I nte rna t io na l J o urna l o f   P u bli H ea lt h Science   ( I J P H S)   Vo l.   15 ,   No .   3 Sep tem b er   20 26 ,   p p .   8 4 8 ~ 8 5 9   I SS N:  2 2 5 2 - 8 8 0 6 ,   DOI : 1 0 . 1 1 5 9 1 /ijp h s . v 15 i 3 . 2 7 0 0 2           848       J o ur na l ho m ep a g e h ttp : // ijp h s . ia esco r e. co m   Integ ra tive  fu ncti o na l anno tatio n of rheu ma toid a rth ritis risk   g enes using  a mul ti - da taba se bio inf o rma tics appro a ch       M uh a m m a d Nuh,  L o lita   F a c u l t y   o f   P h a r ma c y ,   U n i v e r s i t a s Ah mad   D a h l a n ,   Y o g y a k a r t a ,   I n d o n e s i a       Art icle  I nfo     AB S T RAC T   A r ticle  his to r y:   R ec eiv ed   J an   2 7 ,   2 0 2 6   R ev is ed   Ma r   7 ,   2 0 2 6   Acc ep ted   J u l 2 1 ,   2 0 2 6       Rh e u m a to id   a rth rit is  (RA)   is  a n   a u to imm u n e   d ise a se   in v o lv i n g   th e   in tera c ti o n   o g e n e ti c   a n d   imm u n o lo g ica fa c to rs.  G e n o m e - wid e   a ss o c iatio n   stu d ies   (G WAS h a v e   id e n ti fie d   m a n y   RA  risk   lo c i ,   b u t   th e   b i o lo g ica m e c h a n ism li n k in g   g e n e ti c   v a ri a ti o n   to   d ise a se   p a th o g e n e sis  a re   n o y e t   fu ll y   u n d e rsto o d .   Th is  stu d y   a ims   to   p rio r it ize   RA  c a n d id a te  g e n e th ro u g h   a   m u lt i - d a tab a se   b i o i n fo rm a ti c a p p ro a c h .   S NPs  sig n ifi c a n t ly   a ss o c iate d   with   RA  we re   o b tain e d   fro m   th e   G WAS   c a talo g ,   fo ll o we d   b y   l in k a g e   d ise q u il ib ri u m   (LD)   sc re e n in g   a n d   fu n c ti o n a a n n o tatio n   t o   id e n t ify   m isse n se   v a rian ts.  Th e   d a ta  we re   in teg ra ted   with   c is - e x p re ss io n   q u a n ti tati v e   trait  lo c i   (c is - e QTL)   i n fo rm a ti o n ,   g e n e   o n t o lo g y   (G O)  a n n o tatio n ,   a n d   Ky o to   En c y c lo p e d ia  o G e n e a n d   G e n o m e (KE GG m o lec u lar  p a t h wa y   m a p p in g .   G e n e with   a   to tal  sc o re   ≥2   we re   c las sified   a RA  risk   g e n e s.  to tal  o f   3 . 1 4 5   RA - sig n ifi c a n t   S NPs   we re   id e n t ifi e d ,   o f   wh ic h   5 8   we re   m isse n se   v a rian ts  t h a c o u l d   p o ten ti a ll y   a ff e c p ro tei n   f u n c ti o n .   T h e   i n teg ra ti o n   o f   c is - e QTL  a n d   fu n c ti o n a a n n o tati o n   re su lt e d   in   a   n u m b e o c a n d i d a te  g e n e with   t h e   h ig h e st  sc o re (sc o re   =   4 ),   wh e re   T Y K 2 IL 2 3 R ,   a n d   IR AK1   we re   id e n ti fie d   a p rio rit y   RA  g e n e in   th e   m a in   imm u n e   p a th wa y s,  n a m e ly   JA K S TAT  sig n a l in g ,   IL - 2 3 /T h 1 7   a x i s,  a n d   To ll - li k e   re c e p to r NF - κB  sig n a li n g .   Th e se   fin d i n g d e m o n stra te  th a t   th is  m u lt i - d a ta b a se - b a se d   b io i n fo rm a ti c s   a p p ro a c h   su c c e ss fu ll y   id e n t ifi e RA  c a n d id a te  g e n e wit h   str o n g   b io l o g ica l   re lev a n c e .   K ey w o r d s :   B io in f o r m atics   eQT L   KE GG   Miss en s S NPs   m u tatio n   R h eu m ato id   ar th r itis   T h is i a n   o p e n   a c c e ss   a rticle   u n d e r th e   CC B Y - SA   li c e n se .     C o r r e s p o nd ing   A uth o r :   L o lita    Facu lty   o f   Ph ar m ac y ,   Un iv e r s itas   Ah m ad   Dah lan   Yo g y ak ar ta,   I n d o n esia   E m ail:  lo lita@ p h ar m . u ad . ac . i d       1.   I NT RO D UCT I O N   R h eu m ato id   ar th r itis   ( R A)   is   ch r o n ic  a u to im m u n d is ea s th at  p r im ar ily   a f f ec ts   th jo in ts   an d   is   ch ar ac ter ized   b y   p e r s is ten s y n o v ial  in f lam m atio n ,   ca r ti lag d estru ctio n ,   b o n er o s i o n ,   an d   lo n g - ter m   f u n ctio n al  d is ab ilit y   [ 1 ] .   Glo b ally ,   th p r e v alen ce   o f   R is   ap p r o x im ately   1 7 . 6   m illi o n   c ases ,   with   h ig h er   in cid en ce   in   w o m en   th a n   in   m en ,   an d   th b u r d en   o f   d i s ea s in cr ea s es  with   ag [ 2 ] .   I n   I n d o n esia,  th e   p r ev alen ce   o f   R was  r ep o r te d   b y   R is k esd as  to   b 1 1 . 9 b ased   o n   m ed ical  d ia g n o s is   an d   in cr ea s ed   to   2 4 . 7 %   b ased   o n   clin ical  s y m p to m s .   T h is   co n f ir m s   th s ig n if ica n t im p ac t o f   R o n   th p u b lic  h ea lt h   s y s tem   [ 3 ] .   R is   c o m p l e x   d is e as w it h   a   s t r o n g   g e n e ti c   c o n t r i b u t i o n .   E v i d e n c e   f r o m   f a m i l y   a n d   twi n   s t u d i e s   s h o w s   t h a t   g e n e ti c   f a c t o r s   c o n tr i b u t e   s u b s t a n ti a ll y   t o   t h e   r i s k   o f   R A ,   w i t h   h e r i t a b il i t y   e s t i m at e d   t o   b e   a r o u n d   5 0 - 6 0 % .   T h i s   i n d i c a t es   t h at   g e n e t ic   v a r i a t i o n   p l a y s   a n   i m p o r t a n t   r o l e   i n   d e t e r m i n i n g   a n   i n d i v i d u a l' s   s u s c e p t i b il i t y   t o   R A   [ 4 ] - [ 6 ] .   G e n e t ic   f a c t o r s   n o t   o n l y   i n f l u e n c e   R A   r i s k   b u t   al s o   p l a y   a   r o l e   i n   v a r i o u s   s t a g e s   o f   p a t h o g e n e s is ,   i n c l u d i n g   i m p a i r e d   i m m u n e   t o l e r a n c e ,   a c t i v a ti o n   o f   a u t o r e a c t i v e   T   a n d   B   c e l ls ,   a n d   r e g u l a t i o n   o f   p r o i n f l a m m a t o r y   c y t o k i n e   p r o d u c t i o n .   F u r t h e r m o r e ,   g e n e t i c   v a r i a t i o n   a ls o   c o n t r i b u t es   t o   th e   h e t e r o g e n e i t y   o f   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci     I SS N:   2252 - 8 8 0 6       I n teg r a tive  fu n ctio n a l a n n o ta ti o n   o f rh eu m a to id   a r th r itis   r is k   g en es u s in g   a     ( Mu h a mma d   N u h )   849   R A   cl i n i ca l   m a n i f es t at i o n s   an d   d i f f e r e n c e s   i n   t h e   d o m i n a n t   i m m u n o l o g i c a l   p at h w a y s   a c t i v a te d   i n   e a c h   i n d i v i d u a l   [ 7 ] ,   [ 8 ] .   T h e r e f o r e ,   t h e   i d e n t i f i c at i o n   a n d   c h a r a c t er i z a t i o n   o f   R A   r is k   g e n e s   is   a   f u n d a m e n t a l   s t e p   i n   b r i d g i n g   g e n e t i c   a s s o c i at i o n   f in d i n g s   w i t h   a n   u n d e r s ta n d i n g   o f   t h e   m o l e c u l a r   m e c h a n is m s   o f   t h e   d i s e as e ,   as   w e ll  a s   r e v e a li n g   t h e   b i o l o g i c al   p a t h w a y s   u n d e r l y i n g   c h r o n i c   a u t o im m u n e   i n f l a m m a t i o n .   V a r i o u s   g e n o m i c   s t u d i e s ,   p a r t i c u l a r l y   g e n o m e - w i d e   a s s o c i a t i o n   s t u d i e s   ( G W A S ) ,   h a v e   i d e n t i f i e d   t h o u s a n d s   o f   s i n g l e   n u c l e o t i d e   p o l y m o r p h i s m s   ( S N P s )   a s s o c i a t e d   w i t h   a n   i n c r e a s e d   r i s k   o f   R A .   P r e v i o u s   s t u d i e s   h a v e   r e p o r t e d   t h a t   2 3   n o n - s y n o n y m o u s   S N P s   d i r e c t l y   a f f e c t   p r o t e i n   f u n c t i o n ,   i n c l u d i n g   r s 2 4 7 6 6 0 1   i n   t h e   P T P N 2 2   g e n e ,   r s 5 0 2 9 9 4 1   a n d   r s 2 2 3 0 9 2 6   i n   t h e   T N F A I P 3   g e n e ,   a n d   r s 3 4 5 3 6 4 4 3   i n   t h e   T Y K 2   g e n e   [ 9 ] .   A d d i t i o n a l l y ,   o t h e r   g e n e t i c   v a r i a t i o n s   i n v o l v e d   i n   T   c e l l   a c t i v a t i o n   a n d   r e g u l a t i o n ,   s u c h   a s   r s 1 8 1 7 5 8 1 0 0   i n   t h e   T N F S F 4   g e n e ,   r s 3 1 8 1 0 9 6   i n   t h e   C D 2 8   g e n e ,   a n d   r s 1 1 5 7 1 3 1 9   i n   t h e   C T L A 4   g e n e   [ 1 0 ] .   M e a n w h i l e ,   S N P s   r s 1 6 9 1 7 4 9 6   i n   t h e   3 - U T R   r e g i o n   o f   t h e   S E T 8   g e n e   h a s   b e e n   r e p o r t e d   t o   a c t   a s   a   p r e d i c t o r   o f   R A   r i s k   t h r o u g h   t h e   r e g u l a t i o n   o f   r e a c t i v e   o x y g e n   s p e c i e s   ( R O S )   a n d   i n t e r l e u k i n - 1 0   ( I L - 1 0 )   l e v e l s   [ 1 1 ] .   H o w e v e r ,   m o s t   o f   t h e   S N P s   i d e n t i f i e d   t h r o u g h   G W A S   a r e   l o c a t e d   i n   n o n - c o d i n g   r e g i o n s   o r   h a v e   f u n c t i o n a l   e f f e c t s   t h a t   a r e   n o t   y e t   f u l l y   u n d e r s t o o d ,   d o e s   t h e   r e l a t i o n s h i p   b e t w e e n   g e n e t i c   v a r i a t i o n   a n d   t h e   m o l e c u l a r   m e c h a n i s m s   o f   R A   i s   s t i l l   n o t   e n t i r e l y   c l e a r .   I n   ad d itio n   to   g e n etic  v ar iatio n ,   th e   p ath o g e n esis   o f   R i s   a ls o   in f lu en ce d   b y   th r eg u latio n   o f   g en e   ex p r ess io n   th r o u g h   ( cis - eQT L )   m ec h an is m s ,   ch an g es  in   p r o tein   s tr u ctu r an d   f u n ctio n   d u to   m is s en s e   m u tatio n s ,   an d   th in v o lv em e n o f   g en es  in   b i o lo g ical  p r o ce s s es  an d   m o lecu lar   s ig n alin g   p at h way s .   T h ese   f ac to r s   p lay   an   i m p o r ta n r o le   in   r e g u latin g   th im m u n e   r esp o n s an d   ch r o n ic   in f lam m ati o n   th at   ch ar ac ter iz e   R [ 1 2 ] ,   [ 1 3 ] .   Ho we v er ,   m o s s tu d ies  s till   ev alu ate  th ese  as p ec ts   s ep ar ately ,   wh eth e r   f r o m   th p er s p ec tiv o f   m is s en s m u tatio n s ,   g en ex p r ess io n   r eg u latio n ,   o r   f u n ctio n al  an n o tatio n   o f   GO  an d   Ky o t o   E n cy clo p ed ia  o f   Gen es  an d   Gen o m es  ( KE G G )   m o lecu lar   p ath wa y   an aly s is .   As  r esu lt,  ap p r o ac h es  th at  in teg r ate  th ese   v ar io u s   lay e r s   o f   g e n etic  in f o r m atio n   i n to   a   co m p r eh e n s iv an aly tical  f r am ewo r k   r em ai n   lim ited   [ 1 ] ,   [ 1 4 ] .   T h is   g ap   lim its   co m p r eh en s iv u n d e r s tan d in g   o f   th f u n ctio n al  r o le  o f   R r is k   g en es  an d   h in d er s   t h e   id en tific atio n   o f   m o lec u lar   p at h way s   an d   m o r p r ec is th er ap eu tic  tar g ets .   Ad v an ce s   in   b io in f o r m atics e n ab le  th in teg r atio n   o f   v a r io u s   p u b lic  d atab ases   s u ch   as  GW AS  c atalo g ,   Hap lo R eg ,   W eb Gestalt,  Un iPro t,  an d   KE GG  to   s y s tem atica lly   an d   m u ltid im en s io n ally   an n o tate  th f u n ctio n al   r is k   g e n es.  T h is   m u lti - d atab ase   ap p r o ac h   allo ws f o r   m o r co m p r eh en s iv m ap p in g   b etwe en   g en etic  v ar iati o n   an d   b i o lo g ic al  f u n ctio n ,   an d   h as  th p o ten tial to   r ev ea l k e y   im m u n o lo g ical  p ath way s   in v o lv e d   in   R p ath o g e n esis   [ 1 5 ] ,   [ 1 6 ] .   Desp ite  th g r o win g   n u m b er   o f   g en etic  s tu d ies  o n   r h eu m at o id   ar th r itis ,   s ev er al  im p o r tan r esear ch   g ap s   r em ain .   Mo s t   p r ev io u s   s tu d ies  h av e   f o c u s ed   o n   id e n tif y in g   R A - ass o ciate d   lo ci  t h r o u g h   GW AS  with o u t   s y s tem atica lly   in teg r atin g   f u n ctio n al  ev id e n ce   s u ch   as  m is s en s v ar ian ts ,   g e n e x p r ess io n   r e g u latio n ,   an d   p ath way   in v o lv em e n in to   a   u n if ied   p r io r itizatio n   f r am ewo r k   [ 1 4 ] Mo r e o v er ,   ex is tin g   b io in f o r m atics  s tu d ies  o f ten   ev alu ate  th ese  g en etic  lay er s   in d ep en d e n tly ,   lim itin g   th eir   ab ilit y   to   id en tify   g e n es  with   co n s is ten t   b io lo g ical  r ele v an ce   ac r o s s   m u ltip le  f u n cti o n al  d im e n s io n s   [ 1 5 ] .   I n   th I n d o n esian   co n tex t,  wh e r R A   p r e v alen ce   an d   d is ea s b u r d en   ar in cr ea s in g ,   an d   m o lecu lar   ep id em io lo g ical  d ata  r em ain   s ca r ce ,   th is   lack   o f   in teg r ativ g en etic  an aly s is   h am p er s   th tr an s latio n   o f   g en o m ic  f in d in g s   in to   p u b lic  h ea lth   s tr ateg ies,  in clu d in g   ea r ly   r is k   id en tific a tio n   an d   tar g et ed   in ter v e n tio n   p lan n in g   [ 3 ] .   T h er ef o r e,   an   ex p licit  in teg r ativ b io in f o r m atics  ap p r o ac h   th at   co n n ec ts   GW AS  s ig n als  with   f u n ctio n al   an n o tatio n   an d   p r io r itizatio n   is   n ee d ed   to   b r id g th is   g ap   a n d   p r o v id m o lecu lar   in s ig h ts   th at  ar r elev an n o o n l y   f o r   b io lo g ica u n d er s tan d in g   b u t   also   f o r   p u b lic  h ea lth   d ec is io n - m ak in g   i n   I n d o n esia.   B ased   o n   th is   b ac k g r o u n d ,   th is   s tu d y   aim s   to   p er f o r m   in te g r ated   f u n ctio n al   an n o tatio n   o f   R r is k   g en es  u s in g   m u lti - d atab ase  b io in f o r m atics  ap p r o ac h .   T h is   ap p r o ac h   c o m b in es  m is s en s SNPs   an aly s is ,   cis - eQT L ,   GO  an n o tatio n ,   an d   K E GG  m o lecu lar   p at h way   an al y s is .   I is   ex p ec ted   to   s tr en g th en   th u n d er s tan d i n g   o f   th f u n ctio n al  r o le  o f   R r is k   g en es  an d   s u p p o r th d ev elo p m e n o f   s cien tific   f r am ewo r k   f o r   m o r e   p r ec is m o lecu lar   tar g e t id en ti f icatio n .       2.   M E T H O D   T h is   s tu d y   is   m u lti - d atab ase  b io in f o r m atics  s tu d y   th at  aim s   to   i d en tify   an d   p r io r itize  R r is k   g en es   th r o u g h   in teg r ated   f u n ctio n al   an n o tatio n   u s in g   p u b lic  g en o m ic  d atab ases .   T h an aly s is   was  co n d u cted   b y   co m b in in g   in f o r m atio n   f r o m   m is s en s SNP s ,   cis - eQT L s ,   GO,   an d   Un iPro KB - KE GG  m o lecu lar   p ath way s   to   o b tain   m o r co m p r eh e n s iv b io lo g ical  u n d er s tan d in g   o f   R p ath o g en esis .     2 . 1 .     B io info r m a t ics  da t a   s o u rc es   T h is   s tu d y   is   b ased   o n   a   s ec o n d ar y   an aly s is   u tili zin g   v ar io u s   p u b licly   a v ailab le  b io in f o r m atics  d ata,   in clu d in g   th GW AS  c atalo g   ( h ttp s ://www. eb i.a c. u k /g was /) ,   Hap lo R e g   v er s io n   4 . 2   ( h ttp s ://p u b s . b r o a d in s titu te. o r g /m am m als/ h ap lo r eg / h ap lo r e g . p h p ) ,   W eb Gestalt  ( h ttp s ://www. web g estalt.o r g /) ,   an d   Un iPro t   KB - KE GG  ( h ttp s ://www. u n ip r o t.o r g / )   ( h ttp s ://www. k eg g . jp / ) ,   ac ce s s ed   o n   Octo b er   2 8 ,   2 0 2 5   as   th m ain   an aly s is .   T h p r o ce s s   o f   s ea r ch in g   f o r   b io in f o r m atic s   d ata  s o u r ce s   ca n   b s ee n   i n   Fig u r 1 .   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                          I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 0 6   I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci Vo l.  15 ,   No .   3 Sep tem b er   20 26 :   8 4 8 - 859   850   A l l   g e n o m i c   c o o r d i n a t e s   w e r h a r m o n i z e d   t o   t h e   h u m a n   r e f e r e n c e   g e n o m e   b u i l d   G R C h 3 7   ( h g 1 9 )   t o   e n s u r e   c o n s i s te n c y   a c r o s s   G W A S   s u m m a r y   s t a ti s ti cs ,   e Q T L   d a t a s et s ,   a n d   f u n c t i o n a l   a n n o t at i o n   r e s o u r c es .   T h G W A S   d at a   a n a l y ze d   i n   t h is   s t u d y   w e r d e r i v e d   p r i m a r ily   f r o m   p u b l i c l y   a v a i la b l e   s t u d i e s   c o n d u c t e d   i n   E u r o p e a n   a n d   E a s t   A s i a n   p o p u l a t i o n s ,   r e f le c t i n g   t h e   d o m i n an t   r e f e r e n c e   p o p u l a t i o n s   i n   la r g e - s c a l e   R A   g e n et i s t u d i es .   E x p r e s s i o n   q u a n t i ta t i v e   t r a i t   l o c i   ( e Q T L )   d a t a   we r e   o b t a i n e d   f r o m   p u b l i c l y   a v a il a b le   r e p o s i t o r i es   b as e d   o n   i m m u n e - r e l e v a n t   t is s u es   a n d   w h o l e   b l o o d ,   w h i c h   a r e   c o m m o n l y   u s e d   i n   a u t o i m m u n e   d i s e a s e   r es e a r c h .     2 . 1 . 1 .   Da t a   s elec t io n r a t io na l e   T h s elec tio n   o f   b io in f o r m ati cs  d atab ases   in   th is   s tu d y   was  b ased   o n   th eir   s cien tific   v alid ity ,   d ata   cu r atio n   s tan d ar d s ,   an d   r elev an ce   to   g e n etic  an d   f u n ctio n a an n o tatio n   o f   r h e u m ato id   ar th r itis .   T h GW AS   c atalo g   was  ch o s en   as  th p r i m ar y   s o u r ce   o f   g en eti v a r ian t s   b ec au s it  p r o v id es  s y s tem at ically   cu r ated ,   p ee r - r ev iewe d   ass o ciatio n s   with   s t an d ar d ized   s ig n if ican ce   th r es h o ld s ,   en s u r in g   r o b u s an d   r e p r o d u cib le  v ar ian t   s elec tio n .   Hap lo R eg   v 4 . 2   was  s elec ted   d u e   to   its   a b ilit y   to   i n teg r ate  lin k a g d is eq u ilib r i u m   in f o r m atio n   with   f u n ctio n al  an n o tatio n s ,   in clu d in g   m is s en s v ar ian ts   an d   cis - ex p r ess io n   q u an titativ tr ait  lo ci  ( cis - eQT L s ) ,   wh ich   ar e   ess en tial  f o r   ass ess i n g   r eg u lato r y   a n d   f u n ctio n al   ef f ec ts   o f   g en etic   v ar ia n ts .   W eb Gestalt  was  u s ed   f o r   g en o n to lo g y   ( GO)   an al y s is   b ec au s it  en ab les  s tati s tic ally   co n tr o lled   o v er - r e p r esen t atio n   an aly s is   ac r o s s   b io lo g ical  p r o ce s s es,  m o lecu l ar   f u n ctio n s ,   an d   ce llu lar   co m p o n en ts .   Un iPro tKB   an d   KE G wer s elec ted   f o r   p ath way   m ap p in g   as  th ey   p r o v id m an u all y   cu r ated   p r o t ein   an d   p ath way   in f o r m atio n ,   allo win g   r eliab le  in ter p r etatio n   o f   m o lecu la r   m ec h an is m s   in v o lv ed   i n   im m u n an d   in f lam m at o r y   s ig n alin g .   T h co m b i n ed   u s e   o f   th ese  d atab ases   en ab le s   co m p lem en tar y   an d   m u lti - lay er ed   ass ess m en o f   R r is k   g en es  th at  ca n n o t   b e   ac h iev ed   u s in g   s in g le  d ata  s o u r ce   [ 1 5 ] ,   [ 1 7 ] .     2 . 1 . 2 .   G WAS  c a t a lo g   T h GW AS  c atalo g   is   u s ed   as   th p r im ar y   s o u r ce   f o r   id en tif y in g   all  SNPs   th at  h av b ee n   r ep o r ted   to   b ass o ci ated   with   R A.   SN Ps   s ea r ch es  ar p er f o r m ed   u s in g   th k ey wo r d   “r h eu m ato id   a r th r itis ”  an d   f ilter ed   b ased   o n   th e   s tan d ar d   g en o m ic  s ig n if ican ce   th r esh o ld   ( p   <   5 ×1 0 ⁻⁸)   t o   e n s u r th at  o n ly   s tr o n g   a n d   r eliab le   ass o ciatio n   v ar ian ts   ar an aly ze d   f u r th e r .   T h is   s ig n if ican ce   th r esh o ld   is   in   ac co r d an c with   th o f f icial   GW AS   c atalo g   g u id elin es,  wh ich   ar u p d ate d   r eg u lar l y   an d   wid ely   u s ed   in   g en o m ic  s tu d ies  to   im p r o v d ata  co n s is ten cy   an d   r e p r o d u cib ilit y   [ 1 7 ] ,   [ 1 8 ] .     2 . 1 . 3 .   H a plo Reg   v er s io n 4 . 2   Hap lo R eg   v 4 . 2   is   u s ed   f o r   f u n ctio n al  an n o tatio n   o f   SNPs   o b tain ed   f r o m   th GW AS  c at alo g .   T h is   d atab ase  p r o v i d es in f o r m atio n   o n   v ar ian t ty p es,  in clu d in g   id en tific atio n   o f   m is s en s SNPs ,   as we ll a s   L D   d ata   to   ass es s   r elatio n s h ip s   b etwe e n   v ar ian ts   with in   g en etic  lo c u s .   I n   ad d itio n ,   Ha p lo R eg   is   u s ed   to   ev alu ate  th e   p o ten tial  r eg u lato r y   r o le  o f   SNPs   th r o u g h   r e g u lato r y   elem e n an n o tatio n ,   cis - eQT L   an aly s is ,   an d   m in o r   allele   f r eq u e n cy   ( MA F)  in f o r m atio n   r elev an t to   u n d e r s tan d in g   v ar i an t d is tr ib u tio n   in   p o p u latio n s   [ 1 9 ] ,   [ 2 0 ] .     2 . 1 . 4 .   WebG es t a lt   W eb Gestalt  wa s   u s ed   f o r   GO  an n o tatio n   a n aly s is   o f   id en tifi ed   ca n d id ate  g en es.  GO  an aly s is   co v er s   th r ee   m ain   ca teg o r ies,  n am ely   b io lo g ical  p r o ce s s ,   ce llu lar   co m p o n en t,  an d   m o lecu lar   f u n ctio n ,   to   id en tify   th e   d o m in an b io l o g ical  f u n ctio n s   o f   R r is k   g en es.  T h o v er - r ep r esen tatio n   an aly s is   ( OR A)   m eth o d   is   ap p lied   to   d eter m in s ig n if ica n tly   en r i ch ed   GO  ca teg o r ies,  en a b lin g   f u n ctio n al  i n ter p r etatio n   o f   g en es  in   th co n tex t   o f   R p ath o g e n esis   [ 2 1 ] ,   [ 2 2 ] .     2 . 1 . 5 .   UniPr o t   K B - K E G G   Un ip r o KB   is   u s ed   to   o b tai n   c u r ated   p r o tein   in f o r m atio n ,   in clu d in g   p r o tein   f u n ctio n ,   s tr u ctu r al  d o m ain s ,   a n d   p r o tein   in v o lv e m en in   s p ec if ic  b i o lo g ical  p r o ce s s es.  Data   f r o m   Un iPro KB   is   th en   m ap p ed   in to   m o lecu lar   p ath way s   u s in g   KE GG  to   id en tify   b io lo g ic al  an d   im m u n o l o g ical  p ath wa y s   r elev an to   R A.   T h is   p ath way   an aly s is   aim s   to   lin k   r is k   g en es to   s p ec if ic  m o lecu lar   m ec h an is m s   u n d er ly i n g   in f lam m atio n   an d   im m u n d y s r eg u latio n   in   R [ 2 3 ] - [ 2 5 ] .   I n teg r ativ m u lti - d at ab ase  b io in f o r m atics c an   b s e en   in   Fig u r 1 .     2 . 2 .     B io info r m a t ics a na ly s i s   2 . 2 . 1 .   Da t a   co llect io n a nd   qu a lity   co ntr o o f   v a ria nts   Gen etic  v ar ian ts   ass o ciate d   with   R A   wer co llected   f r o m   th GW A c atalo g   u s in g   th k ey wo r d   r h eu m ato id   ar th r itis . ”  All  SNPs   wer f ilter ed   b ased   o n   t h s tan d ar d   g en o m ic  s ig n i f ican ce   th r esh o ld   ( p   <   5 ×1 0 ⁻⁸)   to   e n s u r th at  o n l y   v ar ian ts   with   s tr o n g   ass o ciatio n s   wer an aly ze d   f u r th er .   T h ap p licatio n   o f   th is   th r esh o ld   aim s   to   m in im ize  t h p o s s ib ilit y   o f   f alse  p o s itiv es  d u to   lar g e - s ca le  g en o m ic  ass o ciatio n   tes tin g .   T h is   p r o ce s s   r esu lted   in   a   to ta o f   3 , 1 4 5   SNPs   th at  m et  th q u ality   cr iter ia  f o r   a n aly s is   in   th n ex t   s tag e.   All  g en s y m b o ls   wer v e r if ied   an d   s tan d ar d ize d   u s in g   th HUGO   Gen No m en clatu r C o m m ittee  ( HGNC)   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci     I SS N:   2252 - 8 8 0 6       I n teg r a tive  fu n ctio n a l a n n o ta ti o n   o f rh eu m a to id   a r th r itis   r is k   g en es u s in g   a     ( Mu h a mma d   N u h )   851   da tab ase  to   en s u r co n s is ten an d   ac cu r ate  g e n id en tific ati o n .   Dep r ec ated   s y m b o ls   an d   aliases   wer cr o s s - ch ec k ed   a n d   u p d ated   p r io r   to   d o wn s tr ea m   an aly s es  [ 2 6 ] ,   [ 2 7 ] .             Fig u r 1 .   I n teg r ativ m u lti - d at ab ase  b io in f o r m atics a n aly s is   o f   r h e u m ato id   a r th r itis   r is k   g e n es       2 . 2 . 2 .   L ink a g d is equil ibr iu m   ( L D)   s cr ee nin g   L s cr ee n in g   was  p er f o r m ed   u s in g   Hap lo R eg   v 4 . 2   with   co r r elatio n   co ef f icie n th r esh o ld   o f   r ²  >   0 . 8 .   T h is   s tep   aim s   to   r ed u ce   v ar ian r e d u n d an cy   o r ig in ati n g   f r o m   th s am g en etic  ass o ciati o n   s ig n al  in   a   s in g le  lo cu s .   B y   elim in atin g   h ig h ly   co r r elate d   SNPs ,   th an aly s is   f o cu s es  o n   th m o s r ep r esen tativ v ar ian ts   in   ea ch   L b l o ck .   T h is   s tr ate g y   is   c o m m o n ly   u s ed   in   th e   f in e - m ap p in g   p r o ce s s   to   p r io r itize  v ar ian ts   with   h ig h er   p o ten tial b io lo g ica l r el ev an ce   [ 1 8 ] ,   [ 2 8 ] .     2 . 2 . 3 .   F un ct io na a nn o t a t io n :   m is s ens m uta t io ns   a nd   m ino a llele  f re qu ency   ( M AF )   SNPs   r esu ltin g   f r o m   L s c r ee n in g   wer a n aly ze d   u s in g   Hap lo R eg   v 4 . 2   to   id e n tify   m is s en s v ar iatio n s ,   n am ely   n u cleo tid v ar ian ts   th at  ca u s am in o   ac id   ch an g es a n d   h av t h p o ten tia l to   d ir ec tly   im p ac t   p r o tein   s tr u ctu r a n d   f u n ctio n .   Fro m   th is   an aly s is ,   5 8   m is s en s S NPs   wer p r io r itized   as  ca n d id ates  with   d ir ec f u n ctio n al   im p ac t.  I n   a d d itio n ,   ea ch   SNPs   was  an n o tated   with   MA in f o r m atio n   in   Asi an ,   Af r ica n E u r o p ea n ,   a n d   Am er ican   p o p u latio n s   to   ev alu ate   cr o s s - p o p u latio n   allele  d is tr ib u tio n   an d   ass ess   v ar ian t   r elev an ce   ac r o s s   p o p u latio n s   [ 2 9 ] - [ 3 1 ] .     2 . 2 . 4 .   G ene  ex press io n r eg ula t io n a nn o t a t i o ( cis - eQ T L )     C is - e Q T L   a n a l y s i s   w a s   p e r f o r m e d   u s i n g   H a p l o R e g   v 4 . 2   t o   e v a l u a t e   t h e   p o t e n t i a l   i n f l u e n c e   o f   S N P s   o n   g e n e   e x p r e s s i o n   r e g u l a t i o n   a r o u n d   t a r g e t   l o c a t i o n s .   S N P s   s h o w i n g   a n   a s s o c i a t i o n   w i t h   c h a n g e s   i n   g e n e   e x p r e s s i o n   l e v e l s   w e r e   r e c o r d e d   a s   v a r i a n t s   w i t h   p o t e n t i a l   r e g u l a t o r y   f u n c t i o n s .   T h i s   s t a g e   i s   i m p o r t a n t   f o r   l i n k i n g   g e n e t i c   v a r i a t i o n   w i t h   t r a n s c r i p t i o n a l   r e g u l a t o r y   m e c h a n i s m s   t h a t   c o n t r i b u t e   t o   R A   p a t h o g e n e s i s   [ 3 2 ] ,   [ 3 3 ] .     2 . 2 . 5 .   G ene  o nto lo g y   ( G O )   a na ly s is   GO  an aly s is   was  p er f o r m ed   u s in g   W eb Gestal with   th OR ap p r o ac h .   T h an al y s is   co v er ed   th r ee   m ain   ca teg o r ies,  n am ely   b io l o g ical  p r o ce s s ,   ce llu lar   co m p o n en t,  a n d   m o lec u lar   f u n ctio n ,   to   id en tif y   th e   d o m in an t   b io lo g ical  f u n ctio n s   o f   ca n d i d ate  g e n es.  T h e   s ig n i f ican ce   th r esh o ld   was  s et  at   f alse  d is co v er y   r ate   ( FDR )   <   0 . 0 5   to   co n tr o f o r   er r o r s   d u to   m u ltip le  test in g .   T h r esu lts   o f   th GO  an aly s is   wer u s ed   to   s y s tem atica lly   in ter p r et  th b i o lo g ical  r o les o f   R r is k   g en e s   [ 3 4 ] .     2 . 2 . 6 .   M o lecula pa t hwa y   ma pp ing   K E G G   p a t hwa y   T h n ex ca n d id ate  g e n es  ar m ap p ed   in to   th KE GG  m o lecu lar   p ath way   u s in g   Un iPro tKB .   T h is   s tep   aim s   to   id en tify   b io l o g ic al  an d   im m u n o lo g ical  p ath wa y s   in v o lv ed   in   R p ath o g en e s is .   T h id en tifie d   p ath way s   in clu d e   m ajo r   im m u n s ig n alin g   p ath way s   s u ch   as  J AK S T AT ,   NF - κB,  to ll - lik r ec ep t o r ,   an d   in f lam m ato r y   cy to k i n p ath wa y s   k n o wn   t o   p lay   a   r o le  in   au t o im m u n r esp o n s es  [ 2 0 ] ,   [ 3 5 ] .     2 . 2 . 7 .   M ulti - da t a ba s inte g ra t io n a nd   RA  risk   g ene  prio rit iza t io n   All  an n o tatio n   r esu lts   ar in te g r ated   u s in g   th m u ltil ay er   g e n p r io r itizatio n   ap p r o ac h .   E ac h   g en is   ass ig n ed   s co r e   b ased   o n   ev i d en ce   s u p p o r t   f r o m   m u ltip le  a n n o tatio n   lay er s ,   n am ely   th p r esen ce   o f   m is s en s e   m u tatio n s   ( s co r e   1 ) ,   cis - eQT L   ev id en ce   ( s co r e   1 ) ,   in v o lv em en in   KE GG  p ath way s   ( s co r 1 ) ,   an d   GO   an aly s is   s ig n if ican ce   ( s co r 1 ) .   Gen es  with   t o tal  s co r e     2   ar class if ied   as  p r io r ity   R r i s k   g en es  t h at  h a v h ig h er   b io lo g ical  r elev a n ce   an d   p o ten tially   p lay   a n   im p o r tan r o le  in   R p ath o g en e s is .   T h in teg r ativ e   s co r in g   f r a m ewo r k   was  d esig n ed   to   p r i o r itize  g en es  s u p p o r ted   b y   c o n v e r g en f u n ctio n al  ev id en ce   ac r o s s   m u ltip le  an n o tatio n   lay e r s   r at h er   th an   r ely in g   o n   s in g le  d ata  s o u r ce .   E ac h   g en r ec ei v ed   o n s co r e   p er   f u n ctio n al   lay er ,   in clu d i n g   m is s en s v ar ian an n o tatio n ,   ci s - eQT L   ev id en ce ,   GO   en r ic h m en t,  an d   KE GG  p ath way   in v o lv em en t.   T h i s   e q u a l - w e i g h t   s c o r i n g   a p p r o a c h   w a s   c h o s e n   t o   r e d u c e   a n a l y t i ca l   b i a s   a n d   i m p r o v i n t e r p r e t a b i li t y .   G e n es   w i t h   h i g h e r   c u m u l a t i v e   s c o r e s   wer e   c o n s i d e r e d   h i g h e r - p r i o r i t y   c a n d i d a t e s   d u e   t o   c o n s i s t e n t   m u l ti - l a y e r   b i o l o g ica l   s u p p o r t   [ 3 6 ] ,   [ 3 7 ] .   T h e   m u l t i - d a t a b a s e   b i o i n f o r m a ti c s   c a n   b e   s e e n   i n   F i g u r e   2 .     Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                          I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 0 6   I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci Vo l.  15 ,   No .   3 Sep tem b er   20 26 :   8 4 8 - 859   852   2 . 2 . 8 .   P o t ent ia bia s   a nd   lim i t a t io ns   o f   s ec o nd a ry   da t a   T h is   s tu d y   is   s u b ject  to   s ev er al  p o ten tial  b iases   in h er en to   th u s o f   s ec o n d ar y   d ata  f r o m   p u b lic   d atab ases .   First,  G W AS  d ata  ar in f lu en ce d   b y   p o p u latio n   r ep r esen tatio n   b ias,  as  th m ajo r ity   o f   p u b lis h ed   s tu d ies  ar d er iv e d   f r o m   p o p u latio n s   o f   E u r o p ea n   an ce s tr y ,   wh ich   m ay   lim it  th g e n er aliz ab ilit y   o f   f in d in g s   to   o th er   p o p u latio n s ,   in cl u d in g   I n d o n esia.  Seco n d ,   f u n ctio n a an n o tatio n s   s u ch   as  cis - e QT L s   an d   p ath wa y   ass ig n m en ts   d ep en d   o n   d ata b ase  co v er ag an d   tis s u av ailab ilit y ,   p o ten tially   u n d e r r e p r esen tin g   d is ea s e - r elev an tis s u es  in   r h eu m ato id   ar th r itis .   T h ir d ,   lin k a g d is eq u ilib r iu m   p atter n s   m ay   v ar y   a cr o s s   p o p u latio n s ,   wh ich   ca n   af f ec t   v ar ian t   p r i o r itizatio n .   T o   m itig ate  th ese   lim itatio n s ,   th is   s tu d y   a p p lied   s tr in g en g en o m e - wid s ig n if ican ce   th r esh o ld s ,   lin k ag d is eq u ilib r i u m   f ilte r in g ,   an d   m u lti - lay e r   f u n ctio n al  in teg r atio n   t o   p r io r itize  g en es  s u p p o r ted   b y   co n s is ten ev id en ce   ac r o s s   in d ep en d en an n o tatio n   lay er s .   Nev er th eless ,   th f in d in g s   s h o u ld   b in ter p r eted   as  h y p o th esis - g en er atin g   an d   r eq u ir e   ex p er im en tal  v alid atio n   an d   p o p u latio n - s p ec if ic  s tu d ies to   co n f ir m   b io lo g ical  an d   p u b lic  h ea lth   r elev an ce   [ 2 7 ] ,   [ 2 8 ] .     2 . 2 . 9 .   Sta t is t ica a na ly s is     T o   ass ess   th r o b u s tn ess   o f   th p r io r itizatio n   r esu lts ,   a   s en s itiv ity   an aly s is   was  co n d u cted   b y   ev alu atin g   g en r a n k in g s   u n d er   alter n ativ s co r in g   s ce n ar io s ,   in clu d in g   p ar tial  ex cl u s io n   o f   in d iv id u al  an n o tatio n   lay e r s .   C o r p r io r it ized   g en es  r em ain ed   co n s is ten tly   r an k ed   a m o n g   th h ig h est - s co r in g   ca n d i d ates,   in d icatin g   t h at  th e   r esu lts   wer n o t   d r i v en   b y   s in g le  d ata  s o u r ce   b u r ef lecte d   s tab le  in teg r ativ s ig n als.  T h s tatis t ical  an aly s is   ca n   b s ee n   in   Fig u r 2 .           Fig u r 2 .   Mu l ti - d atab ase  in teg r ativ b io in f o r m atics wo r k f lo f o r   f u n ctio n al  a n n o tatio n   an d   p r io r itizatio n   o f   R r is k   g en es       3.   RE SU L T S AN D I SCU SS I O N   B i o i n f o r m a t i c s   a n a l y s i s   w a s   p e r f o r m e d   t o   i d e n t i f y   a n d   p r i o r i t i z e   g e n e   c a n d i d a t e s   a s s o c i a t e d   w i t h   R A   b a s e d   o n   g e n e t i c   e v i d e n c e   c h a r a c t e r i s t i c s   a n d   f u n c t i o n a l   a n n o t a t i o n .   T h e   a n a l y s i s   p i p e l i n e   i n c l u d e d   s c r e e n i n g   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci     I SS N:   2252 - 8 8 0 6       I n teg r a tive  fu n ctio n a l a n n o ta ti o n   o f rh eu m a to id   a r th r itis   r is k   g en es u s in g   a     ( Mu h a mma d   N u h )   853   S N P s   f r o m   t h e   G W A S   c a t a l o g ,   i d e n t i f y i n g   m i s s e n s e   v a r i a n t s ,   i n t e g r a t i n g   c i s - e Q T L   d a t a ,   G O   a n n o t a t i o n ,   a n d   m a p p i n g   m o l e c u l a r   p a t h w a y s   u s i n g   K E G G .   T h e s e   d a t a   l a y e r s   w e r e   i n t e g r a t e d   i n t o   a   l a y e r e d   p r i o r i t i z a t i o n   f r a m e w o r k   t o   i d e n t i f y   R A   r i s k   g e n e s   w i t h   c o n s i s t e n t   f u n c t i o n a l   e v i d e n c e .   G e n e   n o m e n c l a t u r e   a n d   p r i o r i t i z a t i o n   s c o r e s   w e r e   a p p l i e d   c o n s i s t e n t l y   a c r o s s   t h e   m a i n   t e x t ,   t a b l e s ,   a n d   f i g u r e s   t o   e n s u r e   c o h e r e n c e   i n   d a t a   p r e s e n t a t i o n .     3 . 1 .        Resul t s   3 . 1 . 1 .   SNPs  s cr ee nin g   a nd   m is s en s v a ria nt  identif ica t io n   t o ta o f   3 , 1 4 5   SNPs   s ig n i f i c an t ly   ass o c iat e d   wi th   R ( p   <   5 × 1 0 ⁻⁸ )   we r id e n ti f ie d   f r o m   t h e   GW AS  C atal o g .   Ne x t ,   L D   s c r e en in g   was  p e r f o r m e d   u s i n g   Ha p l o R e g   v 4 . 2   wit h   a   t h r esh o l d   o f   r ²  0 . 8   t o   r e d u c g e n e tic   s ig n al   r ed u n d a n c y .   T h is   s t ep   p r o d u ce d   a   n u m b e r   o f   r e p r ese n ta ti v e   v a r ia n ts   th at   w er e   t h e n   f u n cti o n al ly   an n o ta te d .   F u n cti o n a an n o ta ti o n   i d e n t if ie d   5 8   m is s en s S NP s   t h at   c o u l d   p o te n t ial ly   c au s a m i n o   a ci d   ch a n g es  in   t ar g e t   p r o te in s .   T h ese   m i s s en s v ar ia n ts   we r d is tr ib u ted   ac r o s s   v ar io u s   c an d i d ate   g e n es   co m m o n l y   ass o cia te d   w it h   im m u n f u n ct io n ,   i n f la m m ati o n ,   a n d   ce ll u la r   r es p o n s r eg u l ati o n .   Al g e n es  c o n t ai n i n g   t h es e   m is s e n s e   SNPs   w er co m p il ed   as   a   b asis   f o r   f u r th er   a n al y s is   an d   s y s t e m ati ca ll y   s u m m ar i ze d   in   T a b le   1 .     3 . 1 . 2 .   I nte g ra t io n o f   cis - eQ T L   a nd   ca nd ida t g ene  identif ica t io n   I n t eg r atio n   o f   v a r ian d ata  wi th   cis - eQT L   was  p e r f o r m ed   u s in g   Hap lo R eg   v 4 . 2   t o   s tr e n g th en   th b io lo g ical  r elev an ce   o f   ca n d id ate  g en es.   T h is   ap p r o ac h   e n ab led   th e   id en tific atio n   o f   SNPs   with   th e   p o ten tial  to   alter   p r o tein s   an d   g en r e g u lato r s .   T h r esu lts   s h o we d   th at  5 2   ca n d id ate  g en es  ac h i ev ed   an   in teg r ativ e   s co r   2 ,   in d icatin g   s u p p o r t   f r o m   m u ltip le  la y er s   o f   f u n cti o n al  ev i d en ce .   s m all  n u m b er   o f   g e n es  s h o wed   lo wer   s co r es  d u e   to   lim ited   an n o tatio n   s u p p o r t.  T h d is tr ib u tio n   o f   s co r es  a n d   f u n ctio n al  an n o tatio n s   ar e   p r esen ted   in   d etail  in   T ab le  1 .   Alth o u g h   s u b s tan tial  n u m b er   o f   g en es  wer id en tifie d   t h r o u g h   m is s en s v ar ian an aly s is   alo n e,   in teg r atio n   with   cis - eQT L   d at r ev ea led   th at  g e n es  s u p p o r te d   b y   b o th   s tr u ctu r al  v a r iatio n   an d   tr an s cr ip tio n al   r eg u latio n   e v i d en ce   ac h iev e d   h ig h er   p r io r itizatio n   s co r es.  T h is   f in d in g   in d icate s   th at  v ar ia n ts   in f lu en cin g   b o th   p r o tein   s tr u ctu r a n d   g e n e x p r ess io n   h av g r ea ter   b io lo g ical  s ig n if ican ce   in   R A.   C o m p ar ed   t o   g en es   s u p p o r ted   b y   o n ly   s in g le  a n n o tatio n   lay e r ,   th ese  v ar i an ts   ar m o r e   co n s is ten tly   ass o ciate d   with   R A - r elate d   b io lo g ical  r elev a n ce .     3 . 1 . 3 .   F un ct io na cla s s if ica t io n ba s ed  o n G O   Gen o n to l o g y   an aly s is   was  p er f o r m ed   to   class if y   th f u n ctio n s   o f   ca n d id ate  b io lo g ical   g en es  in to   th r ee   m ain   ca teg o r ies,  n am el y   b io lo g ical  p r o ce s s es,  ce llu lar   co m p o n e n ts ,   an d   m o lecu lar   f u n ctio n s .   T h e   an n o tatio n   r esu lts   s h o th at  s o m ca n d id ate  g en es  ar in v o lv ed   i n   p r o ce s s es  r elate d   to   im m u n e   r esp o n s e   r eg u latio n ,   s ig n al  tr a n s d u ctio n ,   an d   in te r ce llu lar   c o m m u n icatio n .   At  th is   s tag e,   GO  an n o tatio n   is   u s ed   as  a   d escr ip tiv f u n ctio n al  class if icatio n   with o u m ec h a n is tic  in ter p r etatio n .   All  GO  an n o tatio n   r esu lts   ar s u m m ar ized   as p ar o f   th in te g r ativ g en e   s co r an d   ar s h o wn   in   T ab le  1 .     3 . 1 . 4 .   M o lecula pa t hwa y   ma pp ing   us i ng   K E G G   Mo lecu lar   p ath way   m ap p in g   was  p er f o r m ed   b y   lin k in g   ca n d id ate  g en es  to   th KE GG  d atab ase  v ia  Un iPro tKB .   T h is   an aly s is   id en tifie d   th e   in v o l v em en t   o f   n u m b er   o f   g en es  i n   m o lecu lar   p ath way s   r elate d   t o   cy to k in s ig n alin g ,   i n n ate  im m u n r esp o n s e,   im m u n ce ll  ac tiv atio n ,   a n d   an tig e n   p r esen tatio n .   T h KE GG  m ap p in g   r esu lts   in   th is   s ec tio n   ar p r esen ted   d escr ip tiv ely   as   p ar o f   th in teg r ativ s co r a s s es s m en t,  with o u f u r th er   b io l o g ical  in ter p r etati o n .   C o m p lete  in f o r m atio n   r e g ar d in g   th e   in v o lv em en t   o f   ca n d id ate  g en es  in   KE GG  p ath way s   is   p r esen ted   in   T ab le  1 .     3 . 1 . 5 .   I dentif ica t io n o f   p rio ri t y   RA  risk   g enes   B a s e d   o n   t h e   r e s u l t s   o f   c o m b i n i n g   a l l   p a r a m e t e r   a n a l y s e s ,   c a n d i d a t e   g e n e s   w e r e   r a n k e d   t o   i d e n t i f y   g e n e s   w i t h   t h e   m o s t   c o n s i s t e n t   i n v o l v e m e n t .   T h e   r a n k i n g   r e s u l t s   s h o w e d   t h a t   T Y K 2 I R A K 1 ,   a n d   I L 2 3 R   h a d   t h e   h i g h e s t   i n t e g r a t i v e   s c o r e s   ( s c o r e   =   4 ) ,   r e p r e s e n t i n g   i n v o l v e m e n t   i n   a l l   m a j o r   a n a l y s i s   p a r a m e t e r s .   B a s e d   o n   t h e   i n t e g r a t i v e   s c o r i n g   r e s u l t s ,   T Y K 2 ,   I L 2 3 R ,   a n d   I R A K 1   w e r e   i d e n t i f i e d   a s   p r i o r i t y   R A   r i s k   g e n e s   w i t h   t h e   h i g h e s t   t o t a l   s c o r e s .   T h e s e   g e n e s   s h o w e d   c o n s i s t e n t   s u p p o r t   a c r o s s   a l l   f u n c t i o n a l   a n n o t a t i o n   l a y e r s ,   i n c l u d i n g   m i s s e n s e   v a r i a n t s ,   c i s - e Q T L   e v i d e n c e ,   G O   a n n o t a t i o n ,   a n d   K E G G   p a t h w a y   i n v o l v e m e n t .   A   s u m m a r y   o f   t h e   f u n c t i o n a l   r o l e s ,   m o l e c u l a r   m e c h a n i s m s ,   a n d   i m m u n e - r e l a t e d   p a t h w a y s   a s s o c i a t e d   w i t h   t h e s e   p r i o r i t i z e d   g e n e s   i s   p r e s e n t e d   i n   T a b l e   2 .       3 . 2 .     Dis cus s io n   T h is   s tu d y   ap p lied   m u lti - d atab ase - b ased   b io in f o r m atics  ap p r o ac h   to   p r i o r itize  R ca n d id ate  g en es  b ased   o n   co m b in atio n   o f   m is s en s SNP s ,   cis - eQT L   r eg u latio n ,   GO  a n n o tatio n ,   an d   KE GG  m o lecu lar   p ath way   m ap p in g .   T h is   ap p r o ac h   en a b les  th e   id en tific atio n   o f   g en e s   th at   ar e   n o t   o n ly   g en etica lly   ass o ciate d   b u also   s h o c o n s is ten f u n ct io n al  in v o l v em en i n   k ey   b io l o g ical  p ath way s   o f   th e   im m u n s y s tem .   B ased   o n   th h ig h est  in teg r ativ s co r e,   TY K 2 I L2 3 R ,   an d   I R A K 1   wer id en tifie d   as  p r io r ity   R r i s k   g en es  an d   b ec am e   th m ain   f o c u s   o f   th e   d is cu s s io n .   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                          I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 0 6   I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci Vo l.  15 ,   No .   3 Sep tem b er   20 26 :   8 4 8 - 859   854   T ab le  1 .   Mu ltil ay er   f u n ctio n al   an n o tatio n   an d   i n teg r ativ s co r in g   o f   ca n d i d ate  R r is k   g en es   No   G e n e   M i ss e n s e   c i s - e Q T L   B i o l o g i c a l   p r o c e ss   C e l l u l a r   c o mp o n e n t   M o l e c u l a r   f u n c t i o n   K EG G   To t a l   s c o r e   1   H L A - F   1   1   0   0   0   1   3   2   Z N F6 7 9   1   0   0   0   0   0   1   3   S MA D 3   1   0   0   0   0   1   2   4   REV3 L   1   1   0   0   0   0   2   5   H L A - C   1   1   0   0   0   1   3   6   PO M1 2 1 L 2   1   1   0   0   0   1   3   7   T RAF3 I P 2 - A S 1   1   1   0   0   0   1   3   8   U BD   1   0   0   0   0   0   1   9   I RAK 1   1   1   1   0   0   1   4   10   I FI H 1   1   0   0   0   0   1   2   11   FC G R 2 A   1   1   0   0   0   1   3   12   I C O S L G   1   1   0   0   0   1   3   13   S T ATU S 4   1   0   0   0   0   0   1   14   RI N 3   1   1   0   0   0   0   2   15   I L 6 R   1   1   0   0   0   1   3   16   Z PBP2   1   1   0   0   0   0   2   17   G S D MB   1   1   0   0   0   0   2   18   RTKN 2   1   1   0   0   0   0   2   19   D N AS E1 L 3   1   1   0   0   0   0   2   20   PRK C Q   1   0   1   0   0   1   3   21   PTPN 2 2   1   1   1   0   0   0   3   22   T L R4   1   1   0   0   0   1   3   23   I C AM 3   1   1   0   0   0   1   3   24   AI FM 2   1   0   0   0   0   1   2   25   FU T 2   1   1   0   0   0   1   3   26   N O S 2   1   0   0   0   0   1   2   27   WDFY 4   1   1   0   0   0   0   2   28   S H 2 B 3   1   1   0   0   0   1   3   29   N O D 2   1   1   0   0   0   1   3   30   H L A - D Q B1   1   1   0   0   0   1   3   31   C 6 O R FL5   1   1   0   0   0   1   3   32   T AP2   1   1   0   0   0   1   3   33   BS N   1   1   0   0   0   0   2   34   MS T 1   1   1   0   0   0   1   3   35   H L A - DOB   1   1   0   0   0   1   3   36   H L A - D MA   1   1   0   0   0   1   3   37   ERAP 1   1   1   0   0   0   0   2   38   D C L RE 1 B   1   1   0   0   0   0   2   39   FAM 8 A 1   1   0   0   0   0   0   1   40   T Y K 2   1   1   1   0   0   1   4   41   I L 2 3 R   1   1   1   0   0   1   4   42   G PR3 5   1   1   0   0   0   1   3   43   C C H C R1   1   1   0   0   0   0   2   44   G C K R   1   1   0   0   0   0   2   45   H S PA 1 L   1   1   0   0   0   1   3   46   C U T A   1   1   0   0   0   0   2   47   T C T E1   1   0   0   0   0   0   1   48   N FK BI E   1   1   0   0   0   1   3   49   AARS 2   1   0   0   0   0   1   2   50   BTNL2   1   1   0   0   0   0   2   51   T N XB   1   1   0   0   0   1   3   52   N C F 2   1   0   0   0   0   1   2   53   C D 6   1   1   0   0   0   0   2   54   PS O R S 1 C 2   1   1   0   0   0   0   2   55   U S P8   1   0   0   0   0   1   2   56   ATF6 B   1   0   0   0   0   1   2   57   ME FV   1   0   0   0   0   0   1   58   Z FP5 7   1   1   0   0   0   0   2       T ab le  2 .   Fu n ctio n al  s u m m ar y   o f   p r io r itized   R r is k   g en es   No   G e n e   G e n e   f u n c t i o n   M o l e c u l a r   m e c h a n i s m   A s s o c i a t i o n   w i t h   t h e   i m m u n e   s y s t e m   1   I R A K 1   IL - 1   o r   T L R   s i g n a l   t r a n s d u c t i o n   K i n a s e s   t h a t   a c t i v a t e   t h e   NF - κ B   a n d   M A P K   p a t h w a y s   R e g u l a t i o n   o f   i n n a t e   i m m u n e   r e s p o n s e   2   T Y K 2   C y t o k i n e   s i g n a l   t r a n s d u c t i o n   J A K   f a m i l y   k i n a s e s   t h a t   m e d i a t e   I L - 1 2 ,   I L - 2 3 ,   a n d   i n t e r f e r o n   s i g n a l i n g   R e g u l a t i o n   o f   i m m u n e   a n d   i n f l a m m a t o r y   r e s p o n s e s   3   I L 2 3 R   C y t o k i n e   r e c e p t o r   IL - 2 3   r e c e p t o r   s u b u n i t   t h a t   a c t i v a t e s   t h e   J A K - S T A T   p a t h w a y   D i f f e r e n t i a t i o n   a n d   m a i n t e n a n c e   o f   T h 1 7   c e l l s       Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci     I SS N:   2252 - 8 8 0 6       I n teg r a tive  fu n ctio n a l a n n o ta ti o n   o f rh eu m a to id   a r th r itis   r is k   g en es u s in g   a     ( Mu h a mma d   N u h )   855   TY K 2 ,   as  o n o f   th g en es  with   th h ig h est  in teg r ativ s co r e,   o cc u p ies  ce n tr al  co m p o n en in   th e   cy to k in s ig n alin g   n etwo r k   r e lev an to   R A.   T YK 2   i s   a   m em b er   o f   th J an u s   k in ase  ( J AK)   f am ily   th at  p lay s   a   r o le  in   m ed iatin g   th e   s ig n al   tr an s d u ctio n   o f   v ar io u s   p r o in f la m m ato r y   cy to k in es,  in clu d in g   in ter leu k i n - 1 2   ( I L - 1 2 ) ,   i n ter leu k in - 2 3   ( I L - 2 3 ) ,   an d   in ter f e r o n .   Activ atio n   o f   th e s p ath way s   co n tr i b u tes  to   th e   d if f er e n tiatio n   an d   ac tiv atio n   o f   im m u n ce lls ,   as  well  as  m ain tain in g   th ch r o n ic  in f lam m atio n   th at  c h ar ac ter izes  R [ 3 8 ] - [ 4 0 ] .   T h is   in teg r ativ r esu lt  is   co n s is ten with   p r io r   clin ical  an d   ex p er im en tal  r esear c h ,   in clu d in g   ev id en ce   f r o m   in ter n atio n al  c o h o r ts   wh er ein   TY K 2   v ar ian ts   h a v b ee n   a s s o ciate d   with   R s u s ce p tib ilit y   an d   f u n ctio n al   im p ac o n   im m u n p ath way s .   I n   ad d itio n ,   s tu d ies  in   E ast  Asi an   p o p u latio n s   h av s im ilar ly   r ep o r ted   ass o ciatio n s   b etwe en   TY K 2   p o ly m o r p h is m s   an d   R r is k ,   s u p p o r tin g   th r elev a n ce   o f   TY K 2   ac r o s s   d iv er s g en etic  b ac k g r o u n d s .   T h is   co n v er g en ce   o f   g en etic   an d   f u n ctio n al  a n n o tatio n   e v id e n c r ein f o r ce s   t h e   ef f ec tiv en ess   o f   J AK  p ath way   m o d u latio n   in   s u p p r ess in g   in f lam m at o r y   ac tiv ity   an d   im p r o v in g   clin ical   m an if estatio n s   o f   R A,   as  d e m o n s tr ated   in   clin ical  tr ials   o f   J AK  in h ib ito r s   th at  tar g et  TY K 2 - m ed iated   s ig n alin g   [ 4 1 ] ,   [ 4 2 ] .   T h u s ,   th id en ti f icatio n   o f   TY K 2   in   th p r esen s tu d y   n o o n l y   alig n s   with   th e   in ter n atio n al  liter atu r b u al s o   u n d er s co r es  its   p o ten tial  tr an s latio n al  r elev an ce   to   p o p u latio n - s p ec if ic  R A   r esear ch   an d   t h er ap e u tic  s tr ateg ies.   I L2 3 R   s h o ws  co n s is ten in v o lv em en ac r o s s   all  lay er s   o f   J AK STAT   s ig n alin g   p ath way   an aly s is .   I L2 3 R   is   th m ajo r   r ec e p to r   s u b u n it  f o r   in ter leu k in - 2 3   ( I L - 2 3 ) ,   c y to k in th at  p lay s   an   i m p o r tan r o le  in   th d if f er en tiatio n ,   ex p a n s io n ,   a n d   m ain ten a n ce   o f   T   h elp er   1 7   ( T h 1 7 )   ce lls .   Activ atio n   o f   t h I L - 2 3 /T h 1 7   a x is   co n tr ib u tes  to   th e   p r o d u ctio n   o f   p r o in f lam m ato r y   cy to k i n es  k n o wn   to   p lay   r o le  i n   a m p lify in g   s y n o v ial  in f lam m atio n   an d   jo in tis s u d am ag in   R [ 4 3 ] - [ 4 5 ] .   T h p r io r itizatio n   o f   I L2 3 R   in   th is   in teg r ativ e   b io in f o r m atics  an aly s is   is   co n s is ten with   p r ev io u s   in ter n ati o n al  s tu d ies  d em o n s tr atin g   th at  d y s r eg u latio n   o f   th I L - 2 3 /Th 1 7   p ath way   r ep r esen ts   o n o f   th e   d o m in an t   i m m u n e   m ec h an is m s   s u s tain in g   ch r o n ic   s y n o v ial  in f lam m atio n   in   R [ 4 6 ] .   I n   ad d itio n ,   r ec e n g en o m ic  an d   im m u n o lo g ical  s tu d ies  h av r ep o r ted   s ig n if ica n ass o ciatio n s   b etwe en   I L2 3 R   v ar ian ts   an d   R s u s ce p tib ilit y ,   f u r t h er   s u p p o r tin g   th r o le  o f   I L2 3 R - m ed iated   s ig n alin g   in   d is ea s p ath o g en esis   ac r o s s   d if f er en p o p u latio n s   [ 4 7 ] .   T h u s ,   th id e n tific atio n   o f   I L2 3 R   as  a   p r io r ity   g en in   th is   s tu d y   r ein f o r ce s   th ce n tr al  co n t r ib u tio n   o f   th T h 1 7   a x is   to   R an d   s u p p o r ts   its   r elev an ce   as a   p o ten tial ta r g et  f o r   im m u n o m o d u lato r y   an d   p r ec is io n - b ased   th er ap e u tic  s tr ateg ies.   Me an wh ile,   I R A K 1   is   co n s is ten tly   id e n tifie d   in   all  la y er s   o f   a n aly s is   an d   m ap p ed   in   t h T o ll - lik e   r ec ep to r   ( T L R ) NF - κB  s ig n al in g   p ath way .   I R A K 1   is   k ey   k in ase  in   T L R   r ec ep to r   an d   i n ter leu k in - 1   ( I L - 1 )   r ec ep to r   s ig n al   tr an s d u ctio n ,   wh ich   p lay s   a   ce n tr al  r o le   in   th ac tiv atio n   o f   in n ate   im m u n r esp o n s es.  Activ atio n   o f   th is   p ath way   tr ig g er s   d o wn s tr ea m   co m p lex   p h o s p h o r y latio n   an d   ac tiv at io n   o f   th NF - κB   tr an s cr ip tio n   f ac to r ,   wh ich   in   tu r n   in cr ea s es  th ex p r ess io n   o f   v ar io u s   p r o in f lam m ato r y   m ed iato r s .   Dy s r eg u latio n   o f   th T L R NF - κ B   p ath way   h as  b ee n   s h o wn   to   co n tr ib u te  to   th am p l if icatio n   o f   c h r o n ic  in f lam m atio n   a n d   tis s u d am ag in   R A.   Pre v io u s   s tu d ies  h av s h o wn   th at  g en etic  v a r iatio n s   an d   i n cr ea s ed   I R A K 1   ac tiv ity   ar ass o ciate d   with   in cr ea s ed   in f lam m ato r y   r esp o n s es  an d   d is ea s s ev er ity   in   R [ 4 8 ] ,   [ 4 9 ] .   T h p r io r itizatio n   o f   I R A K 1   in   th is   i n teg r ativ e   an aly s is   is   co n s is ten with   p r ev io u s   s tu d ies  r ep o r tin g   ass o ciatio n s   b etwe en   I R A K 1   g en etic  v ar ia n ts   an d   h eig h ten ed   in f lam m ato r y   r esp o n s es  as  well  as  in cr ea s ed   d is ea s s ev er ity   in   R A,   in clu d in g   f in d in g s   f r o m   p o p u latio n - b ased   r esear ch   an d   m o lecu la r   in v esti g atio n s   [ 5 0 ] ,   [ 5 1 ] .   T h u s ,   th e   id en tific atio n   o f   I R A K 1   in   th is   s tu d y   u n d er s co r es  th e   im p o r tan ce   o f   in n at im m u n s ig n alin g   in   R p ath o g e n esis   an d   s u p p o r ts   I R A K 1 - m ed iated   p ath way s   as  r ele v an tar g ets  f o r   in f lam m atio n - f o c u s ed   an d   im m u n o m o d u lato r y   th e r ap eu ti s tr ateg ies.   T h en r ich e d   GO   ter m s   r elate d   to   cy to k in e - m ed iated   s ig n alin g ,   im m u n ac tiv at io n ,   an d   in f lam m ato r y   r esp o n s es,  to g e th er   with   KE GG  p at h way s   s u ch   as  J AK STAT   s ig n alin g ,   T o ll - lik r ec ep to r   s ig n alin g ,   a n d   T h 1 7   ce ll   d if f e r en tiatio n ,   r ef lect  k ey   im m u n o p ath o lo g ical  m ec h an is m s   u n d er ly in g   R A.   T h es e   p ath way s   ar k n o wn   to   r eg u late  b o th   in n ate  an d   a d ap tiv im m u n r esp o n s es,  co n tr i b u tin g   to   p er s is ten s y n o v ial  in f lam m atio n ,   im m u n ce ll  in f iltra tio n ,   an d   jo in d am ag e.   C o llectiv ely ,   TY K 2 I L2 3 R ,   an d   I R A K 1   r ep r esen th r ee   m aj o r   im m u n ax es   th at  in ter ac in   th p ath o g en esis   o f   R A,   n am ely   cy to k in s ig n alin g   ( TY K 2 ) ,   th I L - 2 3 /Th 1 7   p ath way   ( I L2 3 R ) ,   a n d   p r im ar y   in f lam m ato r y   ac tiv ati o n   v ia  T L R NF - κB  ( I R A K 1 ) .   T h in teg r atio n   o f   th ese  th r ee   p ath way s   ( Fig u r e s   3   an d   4 )   r ef lects th co m p lex ity   o f   im m u n r eg u latio n   in   R A   an d   p r o v id es  r elev an m o le cu lar   f r am ewo r k   f o r   th d e v el o p m en o f   m o r tar g eted   a n d   p r ec is b io m ar k er s   an d   th er a p eu tic  s tr ateg ies.   Alth o u g h   th is   s tu d y   s u cc ess f u lly   id en tifie d   p r io r ity   R ca n d id ate  g en es  th r o u g h   a   m u lt i - d atab ase  b io in f o r m atics  ap p r o ac h ,   it  h a s   s ev er al  lim itatio n s .   T h e   an a ly s is   was  b ased   en tire ly   o n   s e co n d ar y   d ata   f r o m   p u b lic  d atab ases ,   d o es   th r esu lts   d ep en d   o n   t h q u ality   a n d   co v er ag e   o f   th e   av ailab le   d ata.   I n   ad d itio n ,   t h b io in f o r m atics  ap p r o ac h   u s ed   h as  n o b ee n   co m p lem en ted   b y   ex p e r im en tal  v alid ati o n ,   s o   t h ca u s al   r elatio n s h ip   b etwe en   g en etic  v ar iatio n   an d   R p ath o g en esis   ca n n o y et  b co n f ir m ed .   T h er ef o r e,   f u r t h er   r esear ch   in v o l v in g   f u n ctio n al  v alid atio n   an d   clin ical  s tu d ies  is   n ee d ed   to   c o n f ir m   th b io l o g ical  an d   clin ical   r elev an ce   o f   th id e n tifie d   p r i o r ity   g en es.     Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
                          I SS N :   2 2 5 2 - 8 8 0 6   I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci Vo l.  15 ,   No .   3 Sep tem b er   20 26 :   8 4 8 - 859   856       Fig u r 3 .   I n teg r ativ v is u aliza tio n   to ll - lik r ec e p to r   s ig n alin g   p ath way   o f   I R A K 1 ,   TY K 2   in v o lv em en t in   k ey   im m u n o lo g ical  s ig n alin g   p ath way s   ass o ciate d   with   RA           Fig u r 4 .   I n teg r ativ v is u aliza tio n   o f   t h J AK - STAT   s ig n alin g   p ath way   o f   I L2 3 R   in v o lv em en t in   k ey   im m u n o lo g ical  s ig n alin g   p ath way s   ass o ciate d   with   R A       T h e   f i n d i n g s   d i s c u s s e d   a b o v e   a r e   d i r e c t l y   s u p p o r t e d   b y   i n t e g r a t i v e   g e n o m i c   e v i d e n c e ,   w h e r e a s   t h e   p o t e n t i a l   c l i n i c a l   a n d   t r a n s l a t i o n a l   i m p l i c a t i o n s   s h o u l d   b e   i n t e r p r e t e d   c a u t i o u s l y   a n d   c o n s i d e r e d   h y p o t h e s i s - g e n e r a t i n g .   I m p o r t a n t l y ,   w e   h a v e   n o w   e l a b o r a t e d   t h e   c l i n i c a l   a n d   p u b l i c   h e a l t h   i m p l i c a t i o n s   o f   t h e s e   f i n d i n g s .   F r o m   a   c l i n i c a l   p e r s p e c t i v e ,   t h e   i d e n t i f i c a t i o n   o f   T Y K 2 I L 2 3 R ,   a n d   I R A K 1   a s   p r i o r i t i z e d   g e n e s   m a y   c o n t r i b u t e   t o   i m p r o v e d   r i s k   s t r a t i f i c a t i o n ,   e a r l y   d e t e c t i o n ,   a n d   t h e   d e v e l o p m e n t   o f   t a r g e t e d   t h e r a p e u t i c   s t r a t e g i e s ,   p a r t i c u l a r l y   i n   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.
I n t J Pu b lic  Hea lth   Sci     I SS N:   2252 - 8 8 0 6       I n teg r a tive  fu n ctio n a l a n n o ta ti o n   o f rh eu m a to id   a r th r itis   r is k   g en es u s in g   a     ( Mu h a mma d   N u h )   857   t h e   c o n t e x t   o f   p r e c i s i o n   m e d i c i n e   a p p r o a c h e s   f o r   R A   m a n a g e m e n t .   F r o m   a   p u b l i c   h e a l t h   p e r s p e c t i v e ,   u n d e r s t a n d i n g   t h e   g e n e t i c   a n d   m o l e c u l a r   m e c h a n i s m s   u n d e r l y i n g   R A   s u s c e p t i b i l i t y   m a y   s u p p o r t   t h e   d e v e l o p m e n t   o f   p o p u l a t i o n - b a s e d   s c r e e n i n g   s t r a t e g i e s ,   i m p r o v e   e a r l y   i n t e r v e n t i o n   e f f o r t s ,   a n d   u l t i m a t e l y   r e d u c e   d i s e a s e   b u r d e n ,   d i s a b i l i t y ,   a n d   l o n g - t e r m   h e a l t h c a r e   c o s t s   a s s o c i a t e d   w i t h   R A .   T h e s e   f i n d i n g s   a l s o   p r o v i d e   a   v a l u a b l e   f o u n d a t i o n   f o r   f u t u r e   t r a n s l a t i o n a l   r e s e a r c h   a i m e d   a t   i m p r o v i n g   p r e v e n t i v e   a n d   p e r s o n a l i z e d   t r e a t m e n t   s t r a t e g i e s .       4.   CO NCLU SI O N   T h i s   s t u d y   d e m o n s t r a t es   t h at   a   m u l t i - d a t a b as e - b a s e d   b i o i n f o r m a t i cs   a p p r o a c h   i s   e f f ec t i v e   i n   i d e n t i f y i n g   c a n d i d a t e   g e n es   w i t h   c o n s is t en t   g e n e t i a n d   f u n c t i o n al   s u p p o r t   i n   R A .   T h e   i n t e g r a t i o n   o f   m i s s e n s SN Ps ,   ci s - e Q T L ,   G O   a n n o t at i o n ,   a n d   KE G G   p a t h w a y   m a p p i n g   d a t a   p l a c e s   T YK 2 I L 2 3 R ,   a n d   I R A K 1   a s   p r i o r it y   g e n e s   i n v o l v e d   i n   k e y   i m m u n e   p a t h w a y s   t h a t   p l a y   a   r o l e   i n   R A   p a t h o g e n e s i s .   T h es e   f i n d i n g s   p r o v i d e   m o r e   c o m p r e h e n s i v e   m o l e c u l a r   i n s ig h t s   i n t o   t h e   i n f l a m m a t o r y   m ec h a n i s m s   o f   R A   a n d   s u p p o r t   th e   p o t e n t i a o f   t h ese  t h r e e   g e n e s   as   b i o m a r k e r s   a n d   t h e r a p e u t i c   t a r g e ts .   H o w e v e r ,   ex p e r i m e n t a l   v al i d a ti o n   a n d   f u r th e r   c l i n i ca l   s t u d i e s   a r e   s t il l   n e e d e d   t o   c o n f i r m   t h e   b i o l o g i c a l   r e l e v a n ce   a n d   c l i n i ca l   i m p l i ca t i o n s   o f   t h e   i d e n t i f i e d   p r i o r i t y   g e n e s .       ACK NO WL E DG M E N T   T h au t h o r   wo u ld   lik e   to   th an k   Un iv e r s itas   Ah m ad   Da h lan   f o r   its   in s titu tio n al   s u p p o r t,  as   well  as  th s u p er v is in g   lectu r er s   wh o   p r o v id ed   g u i d an ce   an d   in p u t,  p a r ticu lar ly   in   th f ield   o f   b io in f o r m atics,  d o es  th at   th is   r esear ch   co u ld   r u n   s m o o th ly .         F UNDING   I NF O R M A T I O   T h is   r esear ch   r ec eiv ed   n o   s p ec if ic  g r a n f r o m   an y   f u n d in g   ag e n cy   in   th p u b lic,   co m m er cial  o r   n o tf o r - p r o f it secto r s .       AUTHO CO NT RI B UT I O NS ST A T E M E N T     T h is   jo u r n al   ad o p ts   th C o n tr i b u to r   R o les  T ax o n o m y   ( C R ed iT)   to   e n s u r tr a n s p ar en c y   an d   clar ity   o f   in d iv id u al  a u th o r   co n tr ib u tio n s .   E ac h   au th o r   h as  m ad e   s u b s tan tial  co n tr ib u tio n s   to   th wo r k   an d   m ee ts   th e   au th o r s h ip   c r iter ia.     Na m o f   Aut ho r   C   M   So   Va   Fo   I   R   D   O   E   Vi   Su   P   Fu   Mu h am m ad   N u h                                 L o lita                                 C     C o n c e p t u a l i z a t i o n   M     M e t h o d o l o g y   So     So f t w a r e   Va     Va l i d a t i o n   Fo     Fo r mal   a n a l y s i s   I     I n v e s t i g a t i o n   R     R e so u r c e s   D   :   D a t a   C u r a t i o n   O   :   W r i t i n g   -   O r i g i n a l   D r a f t   E   :   W r i t i n g   -   R e v i e w   &   E d i t i n g   Vi     Vi su a l i z a t i o n   Su     Su p e r v i s i o n   P     P r o j e c t   a d mi n i st r a t i o n   Fu     Fu n d i n g   a c q u i si t i o n         CO NF L I C T   O F   I N T E R E S T   ST A T E M E NT     Au th o r s   s tate  n o   co n f lict o f   in t er est.       I NF O RM E CO NS E N T   T h is   s tu d y   d id   n o in v o lv d ir ec in ter ac tio n   with   h u m a n   p a r ticip an ts .   All  an aly s es  wer co n d u cte d   u s in g   an o n y m ized   a n d   p u b licl y   av ailab le  d atasets .   T h er ef o r e ,   in f o r m ed   co n s en t w as n o t r e q u ir ed .       E T H I CAL AP P RO V AL     T h is   s tu d y   was  co n d u cted   in   ac co r d an ce   with   th p r in cip le s   o f   th Dec lar atio n   o f   Helsin k i.  E th ical  ap p r o v al  was  n o r eq u ir ed   b e ca u s th s tu d y   u s ed   an o n y m ized ,   p u b licly   a v ailab le  d ata  an d   d id   n o in v o lv e   d ir ec t in ter ac tio n   with   h u m an   p ar ticip an ts .       DATA AV AI L AB I L I T   Th m ain   d ata  an aly ze d   in   th i s   s tu d y   wer o b tain ed   f r o m   p u b lic  d atab ases ,   n am ely   GW AS  C a talo g ,   Hap lo R eg   v . 4 . 2 ,   W eb Gestalt,  an d   KE GG - Un iPro t .   T h p r o ce s s ed   d ata  r esu ltin g   f r o m   th is   an aly s is   ar av ailab le  f r o m   th co r r esp o n d in g   au th o r   u p o n   r ea s o n ab le  r eq u est.   Evaluation Warning : The document was created with Spire.PDF for Python.