th e se   re su lt s  su g g e st  t h a t  ALA  h a s  p o ten ti a l  a s  a n   e ffe c ti v e   a n ti - can c e r  a g e n t  a g a in st   c e rv ica l  c a n c e r  c e ll s.  Th is  stu d y   c o n c lu d e s  t h a t  ALA  fr o m   S a c h a   In c h i   o i l  c a n   b e   a   stro n g   c a n d i d a te  in   th e   d e v e lo p m e n t  o f  sa fe r  a n d   m o re   e ffe c ti v e   c e rv ica l  c a n c e r  th e ra p y .   K ey w o r d s :   Alp h a - lin o len ic  ac id   C er v ic al   ca n ce r   HeL a  ce lls   I n   vitr o   s tu d y   Sach a  I n ch i   o il   T h is i s  a n   o p e n   a c c e ss   a rticle   u n d e r th e   CC B Y - SA   li c e n se .     C o r r e s p o nd ing   A uth o r :   Ad i Per m ad i   Dep ar tm en t o f   C h em ical  E n g i n ee r in g ,   Facu lty   o f   I n d u s tr ial  T ec h n o lo g y ,  Un i v er s itas   Ah m ad   Dah lan   R in g r o ad   Selatan ,   T am a n an ,   B an g u n tap an ,   B an tu l,  I n d o n es ia   E m ail: a d i.p er m ad i@ ch e. u a d . ac . id .       1.   I NT RO D UCT I O N   C er v ical  ca n ce r   r em ain s   o n e  o f   th e  m o s t  p r ev alen t  m alig n an cies  af f ec tin g   wo m en   g lo b ally ,   with   o v er   6 0 4 , 0 0 0   n ew  ca s es  an d   3 1 1 , 0 0 0   d ea th s   r ep o r ted   a n n u ally   [ 1 ] ,   [ 2 ] .  T h e r e  ar e  3 1 1 , 3 6 5   ce r v ical  ca n ce r   d ea th s   an d   5 6 9 , 8 4 7   n ew  ca s e s   p er   y ea r .   T h e  p r im ar y   r is k   f ac to r   is   th e  h u m an   p ap illo m av ir u s   ( HPV) ,   an d   p r o lo n g ed   h ig h - r is k   HPV  in f e ctio n   h as  b ee n   lin k e d   to   ce r v ic al  ca n ce r .   Sex u al  co n tact  ca n   s p r ea d   HPV,   wh ich   h as  b ee n   im p l icate d   in   9 9 %  o f   ca s es  o f   ce r v ical  s q u a m o u s   ce ll  ca n ce r   [ 3 ] ,   [ 4 ] .   HPV  in f ec tio n ,   esp ec ially   h ig h - r is k   s u b ty p es  s u ch   as  H PV  1 6   an d   1 8 ,   is   r eq u ir ed   to   ca u s e  ce r v ical  n eo p lasi a,   alth o u g h   HPV  in f ec tio n   alo n e  is   n o t  s u f f icien t  to   ca u s e  ca n ce r   [ 5 ] .   T h er e   ar e  u p   to   2 2 5   d if f er e n t  v a r ieties  o f   HPVs ,   a  d iv er s e   co llectio n   o f   d o u b le - s tr an d e d   DNA  v ir u s es,  an d   n ew  t y p es  ar e  c o n s tan tly   b ein g   d is co v er ed   [ 6 ] .   HPV   in f ec tio n   is   s tr o n g ly   ass o ciate d   with   t h e  d ev elo p m en t  o f   ce r v ical  ca n ce r ,   esp ec ially   h ig h - r is k   HPV  ty p es  s u ch   as  1 6 ,   1 8 ,   3 1 ,   3 3 ,   an d   4 5 ,   wh i ch   ar e  f o u n d   in   ap p r o x im ately   9 7 %  o f   ce r v ical  ca n ce r   p atien ts   [ 1 ] .   T h e  p en to s e   p h o s p h ate  p ath way   ( PP P)  ca n   b e  ab n o r m ally   ac tiv ate d   b y   HPV  in f ec tio n ;  PP P  p lay s   an   im p o r tan t  r o le  in   th e  d ev elo p m e n t a n d   p r o g r ess io n   o f   ce r v ical  ca n ce r   [ 7 ] .   Giv en   th ese  lim itatio n s ,   th er e   is   a  g r o win g   n ee d   f o r   alter n ativ e  th er ap eu tic  ag e n ts   th at  ar e  s af er ,   m o r e  e f f ec tiv e,   an d   d e r iv ed   f r o m   n atu r al   s o u r ce s .   O n e  p r o m is in g   ca n d i d ate  is   Sach a   I n ch i ,   also   k n o wn   as   P lu ke n etia   vo lu b ilis   L. ,   an   Am az o n ian   p lan t  k n o w n   f o r   its   h ig h   co n ten t  o f   p o ly u n s atu r ated   f atty   ac id s ,   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Ad v   Ap p l Sci     I SS N:   2252 - 8 8 1 4       Th era p eu tic  p o ten tia l  o f a lp h a - lin o len ic  a cid   fr o m  S a ch a   I n c h i o il in   ce r vica l c a n ce r :   …   ( A d i P erma d i )   967   p ar ticu lar ly   alp h a - lin o len ic  a cid   ( AL A)   [ 8 ] ,   [ 9 ] .  L in o le n ic  ac id   ( L A)   h as  b ee n   s h o wn   to   ex er t  an ti - ca n ce r   p r o p er ties   th r o u g h   v ar io u s   m ec h an is m s ,   in clu d in g   th e   i n d u ctio n   o f   ap o p to s is ,   in h ib i tio n   o f   ca n ce r   ce ll  p r o life r atio n ,   an d   en h a n ce m en t o f   th e  cy t o to x ic  ef f ec ts   o f   ch em o th er ap e u tic  ag en ts   [ 1 0 ] ,   [ 1 1 ] .   S e v e r a l   i n   vi v o   a n d   i n   v it r o   s t u d i e s   h a v e  i n d i ca t e d   t h a t   A L A   m a y   s e r v e   as   a   p o t e n ti a l  ad j u v a n t   o r   p r i m a r y   a g e n t   i n   c a n c e r   t r e a t m e n t   [ 1 2 ] ,   [ 1 3 ] .  S a c h a   I n c h i   is   u s u a l l y   u s e d   a s   a   s o u r c e   o f   e d i b l e   o i l   a n d   p r o t e i n .   O i l   f r o m   Sa c h a   I n c h i   s e e d s   is   k n o w n   t o   b e   r i c h   i n   u n s at u r a t ed   f a t t y   a c i d s   a n d   a n ti o x i d a n t s   [ 1 0 ] .   S a c h a   I n c h i   is   k n o w n   f o r   i t s   o i l ,   w h i c h   i s   h i g h l y   v a l u e d   f o r   i t s   h i g h   n u t r i t i o n a l   c o n t e n t .   T h e   o i l   c o n t a i n s   5 2 %   LA   a n d   3 4 %   LA ,  a   t o t a l   o f   8 5 %   e s s e n t ia l   f a t t y   a c i d s   [ 1 4 ] .   T h i s   o i l   is   o b t a in e d   t h r o u g h   c o l d   p r e s s i n g   a n d   i s   k n o w n   f o r   i t s   m o i s t u r i zi n g   e f f e c t   o n   t h e   s k i n .   I t   i s   li g h t   a n d   g o o d   f o r   d r y   s k i n ,   c o m p a r a b l e   t o   o l i v e   o i l   [ 1 5 ] .   S a c h a   I n c h i   h a s   p h y t o c h e m i c al s   t h a t   m a y   f u n c t i o n   as   a n   a n t i - c a n c e r .   T h e   o il   f r o m   S a c h a   I n c h i   s e e d s   c o n t a i n s   p h e n o l i c   c o m p o u n d s   a n d   a n t i o x i d a n t s   t h at   m a y   h e l p   p r e v e n t   a n d   t r e a t   c a n c e r .   I n   a d d i t i o n ,   t h e   p h e n o l i c  c o m p o u n d s   a n d   p h y t o s t e r o l s   in   S a c h a   I n c h i   s e e d s   h a v e   a ls o   b e e n   e v a l u a t e d   f o r   t h e i r   a n t i o x i d a n t   a c t i v i t y ,   w h ic h   i s   i m p o r t a n t   f o r   f i g h t i n g   o x i d a t i v e   s t r ess   o f t e n   a s s o c i at e d   wi t h   c a n c e r   [ 1 6 ] .   A L A ,   w i t h   t h e   c h e m i c a l   f o r m u l a   C 1 8 H 3 0 O 2 ,   h as   s e v e r a l   b e n e f i t s   i n   c a n c e r   t r e at m e n t .   I t  is   k n o w n   t h a t   AL A   r e d u c es   t u m o r   c e l l   v i a b i li t y   a n d   p r o l i f e r a t i o n   a n d   i n c r e a s es   a p o p t o s i s   i n   v a r i o u s   t y p es   o f   ca n c e r   c e l ls ,   i n c l u d i n g   n e u r o b la s t o m a   a n d   b r e a s t  c a n c e r .   I n   a d d i t i o n ,   w h e n   A L A   i s   c o m b i n e d   wi t h   c h e m o t h e r a p y   o r   r a d i o t h e r a p y   ( R T )   ag e n t s ,   it   e x h i b i ts   a  s y n e r g i s ti c   e f f e c t ,   w h i c h   e n h a n c e s   t h e   c y t o t o x i c   e f f e ct   o f   t h e   tr e a t m e n t .   A L A   al s o   f u n c t i o n s   a s   a   r a d i o s e n s i ti z e r ,   i n c r e a s i n g   c el l   s e n s it i v it y   [ 1 6 ] .   A L A   i s   r e p o r t e d   t o   h a v e   c a r d i o v a s c u l a r   p r o t e ct i o n ,   n e u r o n   p r o t e c t i o n ,     a n t i - c a n c e r ,   a n t i - o s t e o p o r o s i s ,   a n t i - i n f l a m m at o r y ,   a n d   a n t i o x id a n t   e f f e c ts .   A L A   h as   t h e   a b i l it y   t o   c o n t r o l   t h e   n o   s i g n a l   r e l e as e   a n d   l i p i d   p e r o x i d a t i o n   i n   t u m o r   t h e r a p y .   I n   ad d i t i o n ,   A L A  c a n   a c t i v at e   t h e  m i t o g e n - a c ti v a t e d   p r o t e i n   k i n a s e   ( MA PK )   s i g n al in g   p a t h w a y ,   w h i c h   c a u s e s   m it o c h o n d r i a l   d a m a g e   i n   c a n c e r   c ell s   [ 1 7 ] .   I n   r esear ch   o n   ce r v ical  ca n ce r ,   HeL a  ce lls   ar e  u s ed .   I n   th is   s tu d y ,   HeL a   ce lls   wer e  u s ed   to   s tu d y   th e   p o ten tial  m ec h an is m   o f   5 ,   6 ,   7 ,   an d   4' - tetr am eth o x y f l av o n e  ag ain s t  ca n ce r   ce lls ;  th is   s tu d y   s p ec if ically   co n ce n tr ated   o n   its   in h ib ito r y   ef f ec ts   th r o u g h   v ar io u s   s ig n a lin g   p at h way s   [ 1 8 ] .   W h en   ex p o s ed   to   n o n s en s e - m ed iated   m R NA  d ec a y   ( NM D)   an d   m o u s e  d o u b le   m in u te  2   h o m o lo g   ( MD M2 )   i n h ib ito r s ,   HeL a  c ells   s h o we d   s ig n if ican t  s y n er g is tic  ef f ec ts .   HeL a  ce lls   d ied ,   an d   th e  ce ll  cy cle  s to p p ed   with   th is   tr ea tm en t  [ 1 9 ] .  Sach a  I n ch i   s ee d   o il  h as  an ti - ca n ce r   ac tiv ity ,   ac co r d in g   to   r esear ch .   E x   v ivo ,   a   Sach a  I n ch i   o il - b ased   d iet  ( 1   g / k g   b o d y   weig h t  d aily   f o r   f o u r   we ek s )   r ed u ce d   tu m o r   m ass   an d   tu m o r   ce ll  p r o life r atio n   in   tu m o r - b ea r in g   W alk er   2 5 6   m ice.   I n   ad d itio n ,   p lasma   lev els  o f   g ly ce m ia,   tr ig ly ce r id es,  an d   in f lam m at o r y   cy t o k i n es  d ec r ea s ed ,   an d   l ip o p er o x id atio n   in c r ea s ed   in   W alk er   2 5 6   tu m o r   tis s u es.  Ad d itio n al  r esear ch   u s ed   1 ,   2 - d i m eth y lh y d r az in e  to   in d u ce   co lo n   ca n ce r   in   Sp r ag u e - Daw ley   an d   W is tar   r ats.  T h e  r esu lts   s h o wed   th at  th e  g r o u p   o f   r ats  g iv en   Sach a  I n c h i   s ee d   o il  at   a  d o s e  o f   1 5 0   μ L /( k g - da y )   s h o wed   a  1 2 . 5 %   in cr ea s e  in   th e   n u m b er   o f   in d iv id u als   p r o tecte d   f r o m   tu m o r   in d u ctio n   [ 2 0 ] ,   [ 2 1 ] .   T h is   s tu d y   was  co n d u cted   u s in g   th e   MT T   a s s ay   m eth o d .   MT T   ass ay   is   a  m eth o d   u s ed   to   ass ess   th e  cy to to x icity   o f   f r ee   d r u g s   an d   d r u g   co m b i n atio n s   ag ain s t H eL a  ce lls   [ 2 2 ] .  MT T   is   co n v er ted   t o   a  co lo r f u l,  in s o lu b le  f o r m az an   in s id e   th e  ce lls .   T h r o u g h   th e   u s e  o f   an   en z y m e - lin k e d   im m u n o s o r b en t   ass ay   ( E L I SA )   r ea d er   t o   m ea s u r e  th e   o p tica l  d en s ity   o f   th e   f o r m az an   p r o d u ct  at  4 9 5   n m ,   th is   p r o ce d u r e  en a b les th e  q u a n tific atio n   o f   liv e  ce lls   in   m u lti - well  m icr o p lates  [ 2 3 ] ,   [ 2 4 ] .   T h is   s tu d y   test s   p u r e  AL A   is o lated   f r o m   Sach a   I n c h i   o il   ag ain s t  HeL a  ce r v ical - ca n ce r   ce lls .   Un lik e   p r io r   wo r k   th at  u s ed   cr u d e  ex t r ac ts ,   we  ev alu ate  th e  p u r if ied   f atty   ac id   its elf ,   f in d in g   th at  it s   I C ₅₀  is   lo wer   th an   cisp latin ’ s ,   m ar k in g   it  as   th e  m o r e  p o ten t   ag en t.   W e  also   c o m p ar e   AL A  f r o m   two   o il  s o u r ce s ,   co n v en tio n al   p lan ts   v s .   th o s e  g r o w n   with   s h r im p - waste  f er tili ze r ,   an   an g le  n o t  y et  r e p o r ted .   T h e  r esu lts   p r o v id e  a n   ea r l y   f o u n d atio n   f o r   s af er ,   s u s tain ab le  n atu r al  ad ju v an ts   in   ce r v ical   ca n ce r   th er a p y .       2.   RE S E ARCH   M E T H O D   T h e  MT T   ass ay   u s in g   HeL a  ce lls   in clu d es  a  n u m b er   o f   im p o r tan t  s tep s .   I t  b eg in s   with   ce ll  an aly s is   an d   s ep ar atio n   an d   en d s   with   an   ass ay   u s in g   th e  MT T   m eth o d   to   ev a lu ate  v iab ilit y .   T o   d eter m in e  th e   m etab o lic  ac tiv ity   o f   th e  ce ll s ,   th e  p r o ce d u r e   in v o l v es  th e   s ep ar atio n   an d   em b ed d in g   o f   ce lls   in   a  9 6 - well  p late,   in cu b atio n   with   MT T   r e ag en t,  an d   m ea s u r em e n t o f   a b s o r b an ce   r esu lts .     2 . 1 .     M a t er ia ls   T h is   s tu d y   u s ed   two   Sach a  I n ch i   o il  s am p les.  “Sac h i”  o il  was  p r ess ed   f r o m   n u ts   g r o wn   in   B atan g ,   C en tr al  J av a:  1 0 0   g   o f   d r ie d ,   s h elled   b ea n s   wer e  m ec h an ically   p r ess ed   at  6 0   °C ,   allo wed   to   s ettle  f o r     2 - 3   d ay s ,   a n d   y ield ed   ab o u t  1 0 0   m L   o f   cr u d e  o il.  “Ali”  o i l,   s u p p lied   b y   C V .   I n o v asi  An ak   Neg er i   in   W est  J av a  s er v ed   as th e  s o u r ce   f o r   i s o latin g   AL A.     2 . 2 .     P r o ce du re s   2 . 2 . 1 .   L iqu id chro m a t o g ra p hy - hig h r eso lutio n m a s s   s pec t ro m et r y   a s s a y   T h e  an aly s is   m eth o d   u s es  liq u id   ch r o m at o g r a p h y - h ig h   r eso l u tio n   m ass   s p ec tr o m e tr y   ( L C - HR MS)   t o   id en tify   an d   c h ar ac ter ize  AL A  in   Sach a  I n ch i   o il  with   a  h ig h   d eg r ee   o f   ac cu r ac y ,   all o win g   d etec tio n   o f   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                      I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 1 4   I n t J Ad v   Ap p l Sci ,  Vo l.   14 ,   No .   3 ,  Sep tem b er   20 25 :   966 - 9 7 4   968   co m p o u n d s   in   lo w  c o n ce n tr ati o n s   as  well  as  d if f e r en tiatio n   b etwe en   s tr u ctu r ally   s im ilar   is o m er s .   L C - HR MS ,   wh ich   u s es  T h er m o   Scien tifi c' s   Van q u is h ™   UHPL C   B in ar y   Pu m p   an d   T h er m o   Scien ti f ic' s   Q  E x ac tiv e™   Hy b r id   Q u ad r u p o le - Or b itra p ™   Hig h   R eso lu tio n   Ma s s   Sp ec tr o m eter ,   with   h i g h - p er f o r m an ce   liq u id   ch r o m ato g r ap h y   ( HPLC)  u s in g   T h er m o   Scien tific ' s   Acc u co r e™   Ph en y l - Hex y l  co l u m n .   T h e  m o b ile  p h ases   we r e  m ass   s p ec tr o m etr y   ( MS ) - g r ad e   wate r   co n tain in g   0 . 1 %  f o r m ic  ac id   ( A)   a n d   MS - g r ad e  m et h an o l   co n tain in g   0 . 1 %  f o r m ic  ac id   ( B ) ,   ap p lied   u n d e r   a  g r ad ien t   elu tio n   p r o g r am   at  a  f lo w  r ate  o f   0 . 3   m L /m in .     T h e  g r a d ien t  was  in itiated   at   5 %  B ,   in cr ea s ed   lin ea r ly   to   9 0 %  with in   1 6   m in ,   h eld   f o r   4   m in ,   a n d   th e n   r etu r n ed   t o   th e  in itial  co n d iti o n   ( 5 %  B )   b y   2 5   m in .   T h e  i n jectio n   v o lu m e  was  3   µL .   Ma s s   s p ec tr o m etr ic   d etec tio n   was  p er f o r m e d   u s in g   elec tr o s p r ay   io n izatio n   ( E SI )   in   p o s itiv e  io n   m o d e,   with   a  ca p illar y   v o ltag e  o f   3 . 3 0   k V,   a  ca p illar y   tem p e r a tu r e  o f   3 2 0   ° C ,   an d   a  s ca n   r an g e  o f   6 6 . 7 – 1 0 0 0   m /z.   T h is   co m b in atio n   o f     u ltra - h ig h - p er f o r m a n ce   liq u id   ch r o m ato g r ap h y   an d   h ig h - r es o lu tio n   Or b itra p   m ass   s p ec tr o m etr y   en a b led   h ig h   s en s itiv ity ,   ac cu r ate  m ass   m e asu r em en t,  an d   co m p r e h en s iv e  ch ar ac ter izatio n   o f   b o th   tar g et  co m p o u n d s   an d   co m p lex   m eta b o lites .     2 . 2 . 2 .   I s o la t io n o f   a lph a - lin o lenic  a cid   T h e  s tu d y   u s es  f lash   ch r o m a to g r ap h y   to   is o late  alp h a - lin o len at e   f r o m   a  lar g e   s am p le   o f   1 . 2   g ,   an aly zin g   it  in   an   8 :2   r atio .   T h e  s am p le  is   d is s o lv ed   in   ch lo r o f o r m   f o r   1 5   m in u tes,   an d   p u r if icatio n   is   p er f o r m ed   u s in g   f lash   ch r o m ato g r ap h y   C - 8 5 0 .   T h e  f las h   ch r o m ato g r a p h y   co lu m n   is   ch ar ac ter ized   b y   a  s tatio n   an d   eq u ilib r atio n .   Sach a  I n ch i   o il  s am p les  wer e  ex tr ac ted   u s in g   th e  c o ld - p r ess in g   m eth o d ,   th e n   p u r if ied   b y   liq u id - liq u id   e x tr a ctio n   u s in g   n - h ex an e   s o lv en t.   L C - HR MS  an aly s i s   was  p er f o r m ed   u s in g   a   C 1 8   co lu m n   ( 1 0 0   m m × 2 . 1   m m ,   1 . 7   µm )   with   a  tem p er atu r e   o f   4 0   °C ,   a  f l o w  r ate  o f   0 . 3   m L / m in ,   an d   a   m o b ile   p h ase  o f   0 . 1 %  f o r m ic  ac id   i n   wate r :  m eth an o l  ( 3 0 :7 0   v / v ) .   Dete ctio n   was  p er f o r m ed   at  a  wav elen g th   o f     2 1 5   n m ,   with   p o s itiv e  io n   elec tr o s p r ay   io n izatio n   ( E SI+ )   m o d e  to   id en tif y   th e  s p ec if ic  m /z  o f   AL A .     2 . 2 . 3 .   Culture   H eLa   ce lls   T h e  MT T   ass ay   in v o lv es  u s in g   HeL a  ce lls   th at  r ea ch   7 0 - 8 0 %  co n f lu en ce   i n   a  7 5   cm 2   t - f lask .   T h e  ce lls   ar e   wash ed ,   in c u b ated   i n   a  3 7   ° C ,   5 %  C O 2   in c u b ato r ,   an d   th e n   tr an s f e r r ed   to   a   c en tr if u g atio n   tu b e.   C o m p lete  m ed ia  is   ad d ed ,   an d   th e  ce lls   ar e  s ep ar ated   an d   s u b cu ltu r e d   in   9 6 - well  p lates.  T h e  r em ain in g   ce lls   ar e  th en   s u b c u ltu r ed   in   7 5   c m 2   t - f lask s .   HeL a   ce lls   wer e   s ee d ed   in   9 6 - well  p lates  u s in g   1 0 0   μ L   o f   ce lls ,     a  5   tim es   d ilu tio n ,   a n d   2 , 0 0 0 , 0 0 0   ce lls   p er   well.   On e   p late  was  u s ed   to   test   th r ee   co m p o u n d s   an d   a  p o s itiv e  co n tr o l,  cisp latin ,   a n d   ce lls   wer e  in cu b ated   o v e r n ig h t i n   a  3 7   ° C ,   5 % C O 2   in cu b ato r .     2. 2 . 4 .   M T T   a s s a y   cy t o t o x icit y   t est   T h e  s ee d ed   ce lls   wer e  o b s er v ed   f o r   co n f lu e n cy ,   an d   if   9 0 %  co n f lu en cy   was  r ea ch ed ,   th ey   wer e   r ea d y   f o r   th e  MT T   ass ay .   T h r ee   test   co m p o u n d s   ( Sach i,  Al i,  an d   AL A)   wer e   v a r ied   in   co n ce n tr atio n     u s in g   s tr atif ied   d ilu tio n   in   Fig u r e  1 .   Ali  an d   S ac h i  wer e  u s ed   as  a  co n tr o l,  wh ile  A L A   was  u s ed   a s   a     p o s itiv e  co n tr o l.   T h e  9 6 - well  p late  was  in cu b at ed   with   MT T   s o lu tio n   d is s o lv ed   in   b asal  m ed ia  f o r   4   h o u r s ,   f o llo wed   b y   th e  ad d itio n   o f   test   s am p les.  Fo r m az an   cr y s tals   wer e  o b s er v ed   af ter   4   h o u r s ,   an d   d i s s o lv ed   with   2 0 %  s o d iu m   d o d ec y l  s u lf ate   ( SDS )   s to p   r ea ctio n   s o lu tio n .   Af ter   2 4 ,   4 8 ,   a n d   7 2   h o u r s   o f   tr ea tm en t  with   AL A,   1 0   µL   o f   MT T   s o lu tio n   ( 5   m g /m L   in   p h o s p h ate - b u f f er ed   s alin e   ( PB S) )   was  ad d e d   to   ea ch   we ll  an d   i n cu b ate d   f o r   4   h o u r s   at  3 7   °C .   T h e  m e d iu m   was  r em o v ed ,   an d   1 0 0   µL   d im eth y l  s u lf o x id e  ( DM SO)   was  ad d ed   t o   d is s o lv e  th e  f o r m az an   f o r m ed .   Ab s o r b an ce   was  m ea s u r e d   u s in g   an   E L I SA  r ea d er   at  a   wav elen g th   o f   5 7 0   n m   with   a   r ef er en ce   f ilter   o f   6 3 0   n m .           Fig u r e  1 .   Dilu tio n   p r o ce s s   o f   test   co m p o u n d   f o r   MT T   ass ay       3.   RE SU L T S AN D  D I SCU SS I O N   T h is   s tu d y   u tili ze d   AL A   i s o lated   f r o m   Sach a  I n ch i   o il  B ,   wh er e  th e  Sach a  I n ch i   p lan ts   wer e   f er tili ze d   u s in g   s h r im p   waste .   I n   co n tr ast,  Sach a   I n c h i   o i l  A  was  o b tain ed   f r o m   p la n ts   cu ltiv ated   u s in g   co n v en tio n al  f e r tili za tio n   m et h o d s .   T h e  c o m p ar is o n   b etwe e n   th ese  two   cu ltiv atio n   s y s tem s   aim ed   to   ev alu ate   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Ad v   Ap p l Sci     I SS N:   2252 - 8 8 1 4       Th era p eu tic  p o ten tia l  o f a lp h a - lin o len ic  a cid   fr o m  S a ch a   I n c h i o il in   ce r vica l c a n ce r :   …   ( A d i P erma d i )   969   th e  p o ten tial  ef f ec t  o f   o r g an ic  s h r im p   waste  f er tili ze r   o n   o il  q u ality .   T h is   d is tin ctio n   p r o v id es  v a lu ab le  in s ig h t   in to   s u s tain ab le  ag r icu ltu r al  p r ac tices a n d   th eir   im p ac t o n   b io ac tiv e  co m p o u n d   p r o d u ctio n .     3 . 1 .     Co m po un d identif ica t io n in  Sa cha   I nc hi   o il   T h e  L C - HR MS  an aly s i s   o f   Sach a  I n ch i   o il  s am p le  B   ( cu ltiv ated   with   s h r im p   waste  f er tili ze r )   id en tifie d   2 6   ac tiv e  co m p o u n d s ,   in clu d in g   AL A,   d ig ly ce r i d es ,  m an d en o l ,   an d   o th er   b io ac tiv e  lip id s .   AL A,   with   a  r eten tio n   tim e  o f   1 4 . 4 9 4   m in u tes an d   a  m o lecu lar   f o r m u la  o f   C 18 H 30 O 2 ,   was c o n f ir m ed   as th e  d o m in an t   an ti - ca n ce r   co m p o u n d   in   T ab l e  1 .   T h ese  f in d in g s   ar e  co n s is ten t  with   p r io r   s tu d ies  s h o win g   Sach a  I n ch i ’ s   r ich   u n s atu r ated   f atty   ac id   p r o f ile   an d   an tio x id an t   p o ten tial.   T h i s   co m p o u n d   s h o wed   a   r eten tio n   tim e,   wh ic h   is   th e   tim e  r eq u ir ed   t o   p ass   th r o u g h   th e  ch r o m ato g r ap h y   co lu m n ,   o f   1 4 . 4 9 2 .   T h ese  r esu lts   co n f ir m e d   th at  AL A  ( C 18 H 30 O 2 )   was  s u cc ess f u lly   id en tifie d   in   th e   Sach a  I n c h i   o i l sam p le.       T ab le  1 .   An aly s is   r esu lts   o f   an ti - ca n ce r   co m p o u n d s   in   Sach a  I n ch i   o il   S t r u c t u r e   N a me   F o r mu l a   R e t e n t i o n   t i m e   ( mi n )   P e r c e n t a g e   ( %)     A LA   C 18 H 30 O 2   14 . 494   4 . 4 5 2     DG  ( 1 8 : 2 ( 9 Z,   1 2 Z) / 1 8 : 3     ( 9 Z. 1 2 Z,   1 5 Z) / 0 : 0 )   C 39 H 66 O 5   19 . 657   20 . 09     1 ,   2 - D i l i n o l e o y l - sn - g l y c e r o l   C 39 H 68 O 5   20 . 202   15 . 48     M a n d e n o l   C 20 H 36 O 2   14 . 977   11 . 8     Tr e h a l o se - 6,   6 - d i b e h e n a t e   C 56 H 106 O 13   21 . 15   6 . 5 3 3     3 - [ ( 1 5 Z,   1 9 Z) - 1 1 ,   1 2 - d i h y d r o x y - 1 5 ,     19 - d o c t r i a c o n t a d i e n - 1 - y1] - 5 - me t h y l - 2 ( 5 H ) - f u r a n o n e   C 37 H 66 O 4   20 . 416   5 . 7 9 2     1 - o l e o y l - 2 - l i n o l e o y l - sn - g l y c e r o l   C 39 H 70 O 5   20 . 726   5 . 7 0 1     ( 2 2 R ,   2 3 R ,   2 4 S ) - 22 ,    23 - d i h y d r o x y e r g o st - 4 - en - 3 - o n e   C 28 H 46 O 3   18 . 5   3 . 7 8 7     2 - a mi n o - 1 ,   3 ,   4 - o c t a d e c a n e t r i o l   C 18 H 39 NO 3   9 . 9 3 3   3 . 5 4 8     1 - ( 9 Z - h e x a d e c e n o y l ) - 2 - ( 9 Z ,   1 2 Z - o c t a d e c a d i e n o y l ) - sn - g l y c e r o l   C 37 H 66 O 5   19 . 97   1 . 2 5 5       3 . 2 .     I s o la t io n  o f   a lph a - lin o le nic a cid   T o   i s o l a t e   A L A ,   t h i n - la y e r   c h r o m a t o g r a p h y   ( T L C )   w a s   f i r s t   c o n d u c t e d   t o   v i s u a l i z e   c o m p o u n d   s e p a r a t i o n .   F i g u r e   2   s h o ws   d is ti n c t   b a n d s   i n d i ca t i n g   t h e   p r es en c e   o f   m u l t i p l e   c o m p o u n d s ,   i n c l u d i n g   A L A ,   b as e d   o n   p o l a r i t y   d i f f e r e n c e s .   T h e   s e p a r a t i o n   w as   f u r t h e r   r e f i n e d   u s i n g   f l a s h   c h r o m a t o g r a p h y ,   a l l o w i n g   e f f i c i e n t  r e c o v e r y   o f   A L A .   T h e s e  m e t h o d s   e n s u r e d   h i g h   p u r i t y   o f   t h e  i s o la t e d   c o m p o u n d   b e f o r e   b io a s s a y   t es t i n g .   T h e  Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                      I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 1 4   I n t J Ad v   Ap p l Sci ,  Vo l.   14 ,   No .   3 ,  Sep tem b er   20 25 :   966 - 9 7 4   970   o p t i m i z e d   el u e n t   ( 8 0 %  n - h e x an e : 2 0 %   e t h y l  a c et a t e )   p r o v e d   ef f e c t i v e   i n   s e l e ct i v e l y   s e p a r at i n g   A L A ,   a s   s h o w n   i n   F i g u r e   2 .   F i g u r e   2 ( a )   s h o ws   t h e  p r o f i l i n g   w i t h   T L C   a n d   Fi g u r e   2 ( b )   s h o w s   t h e   p r o f i li n g   w i t h   T L C   r es u l ts .   T L C   s e p a r a t es   m i x t u r e   c o m p o n e n t s   b y   p o l a r i t y .   A   d r o p   o f   t h e   s a m p l e  i s   s p o tt e d   o n   a   s i l ic a - g e l   p l a t e ,   t h e   p l a t e   is   p l a c e d   i n   s o l v e n t ,   a n d   c a p i l l a r y   a c ti o n   c a r r i e s   t h e  s o l v e n t   u p w a r d .   N o n - p o l a r   c o m p o u n d s   t r a v e l   f a r ,   p o l a r   o n e s   l a g   n ea r   t h e   b as e lin e .   A p p l i e d   t o   S a c h a  I n c h i   o il ,   t h e   p l at e   s h o w s   d i s t i n c t   s p o t s   w h o s e   m at c h i n g   r e t e n t i o n   f a c t o r   ( Rf )   v a l u es   r e v e a l   t h e   o il ’ s   i n d i v i d u a l   c o n s t i t u e n t s   a n d   c o n f i r m   c o m p o s it i o n al   s i m i l a r it y   b e t w ee n   s a m p l es   [ 2 4 ] ,   [ 2 5 ] .  T h e  T L C   an aly s is   r ev ea ls   m u ltip le  co m p o n en ts   in   Sach a  I n ch i   o il,  in clu d in g   AL A     ( Fig u r e  3 ( a) ) .   T h e   s ep ar atio n   p r o f ile  o f   t h e  co m p o u n d   was  co n f ir m e d   u s in g   T L C   an d   f las h   c h r o m ato g r ap h y ,   as  p r esen ted   in   Fig u r e  3 .   T h e   T L C   r esu lt  ( Fig u r e  3 ( a ) )   s h o ws  d is tin ct  s p o ts   in d icatin g   t h e  p r esen ce   o f   th e   tar g et  co m p o u n d ,   wh ile  th e  f lash   ch r o m ato g r ap h y   p r o f ile  ( Fig u r e  3 ( b ) )   d em o n s tr ates su cc ess f u l iso latio n   with   a  clea r   f r ac tio n   p atter n .   Prio r   to   p u r if icatio n ,   th e  o il  s am p le  u n d er g o es  1 5   m in u te s   s o n icatio n   to   en h an ce   s ep ar atio n   ef f icien cy .   T h e  p u r if ied   f r ac tio n s   ar e  th en   v alid at ed   b y   T L C ,   co n f ir m in g   th e  s u cc ess f u l iso latio n   o f   tar g et  co m p o u n d s .   AL A  was  th e  co m p o u n d   f o u n d   in   th e  f l ash   ch r o m ato g r ap h y   an d   T L C   r esu lts ,   in d icatin g   th at  th e  s ep a r atio n   an d   an aly s i s   p r o ce s s   p er f o r m e d   s u cc ess f u lly   id en tifie d   th e   m ain   co m p o n en t  o f   t h e  s am p le.   T h e  s im ilar   r esu lts   f o r   b o th   m eth o d s   in d icate   th at  th e   s ep ar atio n   m eth o d   u s ed   was  well  o p tim ized   an d   s en s iti v e  an d   s elec tiv e  en o u g h   to   f in d   AL A.           ( a)   ( b )     Fig u r e  2 .   Pro f ilin g   with   ( a )   T L C   an d   ( b )   T L C   r esu lts           ( a)   ( b )     Fig u r e  3 .   R esu lt o f   ( a )   T L C   an d   ( b )   f lash   ch r o m ato g r ap h y       3 . 3 .     M T T   a s s a y   us ing   H eLa   ce lls   T h e  MT T   cy to to x icity   test   o n   HeL a  ce lls   r ev ea led   p r o n o u n ce d   d if f er en ce s   in   p o ten c y   am o n g   th e   s am p les.  C is p latin ,   th e  p o s itiv e  co n tr o l,   s h ar p ly   r e d u ce d   c ell  v iab ilit y   a b o v e   3 1   p p m ,   y ield in g   an   I C ₅₀  o f     1 6 . 7   p p m .   I n   co n tr ast,  Sach a  I n ch i   o il  m ain tain ed   h ig h   v iab ilit y   ac r o s s   th e  test ed   d o s e s ,   with   an   I C ₅₀  o f     2 2 5 . 9   p p m ,   in d icatin g   wea k   c y to to x icity .   Ali  o il,  h o we v er ,   lo wer ed   v iab ilit y   e v en   at   lo w  co n ce n tr atio n s   a n d   p r o d u ce d   an   I C ₅₀  o f   1 6 . 1   p p m ,   n ea r ly   m atch in g   cisp latin ’ s   ef f ec t.  T h e  m o s t  p o wer f u l  r esp o n s e  ca m e  f r o m   p u r if ied   AL A:  test ed   o v er   a  m u ch   n ar r o wer   co n ce n tr atio n   r an g e,   it  p r o d u ce d   th e  g r ea test   in h ib itio n ,   with   an   ex ce p tio n ally   lo w  I C ₅₀  ( ~9 ×1 0 ⁻²⁶  p p m ) ,   u n d e r s co r in g   its   s u p er io r   p o ten tial a s   an   an ti - ca n ce r   ag en t.   T h ese  r esu lts   co llectiv ely   s u p p o r t  th e  p o ten tial  o f   AL A  as   a  s tr o n g   an ti - ca n ce r   ag e n t  w ith   h ig h er   ef f ec tiv en ess   at  lo wer   co n ce n t r atio n s   co m p ar e d   to   b o th   c r u d e  o il  s am p les  an d   s tan d ar d   ch em o th er ap y   ag en ts .   Fig u r e  4   s h o ws  th e  v is u al  d if f er en ce s   in   ce ll  v iab ilit y   tr en d s   af f ir m   th e  r elativ e  cy to t o x ic   s tr en g th   o f   ea ch   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Ad v   Ap p l Sci     I SS N:   2252 - 8 8 1 4       Th era p eu tic  p o ten tia l  o f a lp h a - lin o len ic  a cid   fr o m  S a ch a   I n c h i o il in   ce r vica l c a n ce r :   …   ( A d i P erma d i )   971   test ed   co m p o u n d .   Fig u r e  4 ( a)   s h o ws  th e  co m p ar ativ e  cy t o to x icity   o f   c is p latin ,   Fig u r e  4 ( b )   s h o ws  th e  Sach i ,  Fig u r e  4 ( c)   s h o ws  th e  Ali,  a n d   Fig u r e  4 ( d )   s h o ws  th e  A L A  o n   HeL a  ce lls .   T h e  MT T   ass ay   elu ate s   th e  cy to to x icity   o f   AL A,   Sach a   I n ch i   o il  s am p le  A  ( Sach i ) ,   an d   s am p le  B   ( Ali)   o n   He L a  ce lls .   T h e  r esu lts   s h o wed   cisp latin   h ad   th e  lo west  I C 50   ( 1 6 , 7 3   p p m ) ,   in d ic atin g   s tr o n g   cy t o to x icity .   Sa m p le  S ac h i  h ad   th e   h ig h est  I C 50   ( 2 2 5 . 9   p p m ) ,   s h o win g   th e   wea k est  c y to t o x icity   ef f ec t,   wh ile  s am p le   Ali  ( I C 50 :   1 6 . 1 0   p p m )   a n d   AL A  ( I C 50 :  9 . 5 5 7 e+ 0 2 )   s h o w ed   s tr o n g er   in h ib itio n   at  lo we r   co n ce n tr atio n s ,   with   co n ce n tr atio n s ,   with   AL A   b ein g   th e  m o s t  p o ten t.  T h ese  f in d in g s   s u g g est  AL A  is   a  p r o m is in g   an ti - ca n ce r   c o m p o u n d   d u e  to   its   h ig h   ef f icac y   at  m in im al  c o n ce n tr at io n s .   Do s e - d ep en d e n t  cy to t o x icity   s h o ws  in   b a r   ch a r ts   in   Fig u r e   4 ( a)   cisp latin   ( c o n tr o l) – IC 50 =1 6 . 7 3   p p m ,   Fig u r e  4 ( b )   Sach i – IC 50 =2 2 5 . 9   p p m ,   Fig u r e   4 ( c )   Ali – IC 50 =1 6 . 1 0   p p m ,   an d   Fig u r e  4 ( d )   lin o len ic   ac id – IC 50 =9 . 5 5 7 e+ 0 2   p p m .   Data   ar e  p r esen ted   as  m ea n   s tan d ar d   d ev iatio n   ( SD) ,   with   d ec r ea s i n g   ce ll  v iab ilit y   as  co n ce n tr atio n   in c r ea s es .   T h e  I C 50   v alu es  in d icate   th e  co n ce n tr atio n   r eq u i r ed   to   in h ib it  5 0 %  o f   ce ll  v iab ilit y .   AL A  h as  a  lar g e  in h ib ito r y   ef f ec t  d esp ite  its   s m aller   co n ce n tr atio n   r an g e ,   as  s h o wn   b y   th e  I C 50   v alu e  in   Fig u r e  4 ,   wh ich   is   v er y   s m all.   T h is   v alu e   in d icate s   th at  e v e n   at  lo w  c o n ce n tr ati o n s ,   AL A   is   v er y   ef f ec tiv e  i n   in h ib itin g   ca n ce r   ce ll g r o wth .   T h e  r esu lts   o f   th e  ce ll v iab ilit y   test   an d   I C 50   in d icate   th at  A L A  h as  th e  p o ten tial   to   b e  a  v e r y   s tr o n g   an ti - ca n ce r   ag en t.           ( a)     ( b )         ( c)   ( d )     Fig u r e  4 .   E f f ec t o f   d if f e r en t c o m p o u n d s   o n   ce ll  v iab ilit y   o f   ( a)   co m p a r ativ e  cy to to x icity   o f ,   ( b )   Sach i ,   ( c)   Ali,  an d   ( d )   AL A  o n   HeL a  ce lls       Prio r   to   th e  MT T   ass ay ,   ce ll  cu ltu r e  o f   h elica l  ce lls   was  c ar r ied   o u t  to   e n s u r e  th at  th e  ce lls   c o u ld   g r o w  an d   d e v e lo p   o p tim ally   i n   an   a p p r o p r iate  cu ltu r e  en v ir o n m en t ,   as  s h o wn   in   Fig u r e  5 .   I n   th e   co n d itio n   o f   h elica l  ce lls   b ef o r e  s ee d in g ,   as  s h o wn   in   Fig u r e  5 ( a) .   T h e  ce lls   ar e  n u m er o u s   an d   s ca tter ed   all  o v er   th e   s u r f ac e  with   a  r o u n d   o r   o v al   s h ap e  ty p ical  o f   He L a  ce lls ,   in d icatin g   th at  th ey   ar e  h ea lth y   an d   h av e  n o t   ex p er ien ce d   f u ll  attac h m en t  to   th e  cu ltu r e  m ed iu m .   T h e n ,   th e  s ee d in g   p r o ce s s   is   ca r r ied   o u t  o n   HeL a  ce lls   in   Fig u r e  5 ( b ) ,   an d   it  ca n   b e  s ee n   th at  th e  ce lls   b eg in   to   ad ap t  an d   ad h er e  to   th e  cu lt u r e  m e d iu m .   Af t er   cu ltu r e,   HeL a  ce lls   wer e  test ed   b y   ad d in g   test   p ar am eter s   o r   s am p les.  Fig u r e  5 ( a)   is   a  n o r m al   HeL a  ce ll  with o u t    an y   tr ea tm en t.    Fig u r e  6   s h o ws  th e  HeL a  ce lls   with   ad d itio n   o f   Sach i  an d   Ali .   Fig u r e  6 ( a )   is   an   im ag e  o f   H eL a  ce lls   to   wh ich   th e  Sach i  s am p le  was  ad d ed ,   s h o win g   th at  th e   ce ll  d is tr ib u tio n   an d   m o r p h o lo g y   r em ain ed   th e   s am e   as  th e  u n tr ea ted   HeL a  ce lls .   T h er e  wer e  n o   s ig n if ican t  ch an g es  in   s h ap e  o r   s ig n s   o f   ce ll  d am ag e,   s u ch   as   ab n o r m al  r o u n d in g   o r   cl u s ter in g ,   wh ich   ar e  in d icativ e   o f   to x ic  ef f ec ts .   T h e  Sach i  ca n   b e  co n s id er ed   s af e  f o r   HeL a  ce lls   u n d er   th e  co n d itio n s   test ed   b ec au s e  n o   s ig n if ican t  cy to to x icity   o r   ad v er s e  ef f e cts  o n   ce ll  v iab ilit y ,   p r o life r atio n ,   o r   m o r p h o lo g y   wer e  o b s er v ed   d u r i n g   th e   e x p e r im en tal  p er io d ,   as sh o wn   in   F ig u r e  6 .   Fig u r e  6 ( a)   s h o ws  th at  S ac h i  A  o il  h as  n o   to x ic   ef f ec t  o n   HeL a  ce ll s ,   as  th e  ce lls   r em ain   v iab le   an d   m ai n tain   th eir   s tr u ctu r e  well.   HeL a  ce lls   s h o w  s ig n s   o f   ce ll  d ea th   o r   d a m ag e  af ter   tr ea tm en t  with   Sach i ,   as  s h o wn   in     Fig u r e  6 ( b ) .   T h e  ab s en ce   o f   n ee d le  cr y s tal  f o r m atio n   s u g g es ts   cy to to x icity ,   ca u s in g   a  d ec r ea s e  in   ce ll  d en s ity   an d   em p t y   ar ea s   ar o u n d   d am a g ed   ce lls ,   af f ec tin g   c ell  d ev elo p m en t a n d   s u r v iv al.   Fig u r e  7   s h o ws  th e  MT T   ass a y   r esu lts   r ev ea l  g r ad atio n s   o f   c o lo r   f o r   cisp latin ,   Sach i ,  Ali ,   an d   AL A  o n   HeL a  ce lls ,   with   cisp latin   s h o win g   th e  p alest  co lo r   ( in d i ca tin g   h ig h   ce ll  d ea th ) ,   wh ile   AL A  ex h ib its   th e   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                      I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 1 4   I n t J Ad v   Ap p l Sci ,  Vo l.   14 ,   No .   3 ,  Sep tem b er   20 25 :   966 - 9 7 4   972   m o s t  in ten s e  p u r p le  ( s u g g esti n g   lo wer   cy to to x icity ) .   Pre v i o u s   s tu d ies  in d icate   th at  AL A  in h ib its   HeL a  ce ll   g r o wth   b y   u p   to   5 4 . 3 %  th r o u g h   ap o p t o s is   an d   ce ll  cy cle  ar r est,  m ed iated   b y   in cr ea s ed   p r o - ap o p to tic  p r o tein   ex p r ess io n   ( b ax ,   ca s p ase - 3 )   an d   s u p p r ess io n   o f   th e  PI 3 K/Ak t/m T OR   p ath way .   T h ese  f in d in g s   s u g g est  AL A’ s   p o ten tial  as  a  n atu r al  a n ti - ca n ce r   ag en t,   eith er   al o n e  o r   as  a  ch em o th e r ap y   ad ju v an t,  t h o u g h   f u r th e r   in   vivo   s tu d ies ar e  n ee d ed   to   c o n f ir m   ef f icac y   an d   s af ety .   Nan o e m u l s io n   f o r m u latio n s   o r   co m b in at io n   th er ap ies co u ld   en h an ce   its   b io av aila b ilit y   an d   th er ap eu tic  p o ten tial.           ( a)   ( b )     Fig u r e  5 .   HeL a  ce lls   ( a)   b ef o r e  s ee d in g   p r o ce s s   an d   ( b )   af ter   s ee d in g   p r o ce s s           ( a)   ( b )     Fig u r e  6 .   HeL a  ce lls   with   ad d i tio n   of   ( a)   S ac h i a n d   ( b )   Ali           Fig u r e  7 .   MT T   ass ay   r esu lts       4.   CO NCLU SI O N   T h is   s tu d y   h ig h lig h ts   AL A  f r o m   Sach a  I n ch i   o il  as  a  p r o m is i n g   th er ap eu tic  ag en t  f o r   ce r v i ca l  ca n ce r   b y   in d u cin g   ap o p to s is   an d   i n h ib itin g   HeL a   ce ll  p r o life r a tio n .   MT T   ass ay   c o n f ir m e d   i ts   s tr o n g   cy to t o x ic   ef f ec t,  wh ile  L C - HR MS  v alid ated   its   an ti - ca n ce r   p o ten t ial,   s h o win g   lo wer   I C 50   v al u es  th an   cisp l atin ,   s u g g esti n g   h i g h er   ef f icac y   at   l o wer   d o s es.  T h ese  f in d in g s   s u p p o r t   AL A’ s   r o le   as  a   s af er ,   n atu r e - b ased   th er ap y   th at  ca n   b e   u s ed   as  a n   ad j u v an t  in   ch e m o th er a p y   t o   en h a n ce   tr ea tm en t  e f f ec tiv en ess   wh ile  r ed u cin g   s id e  ef f ec ts   an d   d r u g   r esis tan ce .   Fu tu r e  r esear ch   s h o u l d   f o cu s   o n   in   vivo   s tu d ies,  n an o em u ls i o n   f o r m u latio n   f o r   b etter   b io a v ailab ilit y ,   an d   c o m b in atio n   t h er ap y   with   c h em o th er ap eu tic  a g en ts   to   o p tim ize  it s   clin ical  p o ten tial   f o r   ce r v ical  ca n ce r   tr ea tm e n t.       ACK NO WL E DG E M E NT S    T h e  au th o r s   ex p r ess   th e ir   ap p r ec iatio n   to   C V .   I n o v asi  An a k   Neg er i  f o r   t h eir   v al u ab le  co llab o r atio n   th r o u g h o u t  th is   s tu d y .   Fu r th er m o r e,   we  d ee p ly   th an k   E B M  Scitech   f o r   th eir   s u p p o r t  in   f ac ilit atin g   th is   r esear ch   b y   p r o v id in g   ac ce s s   to   lab o r ato r y   f ac ilit ies,  wh ich   p lay ed   a  cr u cial   r o le  in   th e   p r o ject's su cc ess .   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Ad v   Ap p l Sci     I SS N:   2252 - 8 8 1 4       Th era p eu tic  p o ten tia l  o f a lp h a - lin o len ic  a cid   fr o m  S a ch a   I n c h i o il in   ce r vica l c a n ce r :   …   ( A d i P erma d i )   973   F UNDING   I NF O R M A T I O N    T h is   r esear ch   was  f u n d ed   b y   th e  Min is tr y   o f   E d u ca tio n ,   C u ltu r e,   R esear ch ,   an d   T ec h n o l o g y   o f   th e   R ep u b lic  o f   I n d o n esia  th r o u g h   th e  Stu d e n t  C r ea tiv ity   W ee k   ( PKM)   p r o g r a m ,   g r an t   n u m b er   2 5 4 6 /E 2 /DT . 0 1 . 0 0 /2 0 0 4 .       AUTHO R  CO NT RI B UT I O NS ST A T E M E N T   T h is   jo u r n al  u s es  th e  C o n tr ib u to r   R o les  T ax o n o m y   ( C R ed iT)   to   r ec o g n ize  in d iv id u al  au th o r   co n tr ib u tio n s ,   r ed u ce   au th o r s h ip   d is p u tes,  an d   f ac ilit ate  co llab o r atio n .       Na m e  o f   Aut ho r   C   M   So   Va   Fo   I   R   D   O   E   Vi   Su   P   Fu   Ad i Per m ad i   ✓   ✓   ✓   ✓   ✓   ✓     ✓   ✓   ✓       ✓     Mu tiar a  W ils o n   Pu tr i     ✓         ✓     ✓   ✓   ✓   ✓   ✓       Mu h am m ad   Ali A k b ar   ✓     ✓   ✓       ✓       ✓   ✓     ✓   ✓     C   :    C o n c e p t u a l i z a t i o n   M   :    M e t h o d o l o g y   So   :    So f t w a r e   Va   :    Va l i d a t i o n   Fo   :    Fo r mal   a n a l y s i s   I   :    I n v e s t i g a t i o n   R   :    R e so u r c e s   D   :   D a t a   C u r a t i o n   O   :   W r i t i n g   -   O r i g i n a l   D r a f t   E   :   W r i t i n g   -   R e v i e w   &   E d i t i n g   Vi   :    Vi su a l i z a t i o n   Su   :    Su p e r v i s i o n   P   :    P r o j e c t   a d mi n i st r a t i o n   Fu   :    Fu n d i n g   a c q u i si t i o n         CO NF L I C T   O F   I N T E R E S T   ST A T E M E NT     T h e  au t h o r s   d ec lar e   th at  th e r e  ar e   n o   f in a n cial  o r   p er s o n al   r elatio n s h ip s   t h at  co u ld   in ap p r o p r iately   in f lu en ce   th is   r esear ch .   No n e  o f   th e   au t h o r s   h a s   an y   o wn er s h ip   in ter ests ,   p aten ts ,   o r   f i n an cial  b en ef its   r elate d   to   th e  s u b ject  m atter   d is cu s s ed   in   th is   ar ticle.   T h e  co llab o r atio n   with   C V .   I n o v asi  An ak   Neg er i  was  lim ited   to   p r o v id i n g   r esear ch   m ater ials   an d   d id   n o t  in f lu e n ce   th e  s tu d y   d esig n ,   d ata  co llec tio n ,   an aly s is ,   o r   in ter p r etatio n .   All  au th o r s   h a v e  co n d u cted   th is   r esear ch   in d ep en d e n tly   an d   o b jectiv ely   t o   en s u r e  s cien tific   in teg r ity .   T h e r ef o r e ,   th e  a u th o r s   s tate  th at  th er e  is   n o   co n f lict o f   in ter est ass o ciate d   with   th is   p u b licatio n .       DATA AV AI L AB I L I T Y    T h e  d ata   s u p p o r tin g   th e   f in d i n g s   o f   th is   s tu d y   a r e  a v ailab l e  with in   t h e  ar ticle.   Ad d itio n al  r aw  d ata   ar e  av ailab le  f r o m   th e  c o r r esp o n d in g   au th o r ,   [ AP] ,   u p o n   r ea s o n ab le  r eq u est.       RE F E R E NC E S   [ 1 ]   L.   L i   a n d   Y .   S u ,   “ M e d i a t i o n   e f f e c t s   o f   se l f - c a r e   se l f - e f f i c a c y   a n d   h e a l t h - p r o m o t i n g   b e h a v i o r s  o n   f e a r   o f   c a n c e r   r e c u r r e n c e   a n d   p o s t t r a u m a t i c   g r o w t h   i n   p o st o p e r a t i v e   p a t i e n t s  w i t h   c e r v i c a l   c a n c e r :   a   c r o ss - sec t i o n a l   s t u d y , ”   Asi a n   N u rsi n g   R e se a rc h ,   v o l .   1 8 ,     n o .   5 ,   p p .   4 6 8 – 4 7 8 ,   D e c .   2 0 2 4 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . a n r . 2 0 2 4 . 1 0 . 0 0 3 .   [ 2 ]   S .   A r e g a   e t   a l . ,   “ D e t e r m i n i n g   t h e   e f f e c t   o f   l o n g   n o n - c o d i n g   R N A   ma t e r n a l l y   e x p r e ss e d   g e n e   3   ( l n c R N A   M EG 3 )   o n   t h e   t r a n s c r i p t o me   p r o f i l e   i n   c e r v i c a l   c a n c e r   c e l l   l i n e s,”   G e n o m i c s ,   v o l .   1 1 6 ,   n o .   6 ,   N o v .   2 0 2 4 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . y g e n o . 2 0 2 4 . 1 1 0 9 5 7 .   [ 3 ]   S .   M a s o o d ,   A .   S .   K u s h w a h ,   A .   Y a d a v ,   P .   S i n g h ,   K .   S r i v a s t a v a ,   a n d   M .   B a n e r j e e ,   “ ‘ A   st u d y   o n   so c i o - d e mo g r a p h i c - b a s e d   k n o w l e d g e   a n d   a w a r e n e ss   f o r   c e r v i c a l   c a n c e r   a mo n g   w o me n   f r o m   U t t a r   P r a d e s h ,   I n d i a , ’ ”   C l i n i c a l   Ep i d e m i o l o g y   a n d   G l o b a l   H e a l t h ,   v o l .   3 0 ,   N o v .   2 0 2 4 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . c e g h . 2 0 2 4 . 1 0 1 8 2 5 .   [ 4 ]   M .   H o n g b a o ,   “ H e L a   c e l l s  a n d   i mm o r t a l i t y , ”   C a n c e r   Bi o l o g y ,   v o l .   7 ,   n o .   3 ,   p p .   7 1 – 7 8 ,   2 0 1 7 ,   d o i :   1 0 . 7 5 3 7 / m a r sc b j 0 7 0 3 1 7 . 1 1 .   [ 5 ]   T.   Y a o   e t   a l . ,   “ C e r v i c a l   c a n c e r   S TE M   c e l l s, ”   C e l l   Pro l i f e r a t i o n ,   v o l .   4 8 ,   n o .   6 ,   p p .   6 1 1 – 6 2 5 ,   D e c .   2 0 1 5 ,   d o i :   1 0 . 1 1 1 1 / c p r . 1 2 2 1 6 .   [ 6 ]   M .   H i d j o ,   D .   M u k h e d k a r ,   C .   M a si mi r e mb w a ,   J.  Le i ,   a n d   L .   S .   A .   M ü h r ,   “ C e r v i c a l   c a n c e r   mi c r o b i o me   a n a l y si s :   c o m p a r i n g   H P V   1 6   a n d   1 8   w i t h   o t h e r   H P V   t y p e s,”   S c i e n t i f i c   Re p o rt s ,   v o l .   1 4 ,   n o .   1 ,   S e p .   2 0 2 4 ,   d o i :   1 0 . 1 0 3 8 / s 4 1 5 9 8 - 024 - 7 3 3 1 7 - 8.   [ 7 ]   Y .   Ti a n ,   S .   Z h a n g ,   a n d   F .   N i ,   “ T a r g e t i n g   g l u c o s e   m e t a b o l i sm  f o r   H P V - a sso c i a t e d   c e r v i c a l   c a n c e r :   a   sw e e t   p o i s o n , ”   Bi o m e d i c i n e   a n d   Ph a rm a c o t h e r a p y ,   v o l .   1 8 0 ,   N o v .   2 0 2 4 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . b i o p h a . 2 0 2 4 . 1 1 7 5 1 9 .   [ 8 ]   S .   A sh i q u e   e t   a l . ,   “ M u l t i   d r u g   r e si st a n c e   i n   c o l o r e c t a l   c a n c e r - a p p r o a c h e s  t o   o v e r c o me ,   a d v a n c e me n t s   a n d   f u t u r e   s u c c e ss , ”   Ad v a n c e s i n   C a n c e r  Bi o l o g y - M e t a st a si s ,   v o l .   1 0 ,   Ju l .   2 0 2 4 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . a d c a n c . 2 0 2 4 . 1 0 0 1 1 4 .   [ 9 ]   D .   S .   K i m  a n d   N .   J o o ,   “ N u t r i t i o n a l   c o mp o si t i o n   o f   S a c h a   I n c h i   ( Pl u k e n e t i a   V o l u b i l i s   L . )   a s  a f f e c t e d   b y   d i f f e r e n t   c o o k i n g   met h o d s, ”   I n t e rn a t i o n a l   J o u r n a l   o f   Fo o d   P ro p e r t i e s ,   v o l .   2 2 ,   n o .   1 ,   p p .   1 2 3 5 – 1 2 4 1 ,   J a n .   2 0 1 9 ,     d o i :   1 0 . 1 0 8 0 / 1 0 9 4 2 9 1 2 . 2 0 1 9 . 1 6 4 0 2 4 7 .   [ 1 0 ]   E.   L .   V e r a   e t   a l . ,   “ E v a l u a t i o n   o f   a n t i n u t r i e n t s,  n u t r i t i o n a l ,   a n d   f u n c t i o n a l   p r o p e r t i e s   i n   S a c h a   I n c h i   ( Pl u k e n e t i a   v o l u b i l i s  L )   c a k e   t r e a t e d   w i t h   h y d r o t h e r ma l   p r o c e sses , ”   H e l i y o n ,   v o l .   1 0 ,   n o .   1 7 ,   S e p .   2 0 2 4 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . h e l i y o n . 2 0 2 4 . e 3 7 2 9 1.   [ 1 1 ]   M .   S i l a l a h i ,   “ S a c h a   I n c h i   ( P l u k e n e t i a   v o l u b i l i s  L . ) :   i t s   p o t e n t i a l   a s  f o o d st u f f   a n d   t r a d i t i o n a l   me d i c i n e , ”   G S C   B i o l o g i c a l   a n d   Ph a rm a c e u t i c a l   S c i e n c e s ,   v o l .   1 8 ,   n o .   3 ,   p p .   2 1 3 – 2 1 8 ,   M a r .   2 0 2 2 ,   d o i :   1 0 . 3 0 5 7 4 / g sc b p s. 2 0 2 2 . 1 8 . 3 . 0 1 1 7 .   [ 1 2 ]   N .   K o d a h l   e t   a l . ,   “ L i p i d   c o m p o si t i o n   o f   t h e   A maz o n i a n   ‘ M o u n t a i n   S a c h a   I n c h i s’   i n c l u d i n g   P l u k e n e t i a   c a ro l i s - v e g a e   B u ss ma n n ,   P a n i a g u a   &  C . Té l l e z , ”   S c i e n t i f i c   R e p o rt s ,   v o l .   1 2 ,   n o .   1 ,   A p r .   2 0 2 2 ,   d o i :   1 0 . 1 0 3 8 / s 4 1 5 9 8 - 0 2 2 - 1 0 4 0 4 - 8.   [ 1 3 ]   E.   G .   C a s t i l l o   e t   a l . ,   “ C o mm u n i t y   i n t e r v e n t i o n s  t o   p r o m o t e   me n t a l   h e a l t h   a n d   s o c i a l   e q u i t y , ”   C u rr e n t   Psy c h i a t ry  Re p o r t s ,   v o l .   2 1 ,   n o .   5 ,   M a y   2 0 1 9 ,   d o i :   1 0 . 1 0 0 7 / s 1 1 9 2 0 - 0 1 9 - 1 0 1 7 - 0.   [ 1 4 ]   A .   V .   C . - P a z   e t   a l . ,   “ E n z y ma t i c   s y n t h e s i s  o f   s t r u c t u r e d   l i p i d s   f r o m   S a c h a   I n c h i   ( P l u k e n e t i a   v o l u b i l i s )   o i l   w i t h   c a p r i c   a c i d   v i a   a c i d o l y si s  r e a c t i o n   i n   s t i r r e d   t a n k   a n d   p a c k e d   b e d   mi n i   r e a c t o r s, ”   F o o d   B i o sc i e n c e ,   v o l .   5 8 ,   A p r .   2 0 2 4 ,     d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . f b i o . 2 0 2 4 . 1 0 3 7 6 9 .   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                      I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 1 4   I n t J Ad v   Ap p l Sci ,  Vo l.   14 ,   No .   3 ,  Sep tem b er   20 25 :   966 - 9 7 4   974   [ 1 5 ]   Y .   J.  C h a n ,   C .   S .   C h i u ,   P .   H .   Li ,   a n d   W .   C .   L u ,   “ E v a l u a t i o n   o f   d i f f e r e n t   r o a st i n g   c o n d i t i o n   o n   y i e l d ,   p h y s i c o - c h e mi c a l   c h a r a c t e r i s t i c s,   a n d   a n t i o x i d a n t   a c t i v i t y   o f   c o l d - p r e sse d   S a c h a   I n c h i   ( Pl u k e n e t i a   v o l u b i l i s )   o i l , ”   L w t ,  v o l .   2 0 3 ,   Ju l .   2 0 2 4 ,     d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . l w t . 2 0 2 4 . 1 1 6 3 4 3 .   [ 1 6 ]   N .   A .   R .   M .   R o d z i   a n d   L.   K .   L e e ,   “ S a c h a   I n c h i   ( P l u k e n e t i a   V o l u b i l i s   L . ) :   r e c e n t   i n si g h t   o n   p h y t o c h e mi s t r y ,   p h a r ma c o l o g y ,   o r g a n o l e p t i c ,   s a f e t y   a n d   t o x i c i t y   p e r s p e c t i v e s, ”   H e l i y o n ,   v o l .   8 ,   n o .   9 ,   S e p .   2 0 2 2 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . h e l i y o n . 2 0 2 2 . e 1 0 5 7 2 .   [ 1 7 ]   M .   I l a g h i   e t   a l . ,   “ T h e   p o t e n t i a l   r o l e   a n d   a p o p t o t i c   p r o f i l e   o f   t h r e e   me d i c i n a l   p l a n t   e x t r a c t s   o n   L e i s h ma n i a   t r o p i c a   b y   M T T  a ssa y ,   mac r o p h a g e   m o d e l   a n d   f l o w   c y t o me t r y   a n a l y s i s,”   Pa r a s i t e   Ep i d e m i o l o g y   a n d   C o n t ro l ,   v o l .   1 2 ,   F e b .   2 0 2 1 ,     d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . p a r e p i . 2 0 2 1 . e 0 0 2 0 1 .   [ 1 8 ]   Q .   Y o u ,   L.   L i ,   H .   D i n g ,   a n d   Y .   L i u ,   “ P r o t e o m i c s - b a s e d   n e t w o r k   p h a r mac o l o g y   a n d   m o l e c u l a r   d o c k i n g   r e v e a l   t h e   p o t e n t i a l   mec h a n i sms   o f   5 , 6 , 7 , 4 ′ - t e t r a m e t h o x y f l a v o n e   a g a i n s t   H e L a   c a n c e r   c e l l s, ”   H e l i y o n ,   v o l .   1 0 ,   n o .   2 0 ,   O c t .   2 0 2 4 ,     d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . h e l i y o n . 2 0 2 4 . e 3 8 9 5 1 .   [ 1 9 ]   Y .   Li   e t   a l . ,   “ S ma l l   m o l e c u l e   N M D   a n d   M D M 2   i n h i b i t o r s  s y n e r g i st i c a l l y   t r i g g e r   a p o p t o si s  i n   H e La   c e l l s , ”   Mo l e c u l e s  a n d   C e l l s ,  v o l .   4 7 ,   n o .   7 ,   Ju l .   2 0 2 4 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . m o c e l l . 2 0 2 4 . 1 0 0 0 7 9 .   [ 2 0 ]   I .   S i e r r a   e t   a l . ,   “ Tr a n scr i p t o mi c   a n a l y si s  a n d   m o l e c u l a r   d o c k i n g   r e v e a l   g e n e s  i n v o l v e d   i n   t h e   r e s p o n se   o f   A e d e s  a e g y p t i   l a r v a e   t o   a n   e sse n t i a l   o i l   e x t r a c t e d   f r o m   e u c a l y p t u s, ”   PL o S   N e g l e c t e d   T ro p i c a l   D i se a ses ,   v o l .   1 5 ,   n o .   7 ,   J u l .   2 0 2 1 ,     d o i :   1 0 . 1 3 7 1 / j o u r n a l . p n t d . 0 0 0 9 5 8 7 .   [ 2 1 ]   M .   M .   A .   N .   R a n j h a   e t   a l . ,   “ S o n i c a t i o n ,   a   p o t e n t i a l   t e c h n i q u e   f o r   e x t r a c t i o n   o f   p h y t o c o n st i t u e n t s :   a   s y st e ma t i c   r e v i e w , ”   Pr o c e sses ,  v o l .   9 ,   n o .   8 ,   A u g .   2 0 2 1 ,   d o i :   1 0 . 3 3 9 0 / p r 9 0 8 1 4 0 6 .   [ 2 2 ]   H .   M a j i d z a d e h   e t   a l . ,   “ P A M A M   d e n d r i mers   b a se d   c o - d e l i v e r y   o f   me t h o t r e x a t e   a n d   b e r b e r i n e   f o r   t a r g e t i n g   o f   H e L a   c a n c e r   c e l l s,”   T o x i c o l o g y   R e p o r t s ,   v o l .   1 3 ,   D e c .   2 0 2 4 ,   d o i :   1 0 . 1 0 1 6 / j . t o x r e p . 2 0 2 4 . 1 0 1 7 6 5 .   [ 2 3 ]   I .   D i n c h e v a ,   I .   B a d j a k o v ,   a n d   B .   G a l u n s k a ,   “ N e w   i n s i g h t s   i n   t h e   r e sea r c h   o n   b i o a c t i v e   c o m p o u n d s  f r o m   p l a n t   o r i g i n s   w i t h   n u t r a c e u t i c a l   a n d   p h a r ma c e u t i c a l   p o t e n t i a l   I I , ”   Pl a n t s ,   v o l .   1 4 ,   n o .   4 ,   F e b .   2 0 2 5 ,   d o i :   1 0 . 3 3 9 0 / p l a n t s1 4 0 4 0 5 0 0 .   [ 2 4 ]   M .   G h a s e mi ,   T .   T u r n b u l l ,   S .   S e b a s t i a n ,   a n d   I .   K e m p s o n ,   “ Th e   M TT   a ss a y :   u t i l i t y ,   l i mi t a t i o n s,  p i t f a l l s,   a n d   i n t e r p r e t a t i o n   i n   b u l k   a n d   s i n g l e - c e l l   a n a l y s i s, ”   I n t e r n a t i o n a l   J o u rn a l   o f   Mo l e c u l a r   S c i e n c e s ,   v o l .   2 2 ,   n o .   2 3 ,   N o v .   2 0 2 1 ,   d o i :   1 0 . 3 3 9 0 / i j ms2 2 2 3 1 2 8 2 7 .   [ 2 5 ]   C .   V .   Tr a n   a n d   J.  R .   V a r g a s,  “ D e t e r mi n a t i o n   o f   sp e c i f i c   a b so r b a n c e   ( A ¦ )   f o r   si x   p sy c h o a c t i v e   d r u g s  e n c o u n t e r e d   i n   f o r e n si c   t o x i c o l o g y , ”   J o u rn a l   o f   An a l y t i c a l   T o x i c o l o g y ,   v o l .   4 4 ,   n o .   6 ,   p p .   5 3 1 – 5 4 0 ,   Ju l .   2 0 2 1 ,   d o i :   1 0 . 1 0 9 3 / JA T/ B K Z 0 9 1 .       B I O G RAP H I E S O F   AUTH O RS       Adi   Per m a d i          is  c u rre n tl y   a   lec tu re r  a n d   re se a rc h e r  in   th e   m a ste r’s  d e g re e   o f  Ch e m ica l  En g i n e e rin g   a t  U n iv e rs it a s  Ah m a d   Da h lan   (UA D)  sin c e   2 0 2 0 .   His  re se a rc h   in tere sts   in c lu d e   n a n o m a teria ls,  fo o d ,   a n d   p h a rm a c e u ti c a l  tec h n o l o g y .   He   re c e iv e d   a   b a c h e lo r’s  d e g re e   in   c h e m ica l  e n g in e e rin g   f ro m   Un iv e rsitas   G a d jah   M a d a   (UG M )  i n   2 0 0 7 ,   th e n   a   m a ste r’s   d e g re e   in   Ch e m ica l  e n g in e e rin g   f ro m   In stit u t   Tek n o l o g i   Ba n d u n g   ( ITB)  in   2 0 1 0 ,   a n d   a   Do c to r   o f  Ch e m ica l  En g in e e rin g   (P h . D.)  fro m   Na ti o n a l  Taiwa n   Un i v e rsity   o f  S c ien c e   a n d   Tec h n o lo g y   (NTUST )  i n   2 0 1 7 .   Du r in g   h is  c a re e r  a s  a   lec tu re r,   h e   a lso   re c e iv e d   a   m a ste r’s  d e g re e   in   P h a rm a c y   fro m   Un iv e rsitas   Ah m a d   Da h lan   a n d   a   P r o fe ss io n a l   e n g in e e rin g   d e g re e   (Ir . )  fr o m   U n i v e r s i t a s   M u s l im   I n d o n e s i a   ( UM I ) .   H e   c a n   b e   c o n t a c t e d   a t   e m a i l :  a d i . p e r m a d i @c h e . u a d . a c . i d .         Mu tia r a   Wil s o n   P u tr i           is  a n   u n d e rg ra d u a te  st u d e n t   i n   C h e m ica l  En g in e e rin g ,   Ah m a d   Da h lan   Un i v e rsity   with   a   stro n g   p a ss io n   f o r  re se a rc h   a n d   in n o v a ti o n .   S h e   h a s   c o n d u c ted   si g n ifi c a n t  st u d ies   o n   S a c h a   In c h i ,   fo c u si n g   o n   it s   p o ten ti a l   a p p li c a ti o n s  a n d   b e n e fit s.  Dri v e n   b y   h e r  d e d ica ti o n   to   sc ien c e   a n d   e n v ir o n m e n tal   ste wa rd sh ip ,   s h e   is  c o m m it te d   to   p u rsu i n g   f u rth e r  re se a rc h   th a t   c o n tri b u tes   t o   g l o b a l  su sta i n a b i li ty   a n d   a d d re ss e s  p re ss in g   c h a ll e n g e s fo r  a   b e tt e r  fu tu re .   S h e   c a n   b e   c o n tac ted   a t  e m a il :  2 3 0 0 0 2 0 0 3 7 @w e b m a il . u a d . a c . i d .         Mu h a m m a d   Al i  Akb a r           is  a n   e n trep re n e u r  a n d   in n o v a to r  w h o   h a s  p ro v e n   h ims e lf  in   v a rio u s  in d u str ial  se c to rs.  As   a   sk il led   b u sin e ss m a n ,   h e   h a s  p r o d u c e d   a   ra n g e   o f  i n n o v a ti v e   p ro d u c ts u n d e r  v a ri o u s b ra n d s,  sp a n n in g   th e   fiel d s o f  h e a lt h ,   c o sm e ti c s,  fo o d   a n d   b e v e ra g e s,  a s  we ll   a s  a g ricu lt u re   a n d   li v e sto c k .   His  su c c e ss   in   c re a ti n g   a n d   d e v e l o p i n g   h ig h - q u a li ty   p ro d u c ts   h a s m a d e   a   p o siti v e   c o n tri b u ti o n   t o   b o th   so c iet y   a n d   i n d u stry .   I n   a d d it io n   t o   h is en trep re n e u rial   a c h iev e m e n ts,  he   is  a ls o   a n   a c ti v e   m e m b e r  o f  In d o n e sia n   Tr a d it io n a l  He rb a l   M e d icin e   P ra c ti ti o n e rs  As so c iatio n   ( AS P E TRI),   wh e re   h e   c o n tri b u tes   t o   t h e   a d v a n c e m e n t,   p re se rv a ti o n ,   a n d   m o d e rn iza ti o n   o f  In d o n e sia ’s  trad it io n a l  h e rb a l  m e d icin e .   Hi s  in v o l v e m e n t  in   ASP ET RI   re flec t s  h is  c o m m it m e n t  to   c o m b in i n g   h e rit a g e - b a se d   re m e d ies   with   sc ien ti fic  in n o v a ti o n ,   e n su rin g   t h a t  trad it io n a l  k n o wle d g e   re m a in s  re lev a n t   a n d   b e n e fici a l  in   to d a y ’s  m o d e rn   w o rld .   His   e x ten siv e   e x p e rien c e   a n d   d e e p   in sig h ts  in   m a n a g i n g   v a ri o u s  b u sin e ss   li n e s  e n a b le  h im  t o   c o n ti n u o u sly   i n n o v a te  a n d   p ro v i d e   c re a ti v e   so lu ti o n s  th a t  b e n e fit   c o n su m e rs  a c ro ss   m u lt ip le   se c to rs.   He   c a n   b e   c o n tac ted   a t   e m a il :   m u h . a li a k b a r@g m a il . c o m .     Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.